周愛(ài)知，李偉強(qiáng)，曹佳淋，廖少羽

（惠州市第三人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，廣東 惠州 516002）

鼻咽癌是指發(fā)生于鼻咽部黏膜上皮的惡性腫瘤，多發(fā)生于南方地區(qū)，且有家族聚集傾向，常見(jiàn)癥狀為聽(tīng)力下降、耳鳴、涕中帶血等。據(jù)報(bào)道，鼻咽癌的發(fā)病率在耳鼻咽喉惡性腫瘤中居于首位。故其診療方案成為臨床醫(yī)生和患者家屬十分關(guān)注的重點(diǎn)，尤其是診斷臨床分期和選擇治療方案，因此，尋找其他客觀定量指標(biāo)以輔助準(zhǔn)確分期是非常重要的[1]。目前血清EB病毒Rta蛋白抗體IgG（Rta-IgG），癌胚抗原（CEA），血清細(xì)胞角蛋白19片段21-1（CYFRA21-1） 被廣泛應(yīng)用于鼻咽癌診斷中[2]。有研究表明，不同的腫瘤標(biāo)志物對(duì)鼻咽癌的臨床分期診斷價(jià)值也各不相同。鑒于此，本研究探討血清Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1檢測(cè)對(duì)鼻咽癌的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法一、一般資料 采用回顧性分析法，收集2018年10月-2019年10月我院收治的34例鼻咽癌患者臨床資料，將其設(shè)為鼻咽癌組，并選取34例同期于我院接受健康體檢者，將其設(shè)為健康組。鼻咽癌組男18例，女16例；年齡28～75歲，平均年齡（50.66±5.23） 歲；病理分型：高分化鱗癌20例，低分化鱗癌14例；臨床分期：Ⅰ期1例，Ⅱ期5例，Ⅲ期13例，Ⅳ期15例。健康組中男17例，女17例；年齡30～75歲，平均年齡（51.42±5.42）歲。2組一般資料比較，差異不顯著（P＞0.05），具有可對(duì)比性。

二、入選標(biāo)準(zhǔn) ⑴納入標(biāo)準(zhǔn)：觀察組患者均符合《現(xiàn)代腫瘤學(xué)》[3]中鼻咽癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)病理結(jié)果確診，未經(jīng)任何治療；健康體檢者經(jīng)血清學(xué)、鼻咽鏡檢查及活檢、MRI、CT等各項(xiàng)臨床檢查均未見(jiàn)異常；臨床資料完整，且同意翻閱。⑵排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重肝、肺等重要臟器功能障礙患者；合并血液系統(tǒng)疾病或感染性疾病患者；合并精神異常，無(wú)法正常溝通交流患者；合并高血壓、糖尿病等免疫系統(tǒng)疾病。

三、方法 采取所有入選者晨起空腹靜脈血3 mL，離心后，取上層血清，并將其放置于-20℃環(huán)境中保存、待檢。采用間接酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA） 法檢測(cè)血清中EB病毒Rta蛋白抗體IgG（Rta-IgG） 水平：將血清按1∶9的比例稀釋后，每孔加100μL，在37℃下孵育30min，充分洗滌后，每孔加入100μL辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗人IgG抗體，同樣在37℃下孵育30min，再洗滌后，加入100μL TMB底物，37℃下顯色10min，加入2mol/L H2SO4100μL終止反應(yīng)。酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)測(cè)每孔吸光度（A）值。該樣品的相對(duì)A值=標(biāo)本的A值除以鈣反應(yīng)板陽(yáng)性對(duì)照A值。測(cè)定抗Rta-IgG抗體以A=0.22為臨界值，Rta-IgG以標(biāo)本吸光度A值/臨界值≥1判斷為陽(yáng)性。采用瑞士Roche公司上海公司生產(chǎn)的Elecsys1010全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清細(xì)胞角蛋白19片段21-1（CYFRA21-1） 水平，血清CYFRA21-1水平＞3.3μg/L為陽(yáng)性。采用瑞士Roche公司上海公司生產(chǎn)的Roche1010型全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑檢測(cè)血清癌胚抗原（CEA） 水平。血清CEA≥5μg/mL判斷為陽(yáng)性，本研究所使用儀器與試劑均嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書進(jìn)行。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)量資料采用“±s”表示，采用t檢驗(yàn)；繪制ROC曲線并計(jì)算曲線下面積（AUC） 值，AUC值＞0.9表示診斷性能較高，0.71～0.90表示有一定的診斷性，0.5～0.7表示診斷性能較差。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果一、血清Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1水平 與健康組相比，鼻咽癌組Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1水平均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 2組患者血清Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1水平對(duì)比（±s）

表1 2組患者血清Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1水平對(duì)比（±s）

組別 Rta-IgG CEA（μg/mL） CYFRA21-1（μg/L）鼻咽癌組 （n=34） 27.65±5.21 7.15±1.52 5.16±3.22健康組 （n=34） 8.32±1.75 1.96±0.42 0.88±0.22 20.508 19.191 7.732 P 0.000 0.000 0.000 t

二、Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1檢測(cè)對(duì)鼻咽癌的診斷價(jià)值分析 繪制ROC曲線結(jié)果顯示，Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1聯(lián)合應(yīng)用于診斷鼻咽癌的曲線下面積為0.955，具有較高的診斷價(jià)值，見(jiàn)表2，ROC曲線圖，見(jiàn)圖1。

圖1 ROC曲線圖

表2 Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1檢測(cè)對(duì)鼻咽癌診斷的評(píng)估價(jià)值

討 論華南地區(qū)鼻咽癌發(fā)病率較高，與Epstein Barr病毒（EBV） 密切相關(guān)。近年來(lái)大量研究結(jié)果表明，多細(xì)胞遺傳、基因表達(dá)的改變和EBV感染等損害了正常細(xì)胞功能，是導(dǎo)致鼻咽癌發(fā)生的主要原因。因此，檢測(cè)EBV可作為鼻咽癌診斷的輔助手段[4]。有研究報(bào)道，鼻咽癌細(xì)胞中不僅存在EBV基因組，而且存在多種EBV特異性抗原，因此，檢測(cè)EBV相關(guān)抗原抗體及相關(guān)腫瘤標(biāo)志物對(duì)鼻咽癌高危人群的早期發(fā)現(xiàn)、診斷和治療具有重要意義[5]。本研究結(jié)果顯示，與健康組相比，鼻咽癌組Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1水平均較高，且繪制ROC曲線結(jié)果顯示，Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1聯(lián)合應(yīng)用于診斷鼻咽癌的曲線下面積為0.955，具有較高的診斷價(jià)值，表明Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1水平與鼻咽癌密切相關(guān)，Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1水平對(duì)早期發(fā)現(xiàn)與治療鼻咽癌具有積極意義，與何平[6]等學(xué)者研究將結(jié)果一致，分析其原因在于，EB病毒與鼻咽癌的產(chǎn)生與發(fā)展有密切聯(lián)系，Rta是EBV裂解早期基因BRLF1表達(dá)的一種編碼蛋白，可誘導(dǎo)鼻咽上皮細(xì)胞分裂和癌變，通過(guò)檢測(cè)RTA-IgG水平可以早期發(fā)現(xiàn)鼻咽癌[7]；CEA是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物，含有人類胚胎抗原的酸性球蛋白，其分泌受到胚胎細(xì)胞相關(guān)基因控制，當(dāng)腫瘤細(xì)胞的基因調(diào)控受損后，胎兒蛋白的合成可以重新開(kāi)始，從而造成CEA的高表達(dá)狀態(tài)；CYFRA21-1廣泛分布于鱗狀上皮和正常組織表面，鼻咽癌多起源于鼻咽鱗狀上皮，其含量較低，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生惡性病變時(shí)，可使蛋白酶被激活，細(xì)胞降解加速，并將大量的細(xì)胞角質(zhì)蛋白片段釋放到血液中[8]。由此可見(jiàn)，Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1聯(lián)合檢測(cè)可作為早期鼻咽癌檢測(cè)指標(biāo)，具有較高的臨床價(jià)值。

綜上所述，Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1水平與鼻咽癌密切相關(guān)，Rta-IgG，CEA，CYFRA21-1水平對(duì)早期發(fā)現(xiàn)與治療鼻咽癌具有積極意義，可為臨床診斷、治療提供參考依據(jù)，值得推廣應(yīng)用。