亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化二氫槲皮素提取工藝*

        2021-02-25 01:50:34逄弓一郎卓小玉劉玉婷
        化學(xué)工程師 2021年2期
        關(guān)鍵詞:星點落葉松槲皮素

        逄弓一郎,卓小玉,劉玉婷,田 明

        (黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),黑龍江 哈爾濱150040)

        二氫槲皮素因具有抗腫瘤、抗氧化、抗輻射、抗病毒、抗心血管系統(tǒng)疾病、改善毛細(xì)血管微循環(huán)、改善腦部血液循環(huán)、抗血小板凝聚等作用,用于治療腦梗及其后遺癥、腦血栓、心臟冠狀動脈等疾病,為近年來廣泛研究[1]。俄羅斯西伯利亞落葉松材料廣泛、消耗量大,近些年逐漸成為生產(chǎn)工業(yè)原料,其廢料利用率低,本實驗以貼合生產(chǎn)實際考慮廢物利用,以原落葉松廢料為主從中提取二氫槲皮素,考察原料經(jīng)后處理加熱時間、提取用乙醇用量、濃度、時間、次數(shù)多因素對其二氫槲皮素提取含量的影響,采用單因素實驗與星點實驗對比,對二氫槲皮素提取流程優(yōu)化,以HPLC 色譜法快速、準(zhǔn)確對二氫槲皮素含量進(jìn)行測定。星點設(shè)計效應(yīng)面法是優(yōu)化實驗流程的常用方法,基于非線性模型設(shè)計預(yù)測性高,方法高效、簡便[2]。

        1 實驗部分

        1.1 儀器和試劑

        FW135 型中藥粉碎機(jī)(天津泰斯特實驗儀器有限公司);DZTW 型調(diào)溫電熱套(北京永光明實驗設(shè)備有限公司);AB204-N 電子分析天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司);Thermo-Sciencetific Ultimate3000 高效液相色譜儀(配有四元泵、在線脫氣裝置、柱溫箱、控溫自動進(jìn)樣器和UV 檢測器,美國Thermo 公司);超聲波清洗機(jī)(MP5200H,陜西鵬展科技有限公司)。

        落葉松(俄羅斯);二氫槲皮素對照品(批號:PS000323 成都普思生物科技有限公司);乙醇、甲醇、甲酸均為色譜純;實驗用水為純化水。

        1.2 方法

        1.2.1 二氫槲皮素含量測定方法的建立

        1.2.1.1 色譜條件 二氫槲皮素含量測定采用高相液相法,色譜條件色譜柱AgilentZORBAX SBC18,250mm×4.6mm 流動相為甲醇-甲酸(0.15%);波長290nm;流速1.0mL·min-1;柱溫28℃;進(jìn)樣量10μL。

        1.2.1.2 溶液的制備

        對照品溶液 電子天平稱取二氫槲皮素對照品精密稱定(15.0mg),置10mL 容量瓶中,加色譜甲醇定容搖勻,用0.45μm 的微孔濾膜過濾即得(約1.50mg·mL-1)。

        供試品溶液 精密稱取供試品細(xì)粉15g,加入甲醇5mL 超聲30min,冷卻至室溫,用0.45μm 微孔濾膜過濾即得。

        1.2.2 單因素考察

        1.2.2.1 提取條件 稱取落葉松適量,粉碎過8 目篩,稱取20g,6 份,分別加100mL 50%、60%、70%、80%、90%、95%的乙醇浸泡1h 后,加熱回流提取2次,每次1h,濾過,合并濾液,用各自乙醇濃度定容在100mL 容量瓶中,用0.45μm 微孔濾膜過濾1mL,HPLC 法測定含量。

        色譜條件 色譜柱AgilentZORBAX SB-C18,250mm×4.6mm,5μm;流動相為甲醇-甲酸(0.1%);波長290nm;流速1.0mL·min-1;柱溫35℃;進(jìn)樣量10μL。

        1.2.2.2 溶劑用量 稱取落葉松粗粉20.0g,5 份,分別加4、6、8、10、12 倍量80%乙醇浸泡1h 后,加熱回流提取2 次,每次1h,濾過,合并濾液,用80%乙醇定容在100mL 容量瓶中,用0.45μm 微孔濾膜過濾1mL,HPLC 法測定含量。

        1.2.2.3 提取時間 稱取落葉松粗粉20.0g,5 份,加100mL 80%乙醇浸泡60min 后,分別回流提取60、90、120、150、180min 后,濾過,用80%乙醇定容在100mL 容量瓶中后,用0.45μm 微孔濾膜過濾1mL,HPLC 法測定含量。

        1.2.3 星點試驗

        提取工藝優(yōu)化應(yīng)用的是星點設(shè)計效應(yīng)面法,以此優(yōu)化落葉松在乙醇提取的條件下最優(yōu)方案。根據(jù)“1.2.2”項下因素水平篩選結(jié)果,最終選乙醇濃度80%~95%(X1)、溶劑用量4~10 倍(X2)、提取時間1.5~3h(X3)為考察因素水平。由于提取次數(shù)為非連續(xù)變量,在星點設(shè)計處理結(jié)果模型擬合中比較困難,再結(jié)合單因素考察結(jié)果[3],把提取次數(shù)定為2 次,分別測定二氫槲皮素質(zhì)量分?jǐn)?shù),取其平均數(shù)作為響應(yīng)值,優(yōu)選提取工藝。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 單因素考察結(jié)果

        2.1.1 提取條件對二氫槲皮素含量的影響 在乙醇濃度為50%、60%、70%、80%、90%、95%浸泡藥材1h,加熱回流提取2 次,每次1h 的條件下,考察提取液乙醇不同濃度對落葉松中二氫槲皮素的含量影響。結(jié)果見表1、圖1。

        表1 不同乙醇濃度提取二氫斛皮素含量測定結(jié)果Tab.1 Determination results of dendrobium dendrobium content extracted by different ethanol concentrations

        圖1 不同乙醇濃度含量測定結(jié)果Fig.1 Determination results of different ethanol concentrations

        結(jié)果表明,濃度為80%到95%的差異不顯著,RSD 值接近5%,綜合考慮試劑用量,避免造成試劑浪費(fèi)等因素,所以選擇提取液乙醇濃度80%為適宜濃度。

        2.1.2 溶劑用量對二氫槲皮素含量的影響 在加入4、6、8、10、12 倍量80%乙醇浸泡藥材1h 后,加熱回流提取2 次,每次1h 的條件下,考察提取液乙醇不同用量對落葉松中二氫槲皮素的含量影響。結(jié)果見表2、圖2。

        表2 不同溶劑量提取二氫斛皮素含量測定結(jié)果Tab.2 Determination results of dihydrodendrobin content extracted with different solvent amounts

        圖2 不同乙醇用量含量測定結(jié)果Fig.2 Determination results of different amounts of ethanol

        結(jié)果表明,落葉松中二氫槲皮素的含量隨著提取液用量的增加而增大,當(dāng)溶劑用量為12 倍量時,二氫槲皮素的提取效果與10 倍量提取量幾乎一樣,說明無差異,故確定提取液用量為10 倍量。

        2.1.3 提取時間對二氫槲皮素含量的影響 在回流提取時間分別為1、1.5、2、2.5、3h 的條件下,考察提取時間對落葉松中二氫槲皮素的含量影響。結(jié)果如表3、圖3。

        表3 不同提取時間對二氫斛皮素含量測定結(jié)果Tab.3 Determination results of the content of dihydrodendrobin at different extraction times

        圖3 不同提取時間量含量測定結(jié)果Fig.3 Determination results of different amounts of extraction time

        結(jié)果表明,二氫槲皮素的含量隨著回流提取時間增大而增大,在加熱回流2h 后趨于平緩,考慮實驗時間因素,故選擇回流提取時間2h 最為適宜。

        2.2 星點實驗結(jié)果

        根據(jù)“1.2.2”項下因素水平篩選結(jié)果,最終選乙醇濃度80%~95%(X1)、溶劑用量4~10 倍(X2)、提取時間90~180min(X3)為考察因素水平。由于提取次數(shù)為非連續(xù)變量,在星點設(shè)計處理結(jié)果模型擬合中比較困難,再結(jié)合單因素考察結(jié)果,把提取次數(shù)定為2 次,分別測定二氫槲皮素質(zhì)量分?jǐn)?shù),取其平均數(shù)作為響應(yīng)值。優(yōu)選提取工藝。CCD 效應(yīng)面試驗的因素水平見表4;CCD 效應(yīng)面試驗設(shè)計與結(jié)果見表5。

        二氫槲皮素質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)=每1mL 落葉松中二氫槲皮素含量×稀釋倍數(shù)/落葉松木藥材取樣量。

        表4 CCD 效應(yīng)面試驗的因素水平Tab.4 Factor level of CCD effect surface test

        表5 CCD 效應(yīng)面試驗設(shè)計與結(jié)果Tab.5 CCD effect surface test design and results

        使用statistica 軟件將表1 數(shù)據(jù)進(jìn)行非線性擬合。以二氫槲皮素得率為因變量對各因素進(jìn)行多元線性回歸和二項式擬合,多元非線性回歸:

        Y =84.08 +0.25X1+0.13X2+0.11X3+0.12X1X2+0.24X2X3-0.20X1X3-0.31X12-0.12X22-0.13X32。經(jīng)t檢驗顯示,模型方程具有顯著性(P<0.05),r=0.9866,表明該模型的擬合良好。對模型方程求極值得X1=81.21%,X2=8.21,X3=118.15min。

        2.3 提取工藝參數(shù)優(yōu)化

        把因變量與另兩因素擬合為三維曲面圖,因只能表達(dá)含兩個因素的函數(shù),故固定3 個變量中的一個為中值,再以擬合的目標(biāo)函數(shù)為數(shù)學(xué)模型,繪制因變量曲面圖。

        根據(jù)Design expert 8.0.6 軟件分析結(jié)果,見圖4,得到二氫槲皮素提取率較佳工藝范圍:X1:60~90%,X2:4~10 倍,X3:90~180min。結(jié)果表明,根據(jù)Design expert 8.0.6 軟件分析結(jié)果及模型方程極值點對應(yīng)的條件,并綜合考慮實際生產(chǎn)情況,選取二氫槲皮素提取工藝為:第一次10 倍量80%乙醇回流120min,第二次8 倍量80%乙醇回流90min,結(jié)果較為理想,二氫槲皮素提出含量較高,可說明此工藝條件具有良好的可行性。

        3 結(jié)論

        本實驗用HPLC 法提取落葉松中的二氫槲皮素,實驗結(jié)果為提取液乙醇濃度為80%、溶劑用量為藥材的10 倍量、提取時間為120min、提取2 次時落葉松中二氫槲皮素含量較高,為163.0mg·mL-1。如若考慮到實際生產(chǎn),乙醇回收問題,在考慮成本情況下,也可將第一次倍量調(diào)制10 倍量、提取時間120min,第二次提取量8 倍量、提取時間90min。

        猜你喜歡
        星點落葉松槲皮素
        山西落葉松雜交良種逾10萬畝
        長白落葉松離體再生體系的建立
        神奇的落葉松提取物
        槲皮素改善大鼠銅綠假單胞菌肺感染
        中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:21
        星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化雄黃乳膏劑的處方組成
        中成藥(2016年4期)2016-05-17 06:08:05
        一種基于數(shù)學(xué)形態(tài)學(xué)的星點提取方法
        槲皮素通過抑制蛋白酶體活性減輕心肌細(xì)胞肥大
        星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)選止鼾顆粒成型工藝
        中成藥(2014年9期)2014-02-28 22:28:51
        槲皮素金屬螯合物的研究與應(yīng)用
        星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)選南瓜多糖提取工藝
        婷婷久久亚洲中文字幕| 免费观看性欧美大片无片| 少妇激情av一区二区| 精精国产xxxx视频在线播放器| 国产成人一区二区三区| 国产成人精品自拍在线观看| 日本免费一二三区在线| 日本一区二区精品高清| 欧美人伦禁忌dvd放荡欲情| 国产做无码视频在线观看浪潮| 中文字幕Aⅴ人妻一区二区苍井空| 国内精品视频成人一区二区| 手机av在线播放网站| 亚洲三级视频一区二区三区| 免费视频爱爱太爽了| 91尤物视频在线观看| 岛国熟女一区二区三区| 丝袜美腿一区二区在线观看| 亚洲av永久一区二区三区| 伊人久久精品无码二区麻豆| 日日躁夜夜躁狠狠久久av| 午夜无码熟熟妇丰满人妻| 在线播放偷拍一区二区| 亚洲av在线观看播放| 亚洲av无码专区亚洲av网站| 真人作爱免费视频| 亚洲午夜无码久久yy6080| 精品人妻一区二区视频| 精品久久综合日本久久综合网| 九九综合va免费看| 人妻夜夜爽天天爽三区麻豆av网站| 国产日韩精品中文字无码| 久久99精品久久久久久久清纯| 中文字幕有码高清| 白白色日韩免费在线观看 | 国语精品一区二区三区| 欧美日韩国产成人综合在线影院 | 天堂av国产一区二区熟女人妻| 午夜不卡无码中文字幕影院| 国产成人精品无码播放| 人妻丝袜中文字幕久久|