郭春梅 矯筱蔓 王超

【摘要】 膏霜乳液類化妝品經(jīng)甲醇直接提取，無需經(jīng)凈化小柱萃取，由高效液相色譜分離，二極管陣列檢測器檢測，對普魯卡因胺等7種組分進(jìn)行測定，回收率均在89.6%～119.1%之間，能夠滿足一般實(shí)驗(yàn)要求，方法簡捷高效。

【關(guān)鍵詞】 膏霜乳液類化妝品;甲醇直接提取;高效液相色譜法

【DOI編碼】 10.3969/j.issn.1674-4977.2021.01.039

Abstract： Direct extraction of Cream and emulsion cosmetics by methanol，There is no need for over purification column，It was separated by HPLC，Determination of diode array detector，Determination of 7 components of procaine amine，The recoveries warebetween 89.6% and 119.1%，Can meet the general experimental requirements，The method is simple and efficient.

Key words： cream and emulsion class cosmetics;direct methanol extraction;high performance liquid chromatography

普魯卡因胺等七種物質(zhì)是局部麻醉劑，人的皮膚局部使用能使皮膚緊致光澤，祛皺。因此有被用在化妝品中的案例。長期或過量使用對人體有很大的傷害、能使面部表情僵硬。辛可卡因毒性很大，使用后顏面或皮膚會(huì)出現(xiàn)潮紅，還會(huì)有過敏反應(yīng)。丁卡因有擴(kuò)張毛細(xì)血管的藥理作，用藥部位常見輕微的紅斑，偶見輕微水腫或瘙癢，罕見更嚴(yán)重的紅斑、水腫或瘙癢。普魯卡因、普魯卡因胺、氯普魯卡因等用量過大或用濃溶液快速注入血管時(shí)，可能引起惡心、出汗、脈速、呼吸困難、顏面潮紅、譫妄、興奮、驚厥。長期使用部分患者出現(xiàn)紅斑性狼瘡樣綜合征。利多卡因能引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的相關(guān)癥狀，比如引起嗜睡、感覺異常、肌肉震顫、驚厥、昏迷及呼吸抑制等不良反應(yīng)，苯佐卡因作為一種表面麻醉劑，如使用不當(dāng)或長期使用可引起一定的危害。主要表現(xiàn)為對呼吸道有刺激性，吸入后可引起咳嗽，氣短。對眼有刺激性，對部分人員有致敏作用，可表現(xiàn)為皮膚瘙癢，紅斑以及出現(xiàn)皮疹，丘疹，紅腫等。

鑒于普魯卡因胺等7種物質(zhì)對人體的種種危害性，為保障廣大人民群眾的身體健康，安全使用化妝品，在《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》2015年版中被明確規(guī)定為禁用成分。《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》中膏霜乳液類化妝品中普魯卡因胺等7種組分的檢驗(yàn)方法為1%的三氯乙酸和乙腈提取，再經(jīng)固相萃取小柱凈化，氮?dú)獯蹈珊蠹状级ㄈ菰龠M(jìn)行液相色譜法測定，方法繁瑣實(shí)驗(yàn)成本高。本方法采用甲醇直接提取后由高效液相色譜儀進(jìn)行分離測定，通過回收率實(shí)驗(yàn)，高中低三點(diǎn)的回收率均在89%-119%之間，完全能夠滿足實(shí)驗(yàn)要求。

1 試驗(yàn)部分

1.1 主要儀器

安捷倫高效液相色譜儀1200，帶二極管陣列檢測器;色譜柱：C18柱（250 mm×4.6 mm×5 μm）;超聲波清洗儀;斡旋混合儀;pH計(jì)：精度0.01。

1.2 主要試劑

甲醇（色譜純），磷酸氫二鈉，磷酸（優(yōu)級純），普魯卡因胺來自LGC，辛可卡因來自USP，普魯卡因、氯普魯卡因、苯佐卡因、利多卡因、丁卡因均來自中國食品藥品檢定研究院。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 測定條件

流動(dòng)相A：0.01 mol/L磷酸氫二鈉水溶液，磷酸調(diào)pH值至7.0，流動(dòng)相B：甲醇

1.3.2 樣品處理

準(zhǔn)確稱取樣品0.5 g（精確到0.001 g）于10 mL具塞比色管中，用甲醇定容至刻度渦旋30 s，混勻，超聲提取20 min，以5000 r/min離心5 min，取上清液經(jīng)0.45 μm濾膜過濾，濾液即為待測溶液，無需過固相萃取凈化小柱凈化。

準(zhǔn)確稱取樣品0.5 g（精確到0.001 g）于15 mL具塞比色管中，加入8 mL1%三氯乙酸，2 mL乙腈，渦旋1 min，以5000 r/min離心5 min，上清液待固相萃取小柱凈化。

PCX固相萃取小柱依次用3 mL甲醇、5 mL1%三氯乙酸進(jìn)行凈化。將待凈化的樣品清液流經(jīng)小柱后，用3 mL1%甲酸甲醇溶液淋洗小柱，棄去淋洗液，再用10 mL的5%氨水甲醇洗脫，收集洗脫液，氮?dú)獯蹈?，用甲醇定容?0 mL，經(jīng)0.45 μm濾膜過濾，濾液作為待測溶液。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

稱取普魯卡因胺、氯普魯卡因、丁卡因、利多卡因標(biāo)準(zhǔn)品各0.05 g，普魯卡因、苯佐卡因、辛可卡因標(biāo)準(zhǔn)品各0.04 g置于同一50 mL容量瓶中，加甲醇使溶解并定容至刻度，搖勻。得混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液。

稱取空白基質(zhì)0.5 g6份，分別置于10 mL具塞比色管中，分別加標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.02、0.05、0.10、0.25、0.50、1.00 mL，同樣品處理，得檢出限、混標(biāo)1、混標(biāo)2、混標(biāo)3、混標(biāo)4、混標(biāo)5。

2 結(jié)論與討論

2.1 不同方法處理的膏霜基質(zhì)加對照的色譜圖

膏霜空白樣品甲醇直接提取的色譜圖見圖1。

膏霜加標(biāo)樣品（混標(biāo)5）甲醇直接提取進(jìn)行測定的色譜圖見圖2。

膏霜加標(biāo)樣品（混標(biāo)5）固相萃取小柱凈化進(jìn)行測定的色譜圖見圖3。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

空白基質(zhì)加標(biāo)制備的標(biāo)準(zhǔn)系列采用甲醇直接提取和經(jīng)固相萃取小柱凈化兩種不同方法處理后繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，其線性方程和線性系數(shù)見表1。

2.3 回收率

不同方法處理的加標(biāo)回收率，甲醇直接提取與經(jīng)固相萃取小柱凈化后提取的高中低三個(gè)濃度的回收率測定的結(jié)果見表2―表7。

2.4 檢出限

稱取空白基質(zhì)0.5 g，置于10 mL具塞比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.02 mL，制備成檢出限，通過不同提取方法提取后進(jìn)行測定，甲醇定容至10 mL直接提取的檢出限譜圖見圖4，經(jīng)固相萃取小柱凈化后甲醇定容至10 mL的檢出限譜圖見圖5。

3 結(jié)論

經(jīng)過對比實(shí)驗(yàn)，未經(jīng)固相萃取小柱凈化甲醇直接提取的標(biāo)準(zhǔn)曲線、回收率和檢出限都完全能夠滿足實(shí)驗(yàn)要求?？梢源_定膏霜類化妝品在測定普魯卡因胺等7種組分時(shí)，樣品用甲醇直接提取就能滿足實(shí)驗(yàn)要求。因此能大大地降低了實(shí)驗(yàn)成本，簡化了實(shí)驗(yàn)過程，縮短了檢驗(yàn)時(shí)間。

【參考文獻(xiàn)】

[1] 國家食品藥品監(jiān)督管理總局化妝品標(biāo)準(zhǔn)專家委員會(huì)，化妝品衛(wèi)生規(guī)范[S].2015年版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2017.

[2] 謝鵬，高效液相色譜法測定鹽酸普魯卡因溶液中鹽酸普魯卡因的含量[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2016（4）：106-108.

[3] 王琦，陶敏，彭龍，等，HPLC法測定鹽酸丁卡因凝膠的含量[J].廣東化工，2019（22）：122-124.

[4] 劉曉玲，楊麗娜，倪曉霞，等.高效液相色譜法測定鹽酸丁卡因注射液中鹽酸丁卡因的含量及有關(guān)物質(zhì)[J].安徽醫(yī)藥，2016（9）：1658-1660.

[5] 歐陽曉玫，牟建平，滕寶霞，等.高效液相色譜法測定林可霉素利多卡因凝膠中鹽酸利多卡因含量[J].分析測試技術(shù)與儀器，2019（1）：39-42.

[6] 姜韌，柯可，劉剛，等.HPLC測定皮濕霜中苯佐卡因、地塞米松磷酸鈉和醋酸氯己定含量[J].藥物分析雜志，2005（11）：1336-1338.

【參考文獻(xiàn)】

郭春梅（1966-），女，高級工程師，大專，研究方向?yàn)槭称坊瘖y品檢測。

矯筱蔓（1978-），女，主任藥師，碩士，研究方向?yàn)榛瘖y品禁限用物質(zhì)檢測方法研究。

王超（1985-），女，主管藥師，碩士，研究方向?yàn)樗幤贩欠ㄌ砑蛹盎瘖y品理化檢驗(yàn)。