呂燕 王文彬 茍琪 王英娜 李靖宇 劉建利

（1. 北方民族大學生物科學與工程學院，銀川 750021；2. 河北大學生命科學學院，保定 071002）

寧夏枸杞（Lycium barbarum L.）屬茄科枸杞屬，為藥食同源植物，在寧夏、青海、甘肅、新疆和內蒙古等地分布最廣［1］。其果實枸杞子、葉和根含有甜菜堿、東莨菪素等藥理活性物質、桂皮酸和多酸類物質以及多種維生素和氨基酸，具有抗腫瘤、降血壓和防衰老的作用，為鹽堿地造林和經濟林的首選樹種［2］。隨著寧夏枸杞規(guī)?；N植面積的擴大和種植年限的增加，化肥、農藥的大量使用使土壤透氣性減弱，根腐病大規(guī)模發(fā)生，并有逐年加重趨勢［3-4］。寧夏枸杞根腐病是一種由鐮刀菌屬真菌（Fusarium spp.）所引起的使植株葉片發(fā)黃、枝條萎縮嚴重時整株枯死的毀滅性病害，給枸杞產量和品質造成很大的經濟損失［5-6］。

寧夏枸杞根腐病防治方法主要有培育抗性品種、農業(yè)管理［7］、化學殺菌劑和生物防治。在寧夏枸杞插條時可用高錳酸鉀、20%抗枯寧水劑或15%混合氨基酸鋅鎂水劑定根；發(fā)病初期可用50%甲基托布津或50%多菌靈澆灌根部；葉片發(fā)黃、枝條萎縮、側枝枯死的植株，立即拔除后用5%的石灰乳消毒，以防蔓延［8］。陳伶俐等［9］研究10種殺菌劑對枸杞根腐病菌的毒力發(fā)現，2.5%咯菌腈毒力最強。生物防治寧夏枸杞根腐病亦有開展，張小彥等［10］在健康枸杞植株根際土壤中分離中華根瘤菌（Sinorhizobium sp.）和綠僵菌（Metarhizium sp.）對枸杞根腐病菌具有良好抑制效果；宋學云等［11］在田間應用海洋芽孢桿菌可濕性粉劑和多粘類芽孢桿菌可濕性粉劑對枸杞根腐病進行防治，防控效果顯著，發(fā)病率分別降低81.48%和61.27%。

叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，AMF）是土壤習居真菌，是植物根圍微生物區(qū)系最重要的成員之一，在園藝、農作物和林業(yè)生產中，AMF既可作為生物肥料，又可作為生防藥劑，提高植物對土傳病害的抗性［12］，誘導植物抵抗生物脅迫［13］。李敏［14］在田間和盆栽條件下研究AMF對西瓜生長的影響以及與由根內鐮刀菌Fusarium oxysporum f.sp.niveum引起的枯萎病發(fā)生的關系發(fā)現，接種AMF能顯著促進西瓜植株的生長并降低枯萎病發(fā)病率。Jamiolkowska等［15］研究接種AMF對辣椒根腐病的生長和防治發(fā)現，接種AMF的辣椒根系發(fā)育好于接種尖孢鐮刀菌的根系并提高辣椒幼苗的光合活性。AMF與其他有益微生物共同接種對病原體亦表現出更大的抵抗?jié)摿?。Nafady等［16］研究AMF和植物促生酵母（Brettanomyces naardensis）的聯合作用對由Macrophomina phaseolina引起的向日葵根腐病和炭腐病的影響，結果表明，雙接種通過增加植物的養(yǎng)分利用率來誘導免疫系統(tǒng)；Gao等［17］研究了接種Funnelliformis mosseae、Glomus tortuosum和根瘤菌Sinorhizobium medicae對苜蓿根腐病的聯合防治效果，發(fā)現在AMF和S.medicae存在下，植株的N、P濃度均顯著高于不存在AMF和S.medicae的植株；接種AMF可增加結瘤數且植物病害相關酶、過氧化物酶和過氧化氫酶含量升高。

AMF應用于植物病害的防治具有很大的應用前景，但寧夏枸杞健康植株根腐病發(fā)病后，其根區(qū)土壤AMF群落如何發(fā)生變化尚不清楚。

本研究以不同樣地寧夏枸杞健康植株和根腐病發(fā)病植株根系和根區(qū)土壤為研究材料，鑒定寧夏枸杞根區(qū)土壤AMF群落組成，并分析根腐病發(fā)病后對寧夏枸杞根區(qū)土壤AMF群落組成、多樣性及結構的影響，為后續(xù)開展應用AMF防控寧夏枸杞根腐病奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

2019 年 8 月在寧夏銀川（38°39′N，106°9′E）、寧夏中寧（37°28′N，105°37′E）和甘肅靖遠（36°54′N，105°9′E）樣地分別選取3個樣方，在每個樣方選取‘寧杞1號’品種10株健康植株和10株根腐病發(fā)病植株（根部明顯腐爛，葉片變黃、萎蔫、脫落大于80%），去除表面枯枝凋落物，挖出植株，輕輕抖落根區(qū)土壤、收集根樣并放入自封袋，每個樣地3個生物學重復，樣品編號分別為“銀川Yinchuan（‘健康 樹 Healthy tree’，‘ 病 樹 Root rot-infected tree’）”，“ 中 寧 Zhongning（‘ 健 康 樹 Healthy tree’，‘ 病 樹Root rot-infected tree’）”，“靖遠 Jingyuan（‘健康樹Healthy tree’，‘病樹 Root rot-infected tree’）”。土壤樣品過2 mm篩，部分土壤樣品陰干后于4℃冷藏保存，用于土壤理化性質和AMF分離鑒定；陰干根樣用于AMF侵染率的測定。

1.2 方法

1.2.1 AMF分離鑒定 土壤樣品風干后過2 mm篩準確稱取10 g，用濕篩傾析-蔗糖離心法［18］分離AMF孢子，在體視顯微鏡下觀察并記錄孢子數量。將孢子置于浮載劑（水、乳酸甘油、PVLG）中壓片處理，在光學顯微鏡下觀察孢子大小、形態(tài)、顏色、表面紋飾、孢壁結構、連孢菌絲和內含物等特征，并拍照記錄。根據國際AM真菌保藏中心（INVAM） 在 http：//invam.wvu.edu/和 http：//www.amf-phylogeny.com/上提供的最新分類描述及圖片進行種屬鑒定。

1.2.2 AMF多樣性測定 參照劉海躍［19］的方法對AMF孢子密度、種豐度、相對多度及物種多樣性指數進行計算。

孢子密度（spore density，SD）：10 g風干土中孢子數量；種豐度（species richness，SR）：10 g土樣含有AMF的種數；相對多度（relative abundance，RA）：AMF某種或屬的孢子數/該樣地AMF總孢子數×100%；分離頻度（frequency，F）：AMF某屬或種出現次數/土樣數×100%；重要值（important value，IV）：某樣地AMF種或屬分離頻度與相對多度之和平均值，即IV=（F+RA）/2；根據重要值將AMF優(yōu)勢度劃分為4個等級，即IV＞60%為優(yōu)勢屬（種），40%＜IV≤ 60%為亞優(yōu)勢屬（種），20%＜IV≤40%為伴生屬（種），IV≤20%為偶見屬（種）；

式中，S為某采樣點AMF種類數，Pi為種i所占比例。

1.2.3 AMF定殖率測定 依據Phillips等［20］方法計算AMF結構定殖率。將收集的根樣用蒸餾水反復沖洗3次后，置于10% KOH溶液中，于90℃水浴45-60 min；棄去KOH溶液后加入堿性H2O2，室溫下放置20 min后洗去堿性H2O2；加入2%鹽酸，室溫酸化5 min，加入0.5%酸性品紅置于90℃水浴中染色30 min，棄去染色液后，加入乳酸甘油溶液（1∶1∶1）室溫下脫色24 h。隨機選取30個長度為1 cm根段，壓片后于電子顯微鏡下觀察并計算AMF定殖率。

1.2.4 土壤理化性質測定 采用電位法測定pH，采用凱氏定氮法測定全氮（total nitrogen，TN），采用酸溶-鉬銻抗比色法測定全磷（total phosphorus，TP），采用鉬銻抗比色法測定速效磷（available phosphorus，AP），采用重鉻酸鉀容量法測定有機質（organic matter，OM），采用氫氟酸高氯酸銷煮法測定全鉀（total potassium，TK），采用醋酸銨-火焰光度計法測定速效鉀（available potassium，AK），采用紫外分光光度法測定硝態(tài)氮（nitrate nitrogen，NO3--N），采用苯酚-次氯酸鹽法測定氨態(tài)氮（ammonia nitrogen，NH4+-N）。采用Braford法測定土壤中易提取球囊霉素（easily extractable glomalin-related soil protein，EEG）和總球囊霉素（total glomalin-related soil protein，TG）。

1.2.5 數據統(tǒng)計 數據經Excel 2016處理后，用SPSS 20.0軟件進行2組t檢驗，以P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著；用Excel 2016對AMF屬種組成進行作圖；用美吉生信云平臺工具（https：//cloud.majorbio.com/）進行組間差異分析和PCoA分析；運用R語言（R×64 3.5.1）“vegan”包進行PERMANOVA分析；運用微生太生科云平臺（https：//www.bioincloud.tech/#/）對AMF與土壤因子進行RDA分析和環(huán)境因子相關性分析。

2 結果

2.1 土壤理化性質

由表1可知，不同樣地寧夏枸杞健康植株土壤與根腐病發(fā)病植株土壤全磷、氨態(tài)氮、全氮、速效鉀和速效磷含量無顯著性差異；銀川樣地健康植株土壤與根腐病發(fā)病植株有機質含量存在顯著性差異，健康植株土壤低于根腐病發(fā)病植株土壤；不同樣地健康植株土壤與根腐病發(fā)病植株土壤的硝態(tài)氮含量均存在顯著性差異，銀川和中寧樣地根腐病發(fā)病植株土壤高于健康植株土壤，但靖遠樣地健康植株土壤高于根腐病發(fā)病植株土壤；靖遠樣地全鉀含量存在顯著性差異，健康植株土壤高于根腐病發(fā)病植株土壤；中寧樣地健康植株土壤與根腐病發(fā)病植株pH存在顯著性差異，根腐病發(fā)病使中寧樣地土壤pH升高。由表1可知，根腐病發(fā)生與土壤理化因子中有機質含量呈顯著正相關。

表1 不同樣地寧夏枸杞健康與根腐病發(fā)病植株土壤理化性質Table 1 Physicochemical properties of soil around healthy and root rot-infected L. barbarum L. plants from different cultivated sites

2.2 AMF孢子密度、侵染率與球囊霉素

由表2可知，銀川樣地健康植株和發(fā)病植株土壤AMF孢子密度分別為9.77個/g和9.70個/g，AMF總侵染率分別為2.50%和7.72%，土壤樣品孢子密度和AMF總侵染率最低；中寧樣地健康植株和發(fā)病植株土壤AMF孢子密度分別為34.90個/g和36.40個/g，AMF總侵染率分別為10.27%和17.85%；靖遠樣地健康植株和發(fā)病植株土壤AMF孢子密度分別為36.30個/g和42.67個/g，AMF總侵染率分別為30.00%和33.23%，3個樣地健康植株和發(fā)病植株土壤AMF孢子密度和AMF總侵染率無顯著變化。

表2 不同樣地寧夏枸杞健康與根腐病發(fā)病植株土壤AMF孢子密度、侵染率和球囊霉素Table 2 AMF spore density，infection rate and glomalin content in the soil of healthy and root rot plants of L. barbarum L.from different cultivated sites

不同樣地健康植株和發(fā)病植株土壤易提取球囊霉素和總球囊霉素存在差異。銀川樣地健康植株和發(fā)病植株土壤易提取球囊霉素分別為20.71 mg/g和29.37 mg/g，總球囊霉素分別為57.16 mg/g和70.5 mg/g；中寧樣地健康植株和發(fā)病植株土壤易提取球囊霉素分別為18.09 mg/g和24.42 mg/g，總球囊霉素分別為61.74 mg/g和67.65 mg/g；靖遠樣地健康植株和發(fā)病植株土壤易提取球囊霉素分別為12.54 mg/g和22.42 mg/g，總球囊霉素分別為50.50 mg/g和55.76 mg/g。中寧樣地健康植株土壤易提取球囊霉素含量顯著小于發(fā)病植株土壤。

因此，寧夏枸杞健康植株受根腐病病原菌入侵后，AMF孢子密度、總侵染率和總球囊霉素含量不發(fā)生顯著變化，中寧樣地寧夏枸杞健康植株根腐病發(fā)病后易提取球囊霉素含量升高。

2.3 AMF孢子形態(tài)

在3個樣地共分離到AMF 6屬32種，包括無梗囊霉屬（Acaulospora）9種；近明球囊霉屬（Claroideoglomus）4種；球囊霉屬（Glomus）11種，未定種3種；根孢囊霉屬（Rhizophagus）1種；盾巨孢囊霉屬（Scutellospora）1種；隔球囊霉屬（Septoglomus）3種（圖1）。其中，銀川健康植株土壤樣品鑒定出4屬16種，銀川根腐病發(fā)病植株土壤樣品鑒定出5屬17種，中寧健康植株土壤樣品鑒定出6屬22種，中寧根腐病發(fā)病植株土壤樣品鑒定出6屬19種，靖遠健康植株土壤樣品鑒定出4屬18種，靖遠根腐病發(fā)病植株土壤樣品鑒定出5屬16種。

圖1 AMF孢子形態(tài)Fig.1 Spore morphology of AMF

2.4 AMF群落組成

由圖2可知，在屬水平，不同樣地樣品AMF的組成存在差異。銀川樣地健康和發(fā)病植株、中寧樣地健康植株和靖遠樣地健康植株土壤優(yōu)勢屬為球囊霉屬，但靖遠樣地發(fā)病植株土壤優(yōu)勢屬為無梗囊霉屬，中寧樣地發(fā)病植株土壤優(yōu)勢屬為根孢囊霉屬；中寧樣地健康植株土壤次優(yōu)勢屬為根孢囊霉屬，發(fā)病植株土壤為無梗囊霉屬，近明球囊霉屬僅在中寧樣地出現；靖遠樣地健康植株土壤次優(yōu)勢屬為無梗囊霉屬，發(fā)病植株土壤次優(yōu)勢屬為球囊霉屬。

圖2 屬水平不同樣地寧夏枸杞健康與根腐病發(fā)病植株根區(qū)土中AMF相對豐度圖Fig.2 Relative abundance of AMF community at genus level among healthy and root rot-infected plants of L. barbarum L. from different cultivated sites

因此，寧夏枸杞植株受根腐病病原菌侵染后，銀川樣地寧夏枸杞根區(qū)土壤AMF優(yōu)勢屬未發(fā)生改變，中寧樣地優(yōu)勢屬從球囊霉屬變?yōu)楦吣颐箤伲高h樣地優(yōu)勢屬從球囊霉屬變?yōu)闊o梗囊霉屬，各屬的相對豐度在健康和罹病植株之間無顯著差異。

在種水平，地表球囊霉（G. versiforme）為銀川樣地健康和發(fā)病植株根區(qū)土壤的優(yōu)勢種；中寧樣地健康植株根區(qū)土壤的優(yōu)勢種為明根孢囊霉（R.clarus）；但靖遠樣地健康植株根區(qū)土壤優(yōu)勢種為大果球囊霉（G. macrocarpum），發(fā)病植株根區(qū)土壤的優(yōu)勢種為細凹無梗囊霉（A. scrobiculata）。黑球囊霉（G.melanosporum）、網狀球囊霉（G. reticulatum）、地表球囊霉（G. versiforme）和縮隔球囊霉（S. constrictum）為所有樣地健康植株和病樹植株根區(qū)土壤AMF的共有種（表3）。結果表明，根腐病造成靖遠樣地優(yōu)勢種發(fā)生變化，從大果球囊霉變?yōu)榧毎紵o梗囊霉，但對銀川樣地和中寧樣地優(yōu)勢種無顯著影響，銀川樣地仍為地表球囊霉，中寧樣地仍為明根孢囊霉。

表3 種水平AMF空間分布重要值Table 3 Important value of spatial distribution of AMF at species level

組間差異物種顯示，根腐病造成銀川樣地網狀球囊霉（G. reticulatum）和凹坑球囊霉（A. excavate）相對豐度顯著降低，細凹無梗囊霉（A. scrobiculata）、多梗球囊霉（G. multicaule）和扭形球囊霉（G.tortuosum）相對豐度顯著上升（圖3-A）；中寧樣地健康植株根區(qū)土壤AMF占比顯著大于根腐病發(fā)病植株的有黏質隔球囊霉（S. viscosum）、大果球囊霉（G.macrocarpum）和蜜色無梗囊霉（A. mellea），根腐病發(fā)病植株根區(qū)土壤AMF占比顯著大于健康植株的有近明球囊霉（C. luteum）、明根孢囊霉（R. clarus）和扭形球囊霉（G. tortuosum），根腐病造成黏質隔球囊霉、大果球囊霉、蜜色無梗囊霉相對豐度顯著降低，明根孢囊霉相對豐度顯著升高（圖3-B）；靖遠樣地健康植株根區(qū)土壤AMF占比顯著大于根腐病發(fā)病植株的有大果球囊霉（G. macrocarpum）和G. sp1，根腐病發(fā)病植株根區(qū)土壤AMF占比顯著大于健康植株的有細凹無梗囊霉（A. scrobiculata）、沙荒隔球囊霉（S. deserticola）和凹坑無梗囊霉（A. excavate），根腐病造成大果球囊霉和G. sp1相對豐度顯著降低，細凹無梗囊霉、沙荒隔球囊霉和凹坑無梗囊霉相對豐度顯著升高（圖3-C）。

圖3 種水平不同樣地寧夏枸杞健康與根腐病發(fā)病植株根區(qū)土中AMF差異物種Fig. 3 AMF differentiated species in the root zone soil of L. barbarum L. healthy and root rot-infected plants at species level

2.5 AMF群落α-多樣性

由表4可知，銀川樣地寧夏枸杞健康植株和發(fā)病植株根區(qū)土壤AMF物種豐度分別為11.00和13.00，中寧樣地分別為16.00和13.33，靖遠樣地分別為14.00和13.67，3個樣地AMF物種豐度均無顯著差異。銀川樣地寧夏枸杞根腐病發(fā)病后寧夏枸杞根區(qū)土壤AMF香農威納指數顯著升高，中寧樣地和靖遠樣地寧夏枸杞根腐病發(fā)病后香農威納指數呈下降趨勢，但不存在顯著性差異。因此，根腐病發(fā)病后，銀川樣地寧夏枸杞根區(qū)土壤AMFα-多樣性升高，中寧樣地和靖遠樣地α-多樣性無顯著變化。

表4 不同樣地寧夏枸杞健康和根腐病發(fā)病植株根區(qū)土壤AMF物種豐度和α-多樣性Table 4 AMF species richness and α-diversity in soil of healthy and infected plants of L. barbarum L. from different cultivated sites

2.6 AMF群落β-多樣性

基于Bray-Curtis距離的PCoA分析（principal co-ordinates analysis）結果（圖4）顯示，銀川樣地寧夏枸杞健康植株和發(fā)病植株根區(qū)土壤AMF群落組成更相似，中寧樣地和靖遠樣地寧夏枸杞健康植株和發(fā)病植株根區(qū)土壤AMF群落組成存在差異；PERMANOVA分析顯示不同樣地寧夏枸杞健康植株和發(fā)病植株根區(qū)土壤AMF群落組成差異顯著（R2=0.875，P=0.001）。結果表明，寧夏枸杞根腐病發(fā)病后根區(qū)土壤AMF群落組成發(fā)生改變。

圖4 基于Bray-Curtis距離AMF群落的PCoA圖Fig.4 PCoA plot based on Bray-Curtis similarities of AMF community

2.7 RDA分析根腐病對土壤理化因子與根區(qū)土壤AMF關系的影響

對土壤理化性質各項指標進行RDA分析，在銀川樣地，速效鉀是健康植株根區(qū)土壤AMF分布的主要影響因子，有機質是罹病植株根區(qū)土壤AMF分布的主要影響因子（圖5-A）；在中寧樣地，硝態(tài)氮是健康植株根區(qū)土壤AMF分布的主要影響因子，全氮和氨態(tài)氮是罹病植株根區(qū)土壤AMF分布的主要影響因子（圖5-B）；在靖遠樣地，全磷是健康植株根區(qū)土壤AMF分布的主要影響因子，全鉀和硝態(tài)氮是罹病植株根區(qū)土壤AMF分布的主要影響因子（圖5-C）。

圖5 AMF群落與土壤理化因子RDA分析Fig. 5 Redundancy analysis between AMF community and soil physicochemical properties

綜上所述，根腐病發(fā)生改變了影響寧夏枸杞根區(qū)土壤AMF群落的土壤理化因子。

2.8 AMF物種多樣性與土壤理化性質的相關性

AMF物種多樣性和環(huán)境因子相關性分析表明（表5），速效磷含量與孢子密度呈顯著負相關，速效鉀含量與種豐度呈顯著負相關，其余土壤理化性質與孢子密度和種豐度無顯著相關性；pH與AMF總侵染率呈顯著正相關，其余土壤理化性質與AMF侵染率無顯著相關性；所有土壤理化性質與Shannon-Wiener指數無顯著相關性。

表5 AMF物種多樣性和環(huán)境因子相關性分析Table 5 Correlation analysis between species diversity of AMF and environmental factors

3 討論

對枸杞根系土壤中AMF群落的研究已有開展。其中唐明等［21］用濕篩傾析法篩取VA菌根真菌的孢子和孢子果，發(fā)現寧夏中衛(wèi)地區(qū)的枸杞（L. chinense）根系土壤中優(yōu)勢種為雙型球囊霉（G.ambisporum），地球囊霉（G. geosporum）為少見種，單孢球囊霉（G. monosporum）為偶見種。劉洪光［22］采用濕篩傾析法對銀川產區(qū)寧夏枸杞（L. barbarum L.）根際土AMF孢子鑒定發(fā)現球囊霉屬為優(yōu)勢屬。張海涵［23］采用巢式PCR-DGGE和克隆測序技術研究發(fā)現黃土高原旱區(qū)不同品種枸杞根系AMF均屬于球囊霉屬。盛敏［24］運用濕篩傾析法研究寧夏平羅鹽堿土生境中枸杞（L. chinense）根際土壤AMF群落的有6個種，地表球囊霉（G. versiforrm）所占比例最高。本研究中銀川、中寧、靖遠樣地寧夏枸杞健康植株和銀川樣地發(fā)病植株根區(qū)土壤AMF優(yōu)勢屬均為球囊霉屬，與劉洪光［22］研究結果一致，銀川樣地健康植株和發(fā)病植株根區(qū)土壤AMF優(yōu)勢種為地表球囊霉（G. versiforrm），與盛敏［24］研究結果一致；中寧樣地發(fā)病植株根區(qū)土壤AMF優(yōu)勢屬發(fā)生變化，發(fā)病植株優(yōu)勢屬為明根孢囊霉屬，優(yōu)勢種為明根孢囊霉（R. clarus），靖遠樣地優(yōu)勢屬種為無梗囊霉屬凹坑無梗囊霉（A. excavate）。

趙蕾［25］對典型喀斯特區(qū)玉米紋枯病及根際土壤AMF群落特征調查時發(fā)現球囊霉屬和原囊霉屬（Archaeospora）的相對豐度表現為健康植株高于感病植株，本研究結果與其一致，發(fā)現銀川樣地健康植株優(yōu)勢屬均為球囊霉屬，且比例存在下降趨勢。宋放等［26］采用高通量測序技術研究贛州橘園根系AMF多樣性受黃龍病菌侵染影響時發(fā)現黃龍病菌侵染能夠顯著改變柑橘根系內生AMF的群落結構，但對其總體豐度和多樣性無顯著影響。本研究發(fā)現中寧、靖遠樣地寧夏枸杞根區(qū)土壤AMF α-多樣性受根腐病菌影響不大，AMF多樣性無顯著變化；但銀川樣地寧夏枸杞受根腐病病原菌侵染后AMF α-多樣性顯著升高。張智慧等［27］對健康三七和根腐病三七根內AMF和DSE侵染狀況研究發(fā)現，健康三七的AMF侵染率顯著高于根腐病三七，AMF提高了三七的抗根腐病能力。本研究發(fā)現3個寧夏枸杞樣地健康植株和根腐病發(fā)病植株AMF侵染率無顯著差異，根腐病病原菌侵入寧夏枸杞根系后對AMF侵染率無影響。AMF物種多樣性與環(huán)境因子相關性顯示，土壤pH與AMF侵染率呈顯著正相關，根腐病發(fā)病土壤酸堿度發(fā)生變化會影響AMF侵染率。

土著AMF長期存在于土壤中，已適應土壤的生態(tài)條件具備良好的生存優(yōu)勢［28］。使用AMF有助于在可持續(xù)和綜合的土壤傳播疾病管理中預防土傳疾病的發(fā)生［29］，病原入侵前植物與AMF建立共生體可提前誘導寄主的抗病防御體系［30］。選取AMF菌種作用于植株時應考慮土著AMF菌種。本研究發(fā)現靖遠樣地健康植株AMF豐度大于發(fā)病植株，顯著差異種有大果球囊霉（G. macrocarpum）和G. sp1，銀川樣地顯著差異種有網狀球囊霉（G. reticulatum）和凹坑無梗囊霉（A. excavate），中寧樣地顯著差異種有黏質隔球囊霉（S. viscosum）、大果球囊霉（G.macrocarpum）和蜜色無梗囊霉（A. mellea），后續(xù)試驗可對上述不同樣地健康植株根區(qū)土壤AMF種進行篩選并建立土著AMF菌劑，進一步探究土著AMF對寧夏枸杞根腐病的作用。

有研究表明，土壤理化性質通過影響AMF產孢影響其多樣性。如盛敏［24］研究發(fā)現AMF種的豐度和多樣性指數隨土壤養(yǎng)分（有機質、速效磷、速效鉀和堿解氮）的增加而降低，本研究也發(fā)現速效磷含量與孢子密度顯著負相關，速效鉀含量與種豐度顯著負相關，與盛敏研究結果一致，速效磷含量低的土壤更利于AMF產孢。

4 結論

根腐病發(fā)生改變寧夏枸杞根區(qū)土壤AMF群落結構，但對α-多樣性指數、優(yōu)勢類群、物種組成等各個群落結構特征在不同樣地之間影響不同。土壤理化性質不影響AMF物種多樣性，但影響AMF定殖。