唐 武 蔡巧利 蔣慧姣 黃 攀 梁世理 玉中班 孔祥峰*

(1.中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)過程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)生理與代謝過程湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)沙410125；2.中國(guó)科學(xué)院大學(xué)，北京100049；3.環(huán)江毛南族自治縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，環(huán)江547199)

早期斷奶應(yīng)激引起的仔豬生長(zhǎng)緩慢、腹瀉率和死亡率高等問題制約了養(yǎng)豬業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展[1]。通過營(yíng)養(yǎng)調(diào)控手段改善仔豬腸道健康、提高其生長(zhǎng)性能是解決上述問題的重要途徑。有研究表明，益生菌、合生元等益生物質(zhì)可改善動(dòng)物的腸道健康，降低腹瀉率，進(jìn)而提高生長(zhǎng)性能[2-3]。因此，研發(fā)益生菌、合生元等功能性飼料添加劑對(duì)保障仔豬健康具有重要意義。丁酸梭菌(Clostridiumbutyricum，CB)是一種重要的益生菌，對(duì)酸、膽酸鹽和抗生素等的耐受性較強(qiáng)[4]，其代謝產(chǎn)物丁酸可為腸上皮細(xì)胞的再生和修復(fù)提供能量[5]。飼糧添加CB可顯著提高斷奶仔豬的平均日采食量(ADFI)和平均日增重(ADG)，顯著降低腹瀉率[6]。合生元是由益生菌和益生元組合而成的一種微生態(tài)制劑，由木寡糖和地衣芽孢桿菌[7]、益生菌和低聚木糖(XOS)[8]組成的合生元能夠增強(qiáng)仔豬的腸道健康，提高其生長(zhǎng)性能。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加一定劑量的XOS可增強(qiáng)仔豬的腸道健康，減少腹瀉，并促進(jìn)其生長(zhǎng)[9]；可增加仔豬肌肉中粗蛋白質(zhì)、氨基酸和脂肪酸的含量[10]；還可改善育肥豬的肉品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[11]。但由CB和XOS組成的合生元對(duì)環(huán)江香豬的飼喂效果如何，尚未見報(bào)道。因此，本試驗(yàn)擬研究飼糧添加益生菌和合生元對(duì)環(huán)江香豬生長(zhǎng)性能和血漿生化參數(shù)的影響，為其在環(huán)江香豬健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

CB活菌數(shù)≥1×109CFU/g；XOS主要成分為木二糖、木三糖和木四糖等，含量≥35%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物、分組與飼養(yǎng)管理

動(dòng)物試驗(yàn)在廣西壯族自治區(qū)環(huán)江毛南族自治縣環(huán)江香豬原種保種場(chǎng)開展。試驗(yàn)選取生產(chǎn)時(shí)間和窩產(chǎn)仔數(shù)相近的新生仔豬24窩，隨機(jī)分為3組，每組8個(gè)重復(fù)。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.05% CB(益生菌組)和0.05% CB+0.02% XOS(合生元組)，添加劑量根據(jù)前人研究結(jié)果[6,9]以及產(chǎn)品推薦劑量確定。仔豬10日齡前隨母豬哺乳；10～35日齡隨母豬哺乳，同時(shí)補(bǔ)充教槽飼糧；36～65日齡飼喂保育前期飼糧。

基礎(chǔ)飼糧的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)水平參照《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 65—2004)、預(yù)混料參考NRC(2012)仔豬營(yíng)養(yǎng)需求標(biāo)準(zhǔn)配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。每天喂料3次，自由采食和飲水。其他飼養(yǎng)管理與免疫程序按豬場(chǎng)常規(guī)飼養(yǎng)管理方法進(jìn)行。

1.3 生長(zhǎng)性能測(cè)定

試驗(yàn)期間記錄每窩仔豬每日的采食量，分別于10、35和65日齡稱取空腹體重，計(jì)算ADFI、ADG和料重比(F/G)。試驗(yàn)期間記錄每窩仔豬每天的腹瀉情況，計(jì)算腹瀉率。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4 血漿生化參數(shù)測(cè)定

分別于35和65日齡隨機(jī)從每窩選取接近平均體重的仔豬1頭，前腔靜脈采血10 mL，肝素抗凝，3 000 r/min離心15 min，分離血漿。用Cobras c311型全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血漿中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和堿性磷酸酶(ALP)的活性以及總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、氨(NH3)、尿素氮(UN)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)的含量，按照試劑盒(北京利德曼公司提供)說明書進(jìn)行操作。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并采用Duncan氏法進(jìn)行組間多重比較，以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧添加益生菌和合生元對(duì)環(huán)江香豬生長(zhǎng)性能和腹瀉率的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，益生菌組和合生元組10～35日齡階段仔豬的腹瀉率顯著降低(P<0.05)，36～65日齡和10～65日齡階段仔豬的ADFI和ADG顯著增加且腹瀉率顯著降低(P<0.05)，65日齡仔豬的體重顯著增加(P<0.05)。與益生菌組相比，合生元組10～35日齡、36～65日齡和10～65日齡階段仔豬的腹瀉率顯著降低(P<0.05)，36～65日齡和10～65日齡階段仔豬的ADFI和ADG顯著增加(P<0.05)。

2.2 飼糧添加益生菌和合生元對(duì)環(huán)江香豬血漿生化參數(shù)的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，35日齡時(shí)，益生菌組和合生元組血漿TP含量和ALP活性顯著升高、ALP活性顯著降低(P<0.05)，合生元組血漿LDL-C含量顯著升高(P<0.05)；65日齡時(shí)，益生菌組和合生元組血漿TP、ALB和TG含量以及ALP活性顯著升高(P<0.05)、ALP和AST活性顯著降低(P<0.05)，合生元組血漿TC和LDL-C含量顯著升高(P<0.05)。另外，合生元組35日齡血漿LDL-C含量、65日齡血漿LDL-C和TC含量以及ALP活性顯著高于益生菌組(P<0.05)。

表2 飼糧添加益生菌和合生元對(duì)環(huán)江香豬生長(zhǎng)性能和腹瀉率的影響

3 討 論

現(xiàn)有研究表明，合生元可通過增加腸道內(nèi)有益菌的相對(duì)豐度，提高微生物代謝產(chǎn)物短鏈脂肪酸(SCFA)的含量發(fā)揮益生作用，從而增加仔豬的ADFI和ADG[12]。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加益生菌或合生元后，仔豬各階段腹瀉率均顯著降低，斷奶后的ADFI和ADG以及65日齡體重均顯著增加，表明飼糧添加益生菌或合生元可顯著增強(qiáng)環(huán)江香豬的腸道健康，提高其生長(zhǎng)性能。已有研究表明，飼糧添加6×109CFU/kg CB可顯著增加斷奶仔豬的ADFI、ADG和末重，顯著降低腹瀉率和F/G[13]；飼糧添加由XOS和益生菌組成的合生元制劑可顯著降低仔豬黃白痢的發(fā)生率[8]。益生菌和合生元可能通過以下途徑發(fā)揮作用：1)CB能產(chǎn)生酶、維生素、脂肪酸和丁酸梭菌素等物質(zhì)，從而發(fā)揮促生長(zhǎng)、提高飼料轉(zhuǎn)化率和維持腸道健康等功能[14]；2)XOS能促進(jìn)雙歧桿菌和乳酸菌的增殖，進(jìn)而抑制有害菌在腸上皮細(xì)胞上的黏附[15]；3)CB能促進(jìn)雙歧桿菌、乳酸菌和糞桿菌等有益菌的繁殖[11]。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)，合生元較益生菌的效果更好，表明CB和XOS可產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，這與鄧文等[16]的報(bào)道一致。不過，合生元的促生長(zhǎng)效果優(yōu)于益生菌的具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

表3 飼糧添加益生菌和合生元對(duì)環(huán)江香豬血漿生化參數(shù)的影響

血漿TP、ALB、UN和NH3含量是衡量機(jī)體氮代謝的主要指標(biāo)。血漿TP和ALB含量可反映機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的吸收和代謝水平，ALB含量與動(dòng)物的生長(zhǎng)速度呈正相關(guān)[17]。本研究中，飼糧添加益生菌或合生元后，35日齡時(shí)血漿TP含量以及65日齡時(shí)血漿TP和ALB含量均顯著升高，提示此階段仔豬對(duì)蛋白質(zhì)的消化能力增強(qiáng)。AST和ALT是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)重要的轉(zhuǎn)氨酶，其活性是反映肝臟和心臟功能的重要指標(biāo)，可影響多種氨基酸的代謝[18]。本研究中，飼糧添加益生菌或合生元后，35日齡時(shí)血漿ALT活性和65日齡時(shí)血漿ALT和AST活性均顯著降低，表明環(huán)江香豬心臟和肝臟功能正常，機(jī)體對(duì)氨基酸的利用率提高，這與Wang等[13]的報(bào)道一致。血液中的ALP主要來源于肝臟和骨骼。在臨床上，ALP主要用于肝臟疾病的診斷。患病時(shí)肝細(xì)胞過度生成ALP，經(jīng)淋巴管和肝竇進(jìn)入血液，同時(shí)由于肝內(nèi)膽管膽汁排泄障礙，反流入血而引起血液ALP活性明顯升高[19]。ALP作為消化代謝的關(guān)鍵酶，還能促進(jìn)磷酸鈣在骨骼內(nèi)的蓄積，是反映骨生成狀況和鈣、磷代謝的重要指標(biāo)[20]。本研究中，飼糧添加益生菌或合生元后，35和65日齡時(shí)血漿ALP活性顯著升高。這可促進(jìn)機(jī)體對(duì)鈣、磷的吸收，增強(qiáng)骨骼鈣化，從而有利于此階段仔豬的骨骼發(fā)育。

血漿TC、TG、HDL-C和LDL-C含量是衡量機(jī)體脂類代謝強(qiáng)弱的重要指標(biāo)。血漿TG和TC含量可反映機(jī)體對(duì)脂肪代謝的強(qiáng)弱，脂肪組織發(fā)育和脂肪沉積取決于血漿TG含量，血漿TG含量降低提示脂肪沉積可能下降[21]；HDL-C和LDL-C是運(yùn)輸膽固醇的載體，LDL-C將肝臟合成的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)至肝外組織，而HDL-C則把膽固醇運(yùn)回肝臟代謝轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)，從而維持機(jī)體內(nèi)脂類代謝的穩(wěn)定[22]。本試驗(yàn)中，飼糧添加益生菌顯著提高了65日齡時(shí)血漿TG含量，飼糧添加合生元顯著提高了35日齡時(shí)血漿LDL-C含量以及65日齡時(shí)血漿TG、TC和LDL-C含量，提示益生菌或合生元可在一定程度上增強(qiáng)環(huán)江香豬的脂代謝，提高機(jī)體的脂肪沉積能力。

4 結(jié) 論

飼糧添加益生菌或合生元均可改善環(huán)江香豬氮代謝和脂代謝相關(guān)的血漿生化參數(shù)，降低腹瀉率，進(jìn)而提高生長(zhǎng)性能。