李文嘉 徐 彬 馬慧慧 魏鳳仙 王琳燚 付 趁 王改利 孫全友 李紹鈺

(河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，鄭州450002)

近年來(lái)，為了追求高生產(chǎn)效率，節(jié)約成本，滿足市場(chǎng)不同需求，肉雞生產(chǎn)逐漸呈現(xiàn)出集約化、快速化、高飼養(yǎng)密度的特點(diǎn)。在集約化、規(guī)?；B(yǎng)殖模式下，家禽的生存環(huán)境惡劣，使其長(zhǎng)期處于應(yīng)激狀態(tài)，嚴(yán)重破壞了家禽的健康。然而，當(dāng)今社會(huì)，食品安全和肉品質(zhì)日益受到重視，養(yǎng)殖動(dòng)物所處的生產(chǎn)過(guò)程也受到密切關(guān)注。因此，肉雞養(yǎng)殖業(yè)中飼養(yǎng)密度過(guò)高給肉雞健康生產(chǎn)造成的負(fù)面影響亦越來(lái)越突顯。研究表明，當(dāng)飼養(yǎng)密度超過(guò)30 kg/m2時(shí)，肉雞釆食減少，同時(shí)腳墊損傷和皮膚擦傷的發(fā)生率增加[1]。當(dāng)飼養(yǎng)密度超過(guò)35 kg/m2(0.052 m2/只)時(shí)，肉雞體重顯著下降[2]，Ericsson等[3]認(rèn)為其原因是密度過(guò)大影響肉雞采食，導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)素?cái)z入不足所致。在前期研究中我們也發(fā)現(xiàn)，當(dāng)飼養(yǎng)密度達(dá)到0.056 m2/只(18只/m2)時(shí)，肉雞生長(zhǎng)、飼料效率以及免疫性能均顯著低于常規(guī)飼養(yǎng)密度組(15只/m2)[4]。田允波[5]研究發(fā)現(xiàn)，飼養(yǎng)密度過(guò)大不利于肉雞體熱的散發(fā)，且高飼養(yǎng)密度條件下，雞群在夏季和秋季猝死率顯著升高[6]。與此同時(shí)，飼養(yǎng)密度可直接影響雞只的活動(dòng)空間，而肉雞的行為與其活動(dòng)空間大小密切相關(guān)。

Van Reenen等[7]研究指出動(dòng)物行為可反映出其生存環(huán)境的舒適程度。當(dāng)動(dòng)物機(jī)體處于舒適的環(huán)境中，會(huì)表現(xiàn)出正常的生理行為，當(dāng)所處環(huán)境福利變差，動(dòng)物則會(huì)出現(xiàn)異常行為。因此，肉雞的行為是評(píng)價(jià)肉雞健康和福利狀態(tài)的可靠指標(biāo)。在企業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中，往往采用高密度、集約化的生產(chǎn)方式，通過(guò)把養(yǎng)殖動(dòng)物限制起來(lái)，長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行采食行為，導(dǎo)致生存環(huán)境惡劣，正常遺傳行為得不到滿足，生理應(yīng)激壓力隨之而生，就會(huì)表現(xiàn)出行為異常。隨著飼養(yǎng)密度的增加，肉雞的運(yùn)動(dòng)越來(lái)越少，很少進(jìn)行抓、刨和走動(dòng)、打鬧等活動(dòng)。因此，我們推測(cè)，高飼養(yǎng)密度會(huì)影響肉雞的正常行為，從而引發(fā)其腿部疾病，甚至?xí)?dǎo)致骨骼發(fā)育畸形。

α-硫辛酸(alpha-lipoic acid,LA)是一種良好的抗氧化劑，其主要功能是作為線粒體中氧化磷酸化過(guò)程中多酶復(fù)合物的輔因子，在機(jī)體線粒體能量代謝中起著重要作用[8]。同時(shí)，LA可以與活性氧結(jié)合達(dá)到淬滅自由基的效果，也可以與金屬離子進(jìn)行螯合，阻止體內(nèi)自由基的形成[9]，還可以使得一些內(nèi)源性抗氧化劑(維生素C、維生素E、谷胱甘肽等)再生[10]。但是，有關(guān)LA對(duì)于肉雞飼養(yǎng)密度和骨骼發(fā)育方面作用的研究較少。因此，本試驗(yàn)擬設(shè)定不同的飼養(yǎng)密度，并在高飼養(yǎng)密度條件下補(bǔ)飼LA，通過(guò)對(duì)肉雞生理應(yīng)激、行為學(xué)和骨骼發(fā)育等指標(biāo)進(jìn)行分析，探討飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞生理應(yīng)激、行為和骨骼發(fā)育的影響，為確定集約化肉雞飼養(yǎng)密度提供理論依據(jù)，為肉雞實(shí)現(xiàn)健康養(yǎng)殖的可持續(xù)發(fā)展提供保障。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取1日齡愛(ài)拔益加(AA)肉仔雞3 000只，由開封禾豐牧業(yè)有限公司提供，按養(yǎng)殖流程正常投喂飼養(yǎng)。并于21日齡時(shí)從中挑取健康狀況良好、體重相近的肉仔雞1 530只，隨機(jī)分成3個(gè)組，對(duì)照組為常規(guī)飼養(yǎng)密度組(ND組，15只/m2，飼喂基礎(chǔ)飼糧)，試驗(yàn)組為高飼養(yǎng)密度組(HD組，18只/m2，飼喂基礎(chǔ)飼糧)和高飼養(yǎng)密度+LA組(HD+LA組，18只/m2，在基礎(chǔ)飼糧在添加300 mg/kg LA)，每組6個(gè)重復(fù)，ND、HD和HD+LA組每個(gè)重復(fù)肉仔雞數(shù)目分別為75、90和90只，試驗(yàn)期為3周。采用網(wǎng)上平養(yǎng)方式，以重復(fù)為單位養(yǎng)殖在長(zhǎng)2.46 m、寬2.02 m、高0.60 m的養(yǎng)殖籠內(nèi)，各重復(fù)之間用塑料網(wǎng)隔開。

基礎(chǔ)飼糧采用玉米-豆粕型飼糧，參照我國(guó)《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)肉仔雞營(yíng)養(yǎng)需求配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。飼養(yǎng)試驗(yàn)在河南農(nóng)科院尉氏養(yǎng)殖基地進(jìn)行。

1.2 飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)采用網(wǎng)上平養(yǎng)，舍飼顆粒料的方式進(jìn)行。試驗(yàn)期間肉仔雞自由采食、飲水，采用23 h人工光照、1 h黑暗處理。按照正常商業(yè)飼養(yǎng)管理方式進(jìn)行常規(guī)免疫，保持雞舍良好通風(fēng)，試驗(yàn)過(guò)程中每天觀察試驗(yàn)雞只狀況，記錄雞群生長(zhǎng)和死亡情況，一旦發(fā)現(xiàn)有死亡雞只，及時(shí)處理并補(bǔ)充體重相近的肉雞。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 Items日齡 Days of age1～2122～42 有效磷 AP0.460.41賴氨酸 Lys1.151.00蛋氨酸 Met0.520.42蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys0.850.77蘇氨酸 Thr0.880.81色氨酸 Try0.290.27

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 血清鈣、磷含量及應(yīng)激指標(biāo)測(cè)定

于42日齡禁食12 h后，每各重復(fù)隨機(jī)取2只雞，采用翅靜脈采血，3 000 r/min離心15 min，制備血清，分裝后于-80 ℃中保存。測(cè)定血清中鈣、磷、甲狀旁腺素(parathyroid hormone,PTH)和皮質(zhì)酮(corticosterone,CORT)含量以及堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、還原型輔酶Ⅱ氧化酶(NADPH-oxidase,NOX)、黃嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)、單胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)、髓過(guò)氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性。上述指標(biāo)均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定，測(cè)定步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3.2 行為學(xué)指標(biāo)測(cè)定

采用目標(biāo)取樣法[11]，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)用生物染料標(biāo)記4只目標(biāo)雞，于試驗(yàn)最后3 d使用攝像機(jī)對(duì)目標(biāo)雞只連續(xù)拍攝4 h。將儲(chǔ)存視頻用行為觀察分析系統(tǒng)(Observer XT,Noldus，荷蘭)對(duì)目標(biāo)雞的活動(dòng)行為(采食、飲水、站立、走動(dòng)等)和休息行為(休息、趴臥、伸展等)主要行為進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)每只目標(biāo)雞各行為發(fā)生的頻次和比例。數(shù)據(jù)記錄整個(gè)過(guò)程中僅1人觀察，每次觀察各組中的1個(gè)重復(fù)，統(tǒng)計(jì)完后再進(jìn)行下一個(gè)重復(fù)。行為頻次定義為單位時(shí)間內(nèi)所發(fā)生該行為的次數(shù)。行為時(shí)間占比定義為該行為發(fā)生時(shí)間占總行為發(fā)生時(shí)間的百分比。參照厲秀梅等[12]和朱曉彤等[13]的報(bào)道將肉雞行為類別進(jìn)行分類和定義，具體見(jiàn)表2。

表2 肉雞行為類別及其定義

1.3.3 骨骼發(fā)育指標(biāo)測(cè)定

將42日齡采集靜脈血后的雞只屠宰，取左側(cè)脛骨、股骨，測(cè)定質(zhì)量、長(zhǎng)度、直徑、密度、強(qiáng)度以及礦物鹽、鈣、磷、灰分含量，并計(jì)算骨體比(bone weight rate,BWR)。小心剔除骨上的軟骨、脂肪、肌肉組織等附著物，測(cè)定脛骨鮮重，計(jì)算骨體比。用游標(biāo)卡尺測(cè)量長(zhǎng)度和直徑。采用灰化法(GB/T 6438—2007)測(cè)定骨灰分含量，乙二胺四乙酸二鈉絡(luò)合滴定法(GB/T 6436—2002)測(cè)定骨鈣含量，分光光度法(GB/T 6437—2002)測(cè)定骨磷含量。采用三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)(TMS-Pro,Food Texture Analyzer,FTC,美國(guó))檢測(cè)骨強(qiáng)度。骨密度和礦物鹽含量采用定量計(jì)算機(jī)斷層掃描儀(Model 922010,Norland Medical Systems Inc.,美國(guó))測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，組間存在顯著差異時(shí)，再進(jìn)行Duncan氏法進(jìn)行多重比較，以P<0.05作為檢驗(yàn)各項(xiàng)數(shù)據(jù)顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”的形式表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞血清鈣、磷含量和應(yīng)激指標(biāo)的影響

由表3可知，各組間血清磷、PTH含量以及XO和MAO活性差異不顯著(P>0.05)。HD組血清鈣含量和ALP活性與ND組相比顯著下降(P<0.05)，而HD+LA組血清鈣含量和ALP活性與HD組相比顯著上升(P<0.05)。HD組血清CORT含量以及NOX和MPO活性顯著高于ND組(P<0.05)。與HD組相比，HD+LA組血清CORT含量以及NOX和MPO活性顯著降低(P<0.05)，血清XO和MAO活性雖有下降的趨勢(shì)，但差異不顯著(P>0.05)。

表3 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞血清鈣、磷含量及應(yīng)激指標(biāo)的影響

2.2 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞行為的影響

由表4可知，各組間站立和伸展頻次差異不顯著(P>0.05)。相較于ND組，HD組的行走、梳翅、采食頻次顯著降低(P<0.05)，而飲水頻次顯著升高(P<0.05)。與HD組相比，HD+LA組采食頻次顯著升高(P<0.05)，飲水頻次顯著降低(P<0.05)，梳翅頻次有所上升，但差異不顯著(P>0.05)。

表4 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞行為頻次的影響

由表5可知，各組間站立和伸展時(shí)間占比差異不顯著(P>0.05)。相較于ND組，HD組行走、梳翅、采食時(shí)間占比顯著降低(P<0.05)，而飲水和趴臥時(shí)間占比顯著升高(P<0.05)。與HD組相比，HD+LA組采食時(shí)間占比顯著升高(P<0.05)，趴臥時(shí)間占比顯著下降(P<0.05)，行走、梳翅和飲水時(shí)間占比也有所改變，但差異不顯著(P>0.05)。

表5 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞行為時(shí)間占比的影響

2.3 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞骨骼發(fā)育的影響

由表6可知，與ND組相比，HD組脛骨直徑、質(zhì)量、骨體比、密度、強(qiáng)度以及鈣、磷、灰分和礦物鹽含量均顯著降低(P<0.05)，僅脛骨長(zhǎng)度無(wú)顯著變化(P>0.05)。與HD組相比，HD+LA組脛骨質(zhì)量以及鈣、磷含量顯著升高(P<0.05)，脛骨密度、骨體比以及礦物鹽和灰分含量有上升趨勢(shì)，但差異不顯著(P>0.05)。

表6 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞脛骨發(fā)育指標(biāo)的影響

由表7可知，與ND組相比，HD組股骨直徑、質(zhì)量、密度、強(qiáng)度以及鈣、灰分和礦物鹽含量顯著降低(P<0.05)，股骨磷含量、長(zhǎng)度和骨體比無(wú)顯著變化(P>0.05)。與HD組相比，HD+LA組股骨密度、強(qiáng)度和鈣含量顯著升高(P<0.05)，股骨直徑、質(zhì)量以及灰分和礦物鹽含量有上升趨勢(shì)，但差異不顯著(P>0.05)。

3 討 論

3.1 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞血清指標(biāo)的影響

飼養(yǎng)密度一直是畜牧業(yè)關(guān)注的焦點(diǎn)。企業(yè)為了追求高生產(chǎn)效率和經(jīng)濟(jì)效益，迫使肉雞飼養(yǎng)密度越來(lái)越高?？v然高密度飼養(yǎng)提高了肉雞的產(chǎn)量，但對(duì)雞肉品質(zhì)、疾病發(fā)生率等方面造成了許多負(fù)面效應(yīng)，影響了雞群健康，導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)效益下降。在本實(shí)驗(yàn)室前期研究中顯示，高飼養(yǎng)密度會(huì)導(dǎo)致肉雞生長(zhǎng)性能下降，這可能是由于室內(nèi)養(yǎng)殖環(huán)境易受集約化養(yǎng)殖程度的影響，高密度飼養(yǎng)會(huì)限制空氣流通，增加空氣中氨的濃度，降低肉雞體熱的正常散失[4]。此外，研究還發(fā)現(xiàn)高飼養(yǎng)密度組肉雞平均日攝食率也顯著下降[4]，并推測(cè)相較于低飼養(yǎng)密度，在高飼養(yǎng)密度下生長(zhǎng)的肉雞更容易出現(xiàn)相互推搡和腿疾，導(dǎo)致肉雞移動(dòng)困難，攝食率降低[14]。

表7 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞股骨發(fā)育指標(biāo)的影響

眾所周知，ALP是成骨細(xì)胞成熟的標(biāo)志酶，是骨形成過(guò)程中必要的催化劑，在骨骼鈣化和形成過(guò)程中起關(guān)鍵作用[20]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與常規(guī)飼養(yǎng)密度相比，高飼養(yǎng)密度顯著降低了血清ALP活性，推測(cè)肉雞在高飼養(yǎng)密度條件下，相對(duì)活動(dòng)空間狹小、活動(dòng)受限等因素促使肉雞發(fā)生應(yīng)激，這可能導(dǎo)致其成骨細(xì)胞的活性比例下降，進(jìn)而影響了骨骼的鈣磷代謝及發(fā)育[21]。這與表3中血清鈣含量以及表8中股骨礦物鹽、鈣、磷、灰分含量在HD組顯著下降相吻合。然而，目前有關(guān)飼養(yǎng)密度對(duì)家禽血清ALP活性影響的研究較少，確切的影響及其機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

在本實(shí)驗(yàn)室前期的研究中，我們發(fā)現(xiàn)高飼養(yǎng)密度對(duì)肉雞血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量有顯著影響[4]。在本試驗(yàn)中，隨著飼養(yǎng)密度的增加，血清CORT含量呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，這可能是由于高飼養(yǎng)密度會(huì)加劇熱應(yīng)激(尤其在夏季)的影響，抑制肉雞蒸發(fā)散熱，應(yīng)激強(qiáng)度增強(qiáng)，從而導(dǎo)致血清中CORT含量升高，這與本實(shí)驗(yàn)室之前的研究結(jié)論相符合。袁建敏[22]指出，CORT是應(yīng)激敏感指標(biāo)，提高飼養(yǎng)密度容易引起肉雞發(fā)生應(yīng)激，引起CORT等血液指標(biāo)的改變。然而，秦鑫等[23]研究指出，飼養(yǎng)密度對(duì)肉雞血清CORT含量沒(méi)有顯著影響。造成這種差異的原因可能是由于秦鑫等[23]研究中所設(shè)定的飼養(yǎng)密度(10、14只/m2)較低所致。由本試驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，HD+LA組血清CORT含量相較于HD組顯著降低，這說(shuō)明在肉雞飼糧中添加LA可以在一定程度上緩解由于飼養(yǎng)密度過(guò)高引發(fā)的應(yīng)激反應(yīng)。

MPO在動(dòng)物體內(nèi)可利用過(guò)氧化氫和氯離子，產(chǎn)生次氯酸[24]，在細(xì)胞內(nèi)炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激中起到?jīng)Q定性作用[25]。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HD組血清MPO活性顯著高于ND組和HD+LA組，這說(shuō)明高飼養(yǎng)密度會(huì)使肉雞發(fā)生氧化應(yīng)激，進(jìn)而使血清MPO活性升高。同時(shí)，有研究指出，當(dāng)MPO與未激活的MPO集合到甘露糖受體上，使受體與配體之間相互作用，啟動(dòng)呼吸爆發(fā)，可加快氧氣消耗速度，同時(shí)激活膜結(jié)合的NOX[26]。這也與本試驗(yàn)中血清NOX活性在HD組較高的結(jié)果相一致。因此，推測(cè)LA可通過(guò)提高抗氧化性能和抑制氧化性能維持氧化還原狀態(tài)的穩(wěn)定，減輕由高飼養(yǎng)密度所造成的氧化應(yīng)激，進(jìn)而抑制體內(nèi)MPO活性的升高。

3.2 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞行為的影響

動(dòng)物的行為是由先天遺傳和后天環(huán)境影響復(fù)合所形成的，是動(dòng)物個(gè)體與其所處的有機(jī)或無(wú)機(jī)環(huán)境維持動(dòng)態(tài)平衡所必需的手段[27]。集約化高密度生產(chǎn)過(guò)程中把動(dòng)物限制在一個(gè)較小的活動(dòng)范圍內(nèi)，生存環(huán)境比較惡劣，正常行為得不到滿足，這種限制動(dòng)物表達(dá)自身天性自由的外界環(huán)境刺激會(huì)導(dǎo)致其表現(xiàn)出異常行為，影響畜禽體質(zhì)健康。許多研究指出，行為學(xué)是判斷畜禽疾病發(fā)生與否的可靠標(biāo)準(zhǔn)[6,28-29]。因此，肉雞行為的變化是評(píng)價(jià)肉雞健康和福利狀態(tài)的有效指標(biāo)[30]。本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示，相較于常規(guī)飼養(yǎng)密度，高飼養(yǎng)密度條件下肉雞的行走、梳翅、采食頻次和時(shí)間占比顯著降低。這可能是由于肉雞在高飼養(yǎng)密度條件下活動(dòng)空間受限，福利水平降低，其行走和梳翅行為受到明顯的空間限制所致。張?jiān)鲇竦萚31]在對(duì)不同飼養(yǎng)密度條件下肉雞行為的研究中發(fā)現(xiàn)，隨著飼養(yǎng)密度的增加，肉雞的運(yùn)動(dòng)越來(lái)越少，很少進(jìn)行抓、走動(dòng)、打扮等活動(dòng)。Buijs等[32]研究指出，增加飼養(yǎng)密度會(huì)提高雞群的恐懼性，導(dǎo)致其活動(dòng)頻率和頻次降低。也有研究發(fā)現(xiàn)，增加飼養(yǎng)密度會(huì)影響肉雞羽毛梳理，造成羽毛評(píng)分變差[33]。此外，Ventura等[34]和Simitzis等[35]研究發(fā)現(xiàn)，飼養(yǎng)密度的增加會(huì)導(dǎo)致雞群采食行為下降，降低棲息性，提高蹲臥活動(dòng)，這與本試驗(yàn)中高飼養(yǎng)密度使得肉雞采食頻次顯著下降以及趴臥時(shí)間占比顯著上升的結(jié)果相一致。

許多研究指出，高飼養(yǎng)密度不利于肉雞體熱的散發(fā)，且飼養(yǎng)密度為18只/m2時(shí)，雞群在夏秋季猝死率顯著升高[5-6]。這可能是由于高飼養(yǎng)密度環(huán)境下誘發(fā)肉雞偏熱應(yīng)激，肉雞可能采取減少采食和活動(dòng)來(lái)降低自身代謝，并通過(guò)增加飲水來(lái)緩解高飼養(yǎng)密度帶來(lái)的應(yīng)激，這與本試驗(yàn)中高飼養(yǎng)密度環(huán)境下肉雞飲水頻次和時(shí)間占比顯著升高的結(jié)果相吻合。Mack等[36]和胡春紅等[37]分別對(duì)蛋雞和肉雞進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，偏熱環(huán)境導(dǎo)致蛋雞、肉雞俯臥休息時(shí)間顯著增多。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，高飼養(yǎng)密度條件下，飼糧中添加LA對(duì)肉雞行走、采食、飲水、梳翅和趴臥等行為有不同程度的改善。然而，就目前研究現(xiàn)狀來(lái)看，有關(guān)LA對(duì)肉雞行為福利方面影響的研究比較罕見(jiàn)。在本實(shí)驗(yàn)室前期的研究中發(fā)現(xiàn)高飼養(yǎng)密度會(huì)增加肉雞的熱應(yīng)激，造成其生長(zhǎng)、免疫及抗氧化性能下降[4]，而LA的添加可以提高肉雞機(jī)體的抗氧化機(jī)能，降低體內(nèi)自由基對(duì)細(xì)胞膜的損傷，維持細(xì)胞膜功能，進(jìn)而緩解高溫造成的應(yīng)激[38]。因此，在飼糧中添加LA可有效降低高飼養(yǎng)密度介導(dǎo)的熱應(yīng)激，對(duì)肉雞的行為福利也有一定程度的改善作用。

3.3 飼養(yǎng)密度和LA對(duì)肉雞骨骼發(fā)育的影響

骨的密度、質(zhì)量、強(qiáng)度以及灰分和鈣、磷含量等是評(píng)價(jià)肉雞骨骼發(fā)育及其強(qiáng)度變化的重要指標(biāo)[21]。倪可德[39]指出，骨重占體重的相對(duì)比例(骨體比)是反映幼禽鈣、磷需要的敏感指標(biāo)，是反映骨骼發(fā)育狀況的指標(biāo)之一，其比例高，說(shuō)明鈣、磷的需求滿足程度高，骨骼的發(fā)育較好。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，高飼養(yǎng)密度對(duì)肉雞骨骼(脛骨和股骨)質(zhì)量、密度、骨體比、以及鈣、磷、灰分、礦物鹽含量等指標(biāo)均有不同程度的負(fù)面影響。有文獻(xiàn)指出，在高飼養(yǎng)密度條件下，家禽腿部健康易受影響[40]，脛骨軟骨發(fā)育不良情況發(fā)生率隨飼養(yǎng)密度的增加而增大[41]。Sun等[42]和張璐爽等[43]分別對(duì)肉雞和北京鴨進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，高飼養(yǎng)密度會(huì)導(dǎo)致脛骨灰分、鈣、磷含量降低；厲秀梅等[12]對(duì)肉雞的研究發(fā)現(xiàn)，高飼養(yǎng)密度組(18.75只/m2)的脛骨長(zhǎng)度和質(zhì)量顯著低于中、常規(guī)飼養(yǎng)密度組。本試驗(yàn)結(jié)果與以上研究結(jié)果相符合。

由前文可知，隨著飼養(yǎng)密度的增加，肉雞體內(nèi)氧化應(yīng)激越發(fā)明顯。有文獻(xiàn)指出，應(yīng)激過(guò)程中產(chǎn)生的自由基會(huì)刺激破骨細(xì)胞的分化作用，并誘導(dǎo)破骨細(xì)胞再次分泌自由基參與骨的再吸收過(guò)程，加劇骨基質(zhì)的降解[49-50]；并且，氧化應(yīng)激還會(huì)抑制成骨細(xì)胞的分化和增殖，影響骨基質(zhì)的形成[51]，這與本試驗(yàn)中高飼養(yǎng)密度下肉雞骨骼發(fā)育異常的結(jié)果相一致。白水莉[52]通過(guò)試驗(yàn)得出，高飼養(yǎng)密度和環(huán)境應(yīng)激對(duì)肉雞骨骼發(fā)育的影響很大，特別是在商業(yè)集約化養(yǎng)殖生產(chǎn)中。在本研究中，在高飼養(yǎng)密度肉雞飼糧中添加LA有效改善了肉雞骨骼發(fā)育的狀況。這可能是由于LA是一種抗氧化劑，對(duì)肉雞機(jī)體抗應(yīng)激，特別是自由基的清除起到重要作用，同LA在三羧酸循環(huán)和三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝中也發(fā)揮重要作用，它能夠提高骨骼肌細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝入能力，增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞內(nèi)線粒體的生物學(xué)功能。有文獻(xiàn)指出，LA能有效改善由氧化應(yīng)激導(dǎo)致的骨組織內(nèi)核因子-κB(NF-κB)配體受體致活劑(RANKL)的激活、護(hù)骨素(OPG)的抑制以及NF-κB和白細(xì)胞介素-6(IL-6)表達(dá)的增高，顯著緩解了骨質(zhì)疏松的程度[53]。朱琳玲[54]研究發(fā)現(xiàn)，LA的添加可顯著恢復(fù)由高脂飼糧引起的小鼠應(yīng)激所導(dǎo)致的股骨長(zhǎng)度、直徑和羥脯氨酸含量異?，F(xiàn)象。由此說(shuō)明，高飼養(yǎng)密度環(huán)境應(yīng)激下肉雞骨代謝發(fā)生紊亂，影響脛骨和股骨的發(fā)育，飼糧中添加LA后能有效改善飼養(yǎng)密度應(yīng)激對(duì)肉雞造成的損傷。

4 結(jié) 論

① 高飼養(yǎng)密度(18只/m2)會(huì)促使肉雞發(fā)生慢性應(yīng)激，導(dǎo)致血清鈣、磷含量降低，行為福利以及骨骼質(zhì)量下降。

② 飼糧中添加LA可以在一定程度上緩解由于飼養(yǎng)密度過(guò)高引發(fā)的應(yīng)激反應(yīng)，并能有效改善飼養(yǎng)密度應(yīng)激對(duì)肉雞造成的損傷。