鄧 銘 池 宙 林東波 楊鎮(zhèn)瑋 于國安 許小斌 郭勇慶* 劉德武*

(1.華南農業(yè)大學動物科學學院，廣州510642；2.廣東省食品進出口集團有限公司，廣州510100；3.河源市天楮農牧業(yè)有限公司，河源517001)

斷奶期是養(yǎng)豬生產中的關鍵階段，此期間仔豬胃腸道逐漸發(fā)育完善，并開始獨立攝取營養(yǎng)物質。但是，斷奶仔豬腸道發(fā)育不完全，受采食方式和營養(yǎng)變化的刺激，易發(fā)生應激、腹瀉等癥狀，造成生長遲緩，因此斷奶階段飼養(yǎng)的優(yōu)劣將直接影響豬場的生產效益[1]。同時，從2020年7月1日起，飼料企業(yè)停止生產含有抗生素類添加劑的產品，我國生豬養(yǎng)殖行業(yè)迎來重大變革。因此，通過發(fā)酵飼料及其組成調控仔豬的胃腸道菌群、提高生長性能和免疫功能、控制腹瀉等，對斷奶仔豬的飼養(yǎng)意義重大[2-4]。

構樹是我國優(yōu)良的非常規(guī)飼料，含有多種活性物質，有涼血清淤、抗氧化、提高免疫力等功效。近年來，構樹飼料及其發(fā)酵產品在雞、育肥豬、牛、羊養(yǎng)殖中取得了良好的應用效果[5-6]，但在斷奶仔豬上的應用研究相對缺乏。本研究前期對全株構樹進行青貯試驗，發(fā)現青貯后構樹粗蛋白質含量升高10.40%，粗脂肪含量升高52.21%，粗纖維含量下降6.87%[7]。因此，結合飼料中全面禁抗的實際情況，根據斷奶仔豬的生理特性，在飼糧中添加適宜比例的發(fā)酵構樹飼料，在減輕斷奶應激和提高生長性能等方面具有較高的應用價值。本試驗旨在用不同比例發(fā)酵構樹飼料替代基礎飼糧，研究其對仔豬生長性能、養(yǎng)分表觀消化率和血清生化指標的影響，為發(fā)酵構樹飼料在斷奶仔豬上的合理使用提供數據支撐，為減抗、替抗時代的仔豬健康養(yǎng)殖提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

發(fā)酵構樹飼料由河源市某牧業(yè)有限公司提供。構樹全株(高度1.2 m，留茬約20 cm)收割后曬干粉碎(去除木質化嚴重的莖桿)，按構樹粉85.0%、玉米粉8.0%、益生菌(主要成分為酵母菌、乳酸菌和芽孢桿菌)2.5%、甘蔗糖蜜4.5%，混勻，密封發(fā)酵3～5 d。發(fā)酵構樹飼料的風干物質營養(yǎng)成分含量為：干物質55.00%，粗蛋白質17.80%，粗脂肪1.75%，粗纖維13.14%，粗灰分12.06%，鈣1.36%，磷1.07%。

1.2 試驗設計與飼糧

本試驗在廣東省汕尾市寶山豬場有限公司進行。選用35日齡、體重為(7.4±1.1) kg的健康三元(杜×長×大)斷奶仔豬216頭，按體重相近和公母各占1/2原則隨機分為Ⅰ(對照)、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組，每組3個重復，每個重復18頭仔豬。其中，Ⅰ組飼喂基礎飼糧，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別用3%、6%和9%的發(fā)酵構樹飼料替代基礎飼糧。預試期5 d，正試期25 d。試驗飼糧參照NRC(2012)營養(yǎng)需要配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

試驗仔豬均飼養(yǎng)于全封閉、負壓通風、全漏縫地板保育舍，自由采食和飲水，投料量以料槽中略有余料為度。試驗前按照豬場的管理程序對保育舍進行殺菌清潔，定時打掃圈舍。仔豬的疫苗注射、驅蟲、檢查等操作按豬場規(guī)定步驟實施。

1.3 樣品采集及檢測

1.3.1 生長性能和腹瀉率

以每個重復為單位，準確記錄每日投料量及剩料量，計算每只仔豬的平均日采食量(ADFI)。正式試驗開始前和結束后的清晨，稱重并記錄每只試驗豬的空腹(斷食12 h)體重，計算平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。試驗期每天09:00和17:00逐頭檢查仔豬肛門，觀察有無糞便污染及紅腫，并做好記錄，試驗結束后統(tǒng)計腹瀉頭數，腹瀉率計算公式如下：

腹瀉率(%)=100×腹瀉頭數/
(試驗豬頭數×試驗天數)。

1.3.2 養(yǎng)分表觀消化率

正試期第22～24天連續(xù)采集各組飼糧樣品。新鮮糞樣于正試期第23～25天早、晚2次以每個重復為單位收集。飼糧中粗蛋白質、粗脂肪、鈣和磷表觀消化率使用鹽酸不溶灰分(AIA)法測定，計算公式如下：

某養(yǎng)分表觀消化率(%)=100×[1-(飼糧中
AIA含量/糞中AIA含量)×(糞中該養(yǎng)分含量/
飼糧中該養(yǎng)分含量)]。

1.3.3 血清生化指標

試驗結束當天，晨飼前每重復隨機取3頭仔豬，前腔靜脈采集10 mL血液，靜置1 h，3 000 r/min離心5 min，分離血清置于-20 ℃下保存待用。

血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、總膽固醇(TC)、葡萄糖(GLU)含量及谷草轉氨酶(AST)、谷丙轉氨酶(ALT)活性采用日立全自動生化分析儀(OLYMPUS-AU600)測定，檢測試劑盒均購自中生北控生物科技公司。

1.3.4 血清抗氧化指標

血清中丙二醛(MDA)含量、總抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性采用尤尼柯分光光度計(UNICO-7200)測定，檢測試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.4 數據處理與統(tǒng)計分析

試驗數據使用Excel 2016進行數據整理，采用SPSS 22.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，采用LSD多重比較法進行多組間的差異顯著性分析，數據均以平均值±標準誤表示，以P<0.05作為差異顯著的判定標準。

2 結果與分析

2.1 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬生長性能的影響

由表2可知，各組間初重和末重均無顯著差異(P>0.05)。與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組腹瀉率均顯著降低(P<0.001)，分別下降22.51%、37.17%和53.51%。其中，Ⅳ組的腹瀉率最低，與Ⅱ、Ⅲ組相比，分別顯著降低18.92%和40.00%(P<0.05)。與Ⅰ組相比，Ⅲ、Ⅳ組ADFI和ADG有升高趨勢，分別增加了8.06%、6.81%和7.35%、5.84%(P>0.05)；但從料重比上看，Ⅱ組略低(P>0.05)。

表2 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

由表3可知，與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的粗蛋白質表觀消化率顯著降低4.69%、5.13%和6.33%(P=0.001)，鈣表觀消化率顯著降低20.46%、25.27%和26.41%(P=0.046)；Ⅲ、Ⅳ組粗脂肪表觀消化率顯著低于Ⅰ組(P=0.001)，Ⅰ、Ⅱ組間無顯著差異(P>0.05)；與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組磷表觀消化率分別降低了5.88%、7.56%和9.48%(P<0.001)，Ⅱ、Ⅲ組之間和Ⅲ、Ⅳ組之間無顯著差異(P>0.05)。

表3 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

2.3 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬血清生化指標的影響

由表4可知，Ⅲ組仔豬血清TC含量顯著低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ組(P<0.05)。從血清中TP、ALB和GLB含量上看，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組均較Ⅰ組有升高趨勢，

但未達到顯著水平(P>0.05)。Ⅲ組血清AST和ALT活性與Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ組相比有升高趨勢(P>0.05)。各組間血清UN和GLU含量差異不顯著(P>0.05)。

表4 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬血清生化指標的影響

2.4 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬血清抗氧化指標的影響

由表5可知，各組間血清抗氧化指標差異均不顯著(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ組血清MDA含量均高于Ⅰ組，Ⅳ組低于Ⅰ組。與Ⅰ組相比，Ⅲ、Ⅳ組的血清SOD活性呈上升趨勢，Ⅱ組則相反。Ⅱ、Ⅲ組血清T-AOC低于Ⅰ組，Ⅳ組高于Ⅰ組。

3 討 論

3.1 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬生長性能的影響

構樹飼料經發(fā)酵后粗纖維含量降低，適口性得到改善；同時，發(fā)酵過程中產生大量乳酸和其他具有芳香性的抗氧化物質會促進動物唾液和消化液的分泌，能夠有效刺激斷奶仔豬的食欲，進而增強生長性能[8-9]。本研究發(fā)現，不同比例的發(fā)酵構樹替代基礎飼糧有提高斷奶仔豬ADFI和ADG的趨勢，其中6%替代比例效果最好，9%替代比例組ADFI和ADG開始下降，但無顯著差異。這可能原因是：1)試驗在7—8月進行，室內溫度基本處于27～32 ℃，此時斷奶仔豬處于熱應激狀態(tài)，采食量受到環(huán)境溫度的抑制[10]；2)斷奶仔豬的飼糧為

粉末狀干料，適口性相對較差，影響斷奶仔豬的采食量[11]。這2個方面原因共同抑制了發(fā)酵構樹飼料對采食量的促進作用。

表5 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬血清抗氧化指標的影響

構樹飼料發(fā)酵后含有大量益生菌，為腸道有益菌的繁殖提供了良好的環(huán)境，促進了腸道對大腸桿菌等病菌的屏障作用，提高了仔豬免疫力，降低了腹瀉率。胡新旭等[12]發(fā)現乳酸菌發(fā)酵飼料能降低斷奶仔豬腹瀉率，改善腸道微生物平衡。王曉明等[13]發(fā)現乳酸菌和復合蛋白酶制備的液體發(fā)酵飼料能增強斷奶仔豬生長性能，改善胃腸機理，是優(yōu)質的飼糧。王曉丹等[14]發(fā)現枯草芽孢桿菌顯著降低斷奶仔豬的腹瀉率，增加日增重。本研究結果表明，不同比例發(fā)酵構樹飼料替代基礎飼糧均可顯著降低腹瀉率，替代比例越高，降低趨勢越大。這可能原因是：1)斷奶仔豬的腸道菌群易受飼糧影響，發(fā)酵飼料中的大量益生菌可有效提高腸道的屏障作用，減少病菌的入侵[15]；2)斷奶仔豬腸道發(fā)育不全，一定含量的粗纖維反而促進腸道蠕動，有利于腸道健康。

3.2 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

構樹作為木本飼料的一種，營養(yǎng)結構相對復雜，粗纖維含量較高，不利于單胃動物的消化吸收[16]。即使經發(fā)酵后，依舊有很多養(yǎng)分隨畜禽糞便排出，使表觀消化率降低。構樹飼料中含有單寧，會在動物的腸道內與蛋白質和部分蛋白質消化酶結合成不溶性復合物，減少飼料的可消化利用比例[17]。Lavin等[18]還發(fā)現，單寧還可與鐵、銅等離子絡合形成螯合物，從而降低礦物質離子的消化吸收率，甚至影響飼養(yǎng)動物的健康程度。除單寧外，發(fā)酵構樹飼料還含有一部分的木質素、植酸、生物堿等抗營養(yǎng)因子，它們同時抑制養(yǎng)分的表觀消化率。何國英[19]在生長豬基礎飼糧中添加構樹葉粉，發(fā)現生長豬對各營養(yǎng)指標的表觀消化率明顯偏小，表明飼糧中的構樹葉粉會阻礙養(yǎng)分的消化吸收，降低養(yǎng)分的表觀消化率。在本研究中，發(fā)現3%、6%、9%替代比例組粗蛋白質、磷和鈣表觀消化率顯著低于對照組，且不同替代比例組之間無顯著差異；對照組和3%替代比例組粗脂肪消化率差異不顯著，但6%和9%替代比例組顯著低于對照組。其原因可能是：發(fā)酵構樹飼料中殘存的抗營養(yǎng)成分抵消了有益菌群對養(yǎng)分吸收率的增益作用，導致表觀消化率降低。

3.3 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬血清生化指標的影響

血清中UN含量的減少，反映了機體對UN的沉積量增加，氮的利用率提高[8]。高印[20]研究發(fā)現，仔豬飼糧中添加6%益生菌發(fā)酵蘋果渣可以顯著降低血清UN含量，促進生長。本研究中，各組間血清UN含量差異不顯著，說明一定比例發(fā)酵構樹飼料不影響機體對氮的利用效率。

AST和ALT活性反映肝臟對蛋白質和氨基酸的代謝能力，以及心臟和肝臟的健康狀況，其活性上升可能表示心臟、肝臟正經受損傷[21-22]。本試驗中，相比對照組，使用3%替代比例的發(fā)酵構樹飼料能降低血清AST活性，但替代比例達6%以上時，其活性在數值上出現較明顯的上升。其原因可能是發(fā)酵構樹飼料中含有較為復雜的藥用成分，如黃酮、糖苷類、內酯類等，添加的劑量過多會加重幼畜肝臟負擔，肝細胞受損破裂，從而反映出的現象是血清AST和ALT活性上升[22-23]。

TC含量能反映機體脂肪代謝情況，血液TC含量過高會增加動脈粥樣硬化和患心臟病的危險，因此維持機體膽固醇的內環(huán)境穩(wěn)態(tài)對機體非常重要[24]。研究發(fā)現，飼糧中添加構樹葉粉對生長豬的脂肪沉積有積極影響[25]。蔣小碟等[26]發(fā)現發(fā)酵桑葉可降低血脂。鄺哲師等[27]發(fā)現用發(fā)酵蠶蛹豆粕粉替代25%的魚粉，會顯著提高血清中TC的含量。本試驗中6%替代比例組血清TC含量顯著降低，說明6%替代比例可促進仔豬的脂類代謝能力，加速皮下脂肪沉積和提高育肥效率，這與6%替代比例組仔豬的ADG最高相一致。GLU是細胞的能量來源和新陳代謝中間產物，是單胃動物最直接的能量來源。本試驗各組仔豬血清GLU含量差異不顯著，說明發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬的糖類物質代謝影響不明顯。

血清蛋白具有維持理化性質平衡、抑制有毒有害物質傳播的作用。動物的代謝系統(tǒng)總是盡可能維持血漿蛋白質、氨基酸和組織蛋白之間的平衡[28]。同時血清中TP和ALB含量反映了飼糧中蛋白質在體內吸收和水解代謝的情況。王曉明等[13]發(fā)現，液體發(fā)酵飼料能提高保育豬血清中TP含量。Cho等[29]研究發(fā)現，飼喂10%或15%的發(fā)酵大豆蛋白于保育豬飼糧中能提高飼料效率及血清ALB和TP含量。王玉田等[30]發(fā)現，飼喂含枯草芽孢桿菌等復合益生菌的發(fā)酵飼料能提高斷奶仔豬血清中TP含量。本試驗中，3%、6%、9%替代比例組斷奶仔豬的血清TP、ALB和GLB含量在數值上與對照組相比有不同程度的增加趨勢，與前人研究結果一致，說明發(fā)酵構樹飼料可提高仔豬對飼糧蛋白質的吸收和代謝。

3.4 發(fā)酵構樹飼料對斷奶仔豬血清抗氧化指標的影響

氧化應激是斷奶仔豬保育階段的常見問題，仔豬斷奶后抗氧化應激能力低下的現象普遍存在，對健康狀態(tài)和生長效率產生較大的影響[31]。MDA是機體脂質過氧化反應的最終產物，其含量直接反映脂質經受的氧化損害，間接反映動物體細胞的受損程度[32]。SOD是動物體內的一類抗氧化酶，其活性效力的高低能有效反映機體清除自由基的能力[33]。T-AOC反映機體內酶促和非酶促抗氧化系統(tǒng)整體對氧自由基的清除能力，可用于監(jiān)測機體健康狀況[34]。當動物機體處在氧化應激狀態(tài)下時，體內自由基氧化還原的動態(tài)平衡破壞，一部分自由基經SOD等酶促抗氧化系統(tǒng)還原成H2O；另一部分則侵入細胞內，損傷機體細胞膜、細胞器，與脂質成分過氧化反應生成MDA，進而影響T-AOC。本試驗中3%、6%、9%替代比例組血清SOD活性、MDA含量呈現先升后降的趨勢，T-AOC先降后升，未對仔豬的抗氧化指標產生顯著影響。其原因可能是：仔豬處于斷奶和高溫雙重應激，血清MDA含量較高，但隨著發(fā)酵構樹飼料替代比例的提高，血清中SOD活性增加，T-AOC增強，緩解了仔豬應激，血清MDA含量逐漸下降。

綜上所述,發(fā)酵構樹飼料對腹瀉的顯著改善，可能是一定水平的粗纖維降低了粗蛋白質的消化率。今后的研究應充分考慮構樹的適宜刈割高度和木質化程度，或使用構樹葉、更嫩的全株構樹；以腸道發(fā)育和微生物多樣性為切入點，研究發(fā)酵構樹飼料在降低腹瀉、提高ADG、不顯著降低養(yǎng)分消化率三者之間的平衡點。

4 結 論

① 不同比例發(fā)酵構樹飼料替代基礎飼糧，顯著降低了斷奶仔豬腹瀉率，ADFI、ADG、F/G無顯著差異，6%為適宜的替代比例。

② 不同比例發(fā)酵構樹飼料替代基礎飼糧，顯著降低了粗蛋白質、粗脂肪、磷、鈣表觀消化率；6%替代比例顯著降低了斷奶仔豬血清TC含量，未對MDA含量、T-AOC和SOD活性產生顯著影響。