鄧 銘 池 宙 林東波 楊鎮(zhèn)瑋 于國安 許小斌 郭勇慶* 劉德武*

(1.華南農(nóng)業(yè)大學動物科學學院，廣州510642；2.廣東省食品進出口集團有限公司，廣州510100；3.河源市天楮農(nóng)牧業(yè)有限公司，河源517001)

斷奶期是養(yǎng)豬生產(chǎn)中的關鍵階段，此期間仔豬胃腸道逐漸發(fā)育完善，并開始獨立攝取營養(yǎng)物質(zhì)。但是，斷奶仔豬腸道發(fā)育不完全，受采食方式和營養(yǎng)變化的刺激，易發(fā)生應激、腹瀉等癥狀，造成生長遲緩，因此斷奶階段飼養(yǎng)的優(yōu)劣將直接影響豬場的生產(chǎn)效益[1]。同時，從2020年7月1日起，飼料企業(yè)停止生產(chǎn)含有抗生素類添加劑的產(chǎn)品，我國生豬養(yǎng)殖行業(yè)迎來重大變革。因此，通過發(fā)酵飼料及其組成調(diào)控仔豬的胃腸道菌群、提高生長性能和免疫功能、控制腹瀉等，對斷奶仔豬的飼養(yǎng)意義重大[2-4]。

構(gòu)樹是我國優(yōu)良的非常規(guī)飼料，含有多種活性物質(zhì)，有涼血清淤、抗氧化、提高免疫力等功效。近年來，構(gòu)樹飼料及其發(fā)酵產(chǎn)品在雞、育肥豬、牛、羊養(yǎng)殖中取得了良好的應用效果[5-6]，但在斷奶仔豬上的應用研究相對缺乏。本研究前期對全株構(gòu)樹進行青貯試驗，發(fā)現(xiàn)青貯后構(gòu)樹粗蛋白質(zhì)含量升高10.40%，粗脂肪含量升高52.21%，粗纖維含量下降6.87%[7]。因此，結(jié)合飼料中全面禁抗的實際情況，根據(jù)斷奶仔豬的生理特性，在飼糧中添加適宜比例的發(fā)酵構(gòu)樹飼料，在減輕斷奶應激和提高生長性能等方面具有較高的應用價值。本試驗旨在用不同比例發(fā)酵構(gòu)樹飼料替代基礎飼糧，研究其對仔豬生長性能、養(yǎng)分表觀消化率和血清生化指標的影響，為發(fā)酵構(gòu)樹飼料在斷奶仔豬上的合理使用提供數(shù)據(jù)支撐，為減抗、替抗時代的仔豬健康養(yǎng)殖提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

發(fā)酵構(gòu)樹飼料由河源市某牧業(yè)有限公司提供。構(gòu)樹全株(高度1.2 m，留茬約20 cm)收割后曬干粉碎(去除木質(zhì)化嚴重的莖桿)，按構(gòu)樹粉85.0%、玉米粉8.0%、益生菌(主要成分為酵母菌、乳酸菌和芽孢桿菌)2.5%、甘蔗糖蜜4.5%，混勻，密封發(fā)酵3～5 d。發(fā)酵構(gòu)樹飼料的風干物質(zhì)營養(yǎng)成分含量為：干物質(zhì)55.00%，粗蛋白質(zhì)17.80%，粗脂肪1.75%，粗纖維13.14%，粗灰分12.06%，鈣1.36%，磷1.07%。

1.2 試驗設計與飼糧

本試驗在廣東省汕尾市寶山豬場有限公司進行。選用35日齡、體重為(7.4±1.1) kg的健康三元(杜×長×大)斷奶仔豬216頭，按體重相近和公母各占1/2原則隨機分為Ⅰ(對照)、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組，每組3個重復，每個重復18頭仔豬。其中，Ⅰ組飼喂基礎飼糧，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別用3%、6%和9%的發(fā)酵構(gòu)樹飼料替代基礎飼糧。預試期5 d，正試期25 d。試驗飼糧參照NRC(2012)營養(yǎng)需要配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

試驗仔豬均飼養(yǎng)于全封閉、負壓通風、全漏縫地板保育舍，自由采食和飲水，投料量以料槽中略有余料為度。試驗前按照豬場的管理程序?qū)ΡＳ徇M行殺菌清潔，定時打掃圈舍。仔豬的疫苗注射、驅(qū)蟲、檢查等操作按豬場規(guī)定步驟實施。

1.3 樣品采集及檢測

1.3.1 生長性能和腹瀉率

以每個重復為單位，準確記錄每日投料量及剩料量，計算每只仔豬的平均日采食量(ADFI)。正式試驗開始前和結(jié)束后的清晨，稱重并記錄每只試驗豬的空腹(斷食12 h)體重，計算平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。試驗期每天09:00和17:00逐頭檢查仔豬肛門，觀察有無糞便污染及紅腫，并做好記錄，試驗結(jié)束后統(tǒng)計腹瀉頭數(shù)，腹瀉率計算公式如下：

腹瀉率(%)=100×腹瀉頭數(shù)/
(試驗豬頭數(shù)×試驗天數(shù))。

1.3.2 養(yǎng)分表觀消化率

正試期第22～24天連續(xù)采集各組飼糧樣品。新鮮糞樣于正試期第23～25天早、晚2次以每個重復為單位收集。飼糧中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣和磷表觀消化率使用鹽酸不溶灰分(AIA)法測定，計算公式如下：

某養(yǎng)分表觀消化率(%)=100×[1-(飼糧中
AIA含量/糞中AIA含量)×(糞中該養(yǎng)分含量/
飼糧中該養(yǎng)分含量)]。

1.3.3 血清生化指標

試驗結(jié)束當天，晨飼前每重復隨機取3頭仔豬，前腔靜脈采集10 mL血液，靜置1 h，3 000 r/min離心5 min，分離血清置于-20 ℃下保存待用。

血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、總膽固醇(TC)、葡萄糖(GLU)含量及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性采用日立全自動生化分析儀(OLYMPUS-AU600)測定，檢測試劑盒均購自中生北控生物科技公司。

1.3.4 血清抗氧化指標

血清中丙二醛(MDA)含量、總抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性采用尤尼柯分光光度計(UNICO-7200)測定，檢測試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)使用Excel 2016進行數(shù)據(jù)整理，采用SPSS 22.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，采用LSD多重比較法進行多組間的差異顯著性分析，數(shù)據(jù)均以平均值±標準誤表示，以P<0.05作為差異顯著的判定標準。

2 結(jié)果與分析

2.1 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬生長性能的影響

由表2可知，各組間初重和末重均無顯著差異(P>0.05)。與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組腹瀉率均顯著降低(P<0.001)，分別下降22.51%、37.17%和53.51%。其中，Ⅳ組的腹瀉率最低，與Ⅱ、Ⅲ組相比，分別顯著降低18.92%和40.00%(P<0.05)。與Ⅰ組相比，Ⅲ、Ⅳ組ADFI和ADG有升高趨勢，分別增加了8.06%、6.81%和7.35%、5.84%(P>0.05)；但從料重比上看，Ⅱ組略低(P>0.05)。

表2 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

由表3可知，與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的粗蛋白質(zhì)表觀消化率顯著降低4.69%、5.13%和6.33%(P=0.001)，鈣表觀消化率顯著降低20.46%、25.27%和26.41%(P=0.046)；Ⅲ、Ⅳ組粗脂肪表觀消化率顯著低于Ⅰ組(P=0.001)，Ⅰ、Ⅱ組間無顯著差異(P>0.05)；與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組磷表觀消化率分別降低了5.88%、7.56%和9.48%(P<0.001)，Ⅱ、Ⅲ組之間和Ⅲ、Ⅳ組之間無顯著差異(P>0.05)。

表3 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

2.3 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬血清生化指標的影響

由表4可知，Ⅲ組仔豬血清TC含量顯著低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ組(P<0.05)。從血清中TP、ALB和GLB含量上看，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組均較Ⅰ組有升高趨勢，

但未達到顯著水平(P>0.05)。Ⅲ組血清AST和ALT活性與Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ組相比有升高趨勢(P>0.05)。各組間血清UN和GLU含量差異不顯著(P>0.05)。

表4 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬血清生化指標的影響

2.4 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬血清抗氧化指標的影響

由表5可知，各組間血清抗氧化指標差異均不顯著(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ組血清MDA含量均高于Ⅰ組，Ⅳ組低于Ⅰ組。與Ⅰ組相比，Ⅲ、Ⅳ組的血清SOD活性呈上升趨勢，Ⅱ組則相反。Ⅱ、Ⅲ組血清T-AOC低于Ⅰ組，Ⅳ組高于Ⅰ組。

3 討 論

3.1 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬生長性能的影響

構(gòu)樹飼料經(jīng)發(fā)酵后粗纖維含量降低，適口性得到改善；同時，發(fā)酵過程中產(chǎn)生大量乳酸和其他具有芳香性的抗氧化物質(zhì)會促進動物唾液和消化液的分泌，能夠有效刺激斷奶仔豬的食欲，進而增強生長性能[8-9]。本研究發(fā)現(xiàn)，不同比例的發(fā)酵構(gòu)樹替代基礎飼糧有提高斷奶仔豬ADFI和ADG的趨勢，其中6%替代比例效果最好，9%替代比例組ADFI和ADG開始下降，但無顯著差異。這可能原因是：1)試驗在7—8月進行，室內(nèi)溫度基本處于27～32 ℃，此時斷奶仔豬處于熱應激狀態(tài)，采食量受到環(huán)境溫度的抑制[10]；2)斷奶仔豬的飼糧為

粉末狀干料，適口性相對較差，影響斷奶仔豬的采食量[11]。這2個方面原因共同抑制了發(fā)酵構(gòu)樹飼料對采食量的促進作用。

表5 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬血清抗氧化指標的影響

構(gòu)樹飼料發(fā)酵后含有大量益生菌，為腸道有益菌的繁殖提供了良好的環(huán)境，促進了腸道對大腸桿菌等病菌的屏障作用，提高了仔豬免疫力，降低了腹瀉率。胡新旭等[12]發(fā)現(xiàn)乳酸菌發(fā)酵飼料能降低斷奶仔豬腹瀉率，改善腸道微生物平衡。王曉明等[13]發(fā)現(xiàn)乳酸菌和復合蛋白酶制備的液體發(fā)酵飼料能增強斷奶仔豬生長性能，改善胃腸機理，是優(yōu)質(zhì)的飼糧。王曉丹等[14]發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌顯著降低斷奶仔豬的腹瀉率，增加日增重。本研究結(jié)果表明，不同比例發(fā)酵構(gòu)樹飼料替代基礎飼糧均可顯著降低腹瀉率，替代比例越高，降低趨勢越大。這可能原因是：1)斷奶仔豬的腸道菌群易受飼糧影響，發(fā)酵飼料中的大量益生菌可有效提高腸道的屏障作用，減少病菌的入侵[15]；2)斷奶仔豬腸道發(fā)育不全，一定含量的粗纖維反而促進腸道蠕動，有利于腸道健康。

3.2 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響

構(gòu)樹作為木本飼料的一種，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)相對復雜，粗纖維含量較高，不利于單胃動物的消化吸收[16]。即使經(jīng)發(fā)酵后，依舊有很多養(yǎng)分隨畜禽糞便排出，使表觀消化率降低。構(gòu)樹飼料中含有單寧，會在動物的腸道內(nèi)與蛋白質(zhì)和部分蛋白質(zhì)消化酶結(jié)合成不溶性復合物，減少飼料的可消化利用比例[17]。Lavin等[18]還發(fā)現(xiàn)，單寧還可與鐵、銅等離子絡合形成螯合物，從而降低礦物質(zhì)離子的消化吸收率，甚至影響飼養(yǎng)動物的健康程度。除單寧外，發(fā)酵構(gòu)樹飼料還含有一部分的木質(zhì)素、植酸、生物堿等抗營養(yǎng)因子，它們同時抑制養(yǎng)分的表觀消化率。何國英[19]在生長豬基礎飼糧中添加構(gòu)樹葉粉，發(fā)現(xiàn)生長豬對各營養(yǎng)指標的表觀消化率明顯偏小，表明飼糧中的構(gòu)樹葉粉會阻礙養(yǎng)分的消化吸收，降低養(yǎng)分的表觀消化率。在本研究中，發(fā)現(xiàn)3%、6%、9%替代比例組粗蛋白質(zhì)、磷和鈣表觀消化率顯著低于對照組，且不同替代比例組之間無顯著差異；對照組和3%替代比例組粗脂肪消化率差異不顯著，但6%和9%替代比例組顯著低于對照組。其原因可能是：發(fā)酵構(gòu)樹飼料中殘存的抗營養(yǎng)成分抵消了有益菌群對養(yǎng)分吸收率的增益作用，導致表觀消化率降低。

3.3 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬血清生化指標的影響

血清中UN含量的減少，反映了機體對UN的沉積量增加，氮的利用率提高[8]。高印[20]研究發(fā)現(xiàn)，仔豬飼糧中添加6%益生菌發(fā)酵蘋果渣可以顯著降低血清UN含量，促進生長。本研究中，各組間血清UN含量差異不顯著，說明一定比例發(fā)酵構(gòu)樹飼料不影響機體對氮的利用效率。

AST和ALT活性反映肝臟對蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝能力，以及心臟和肝臟的健康狀況，其活性上升可能表示心臟、肝臟正經(jīng)受損傷[21-22]。本試驗中，相比對照組，使用3%替代比例的發(fā)酵構(gòu)樹飼料能降低血清AST活性，但替代比例達6%以上時，其活性在數(shù)值上出現(xiàn)較明顯的上升。其原因可能是發(fā)酵構(gòu)樹飼料中含有較為復雜的藥用成分，如黃酮、糖苷類、內(nèi)酯類等，添加的劑量過多會加重幼畜肝臟負擔，肝細胞受損破裂，從而反映出的現(xiàn)象是血清AST和ALT活性上升[22-23]。

TC含量能反映機體脂肪代謝情況，血液TC含量過高會增加動脈粥樣硬化和患心臟病的危險，因此維持機體膽固醇的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)對機體非常重要[24]。研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加構(gòu)樹葉粉對生長豬的脂肪沉積有積極影響[25]。蔣小碟等[26]發(fā)現(xiàn)發(fā)酵桑葉可降低血脂。鄺哲師等[27]發(fā)現(xiàn)用發(fā)酵蠶蛹豆粕粉替代25%的魚粉，會顯著提高血清中TC的含量。本試驗中6%替代比例組血清TC含量顯著降低，說明6%替代比例可促進仔豬的脂類代謝能力，加速皮下脂肪沉積和提高育肥效率，這與6%替代比例組仔豬的ADG最高相一致。GLU是細胞的能量來源和新陳代謝中間產(chǎn)物，是單胃動物最直接的能量來源。本試驗各組仔豬血清GLU含量差異不顯著，說明發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬的糖類物質(zhì)代謝影響不明顯。

血清蛋白具有維持理化性質(zhì)平衡、抑制有毒有害物質(zhì)傳播的作用。動物的代謝系統(tǒng)總是盡可能維持血漿蛋白質(zhì)、氨基酸和組織蛋白之間的平衡[28]。同時血清中TP和ALB含量反映了飼糧中蛋白質(zhì)在體內(nèi)吸收和水解代謝的情況。王曉明等[13]發(fā)現(xiàn)，液體發(fā)酵飼料能提高保育豬血清中TP含量。Cho等[29]研究發(fā)現(xiàn)，飼喂10%或15%的發(fā)酵大豆蛋白于保育豬飼糧中能提高飼料效率及血清ALB和TP含量。王玉田等[30]發(fā)現(xiàn)，飼喂含枯草芽孢桿菌等復合益生菌的發(fā)酵飼料能提高斷奶仔豬血清中TP含量。本試驗中，3%、6%、9%替代比例組斷奶仔豬的血清TP、ALB和GLB含量在數(shù)值上與對照組相比有不同程度的增加趨勢，與前人研究結(jié)果一致，說明發(fā)酵構(gòu)樹飼料可提高仔豬對飼糧蛋白質(zhì)的吸收和代謝。

3.4 發(fā)酵構(gòu)樹飼料對斷奶仔豬血清抗氧化指標的影響

氧化應激是斷奶仔豬保育階段的常見問題，仔豬斷奶后抗氧化應激能力低下的現(xiàn)象普遍存在，對健康狀態(tài)和生長效率產(chǎn)生較大的影響[31]。MDA是機體脂質(zhì)過氧化反應的最終產(chǎn)物，其含量直接反映脂質(zhì)經(jīng)受的氧化損害，間接反映動物體細胞的受損程度[32]。SOD是動物體內(nèi)的一類抗氧化酶，其活性效力的高低能有效反映機體清除自由基的能力[33]。T-AOC反映機體內(nèi)酶促和非酶促抗氧化系統(tǒng)整體對氧自由基的清除能力，可用于監(jiān)測機體健康狀況[34]。當動物機體處在氧化應激狀態(tài)下時，體內(nèi)自由基氧化還原的動態(tài)平衡破壞，一部分自由基經(jīng)SOD等酶促抗氧化系統(tǒng)還原成H2O；另一部分則侵入細胞內(nèi)，損傷機體細胞膜、細胞器，與脂質(zhì)成分過氧化反應生成MDA，進而影響T-AOC。本試驗中3%、6%、9%替代比例組血清SOD活性、MDA含量呈現(xiàn)先升后降的趨勢，T-AOC先降后升，未對仔豬的抗氧化指標產(chǎn)生顯著影響。其原因可能是：仔豬處于斷奶和高溫雙重應激，血清MDA含量較高，但隨著發(fā)酵構(gòu)樹飼料替代比例的提高，血清中SOD活性增加，T-AOC增強，緩解了仔豬應激，血清MDA含量逐漸下降。

綜上所述,發(fā)酵構(gòu)樹飼料對腹瀉的顯著改善，可能是一定水平的粗纖維降低了粗蛋白質(zhì)的消化率。今后的研究應充分考慮構(gòu)樹的適宜刈割高度和木質(zhì)化程度，或使用構(gòu)樹葉、更嫩的全株構(gòu)樹；以腸道發(fā)育和微生物多樣性為切入點，研究發(fā)酵構(gòu)樹飼料在降低腹瀉、提高ADG、不顯著降低養(yǎng)分消化率三者之間的平衡點。

4 結(jié) 論

① 不同比例發(fā)酵構(gòu)樹飼料替代基礎飼糧，顯著降低了斷奶仔豬腹瀉率，ADFI、ADG、F/G無顯著差異，6%為適宜的替代比例。

② 不同比例發(fā)酵構(gòu)樹飼料替代基礎飼糧，顯著降低了粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、磷、鈣表觀消化率；6%替代比例顯著降低了斷奶仔豬血清TC含量，未對MDA含量、T-AOC和SOD活性產(chǎn)生顯著影響。