蘇秀麗 王同生 張英劍
關(guān)于網(wǎng)膜蛋白-1(omentin-1)、內(nèi)臟脂肪組織來(lái)源的絲氨酸蛋白酶抑制劑(visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor,vaspin)這些脂肪因子在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的發(fā)病機(jī)制和炎癥影響情況尚不清楚[1-3]。本研究通過(guò)檢測(cè)NAFLD患者omentin-1、vaspin、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和C反應(yīng)蛋白(creactive protein,CRP)血清水平,評(píng)估這些脂肪因子與NAFLD患者IL-6和CRP的關(guān)系。
2014年3月至2019年3月在河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化科門診和病房診斷的NAFLD患者,均符合NAFLD的診斷標(biāo)準(zhǔn)。入選標(biāo)準(zhǔn):NAFLD診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)《非酒精性脂肪性肝病診療指南》[4]。入選患者由3名固定的、有經(jīng)驗(yàn)的高年資醫(yī)生討論通過(guò)。
138名NAFLD患者(NAFLD組):53名男性,85名女性,年齡35~50歲,平均年齡(43.8±6.1)歲;選擇同期健康體檢者,肝功能正常、經(jīng)B型超聲檢查無(wú)脂肪肝癥狀,且無(wú)飲酒史或飲酒折合乙醇量符合納入或排除標(biāo)準(zhǔn)的人群作為對(duì)照組。129名健康無(wú)NAFLD者為對(duì)照組:50名男性,79名女性,年齡35~51歲,平均年齡(42.7±7.5)歲。兩組年齡、性別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。本研究經(jīng)河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)(批號(hào):20140208),所有研究對(duì)象均簽署知情同意書(shū)。
所有入選的對(duì)象均記錄性別、年齡、身高、體質(zhì)量、腰圍,腰圍有固定人員應(yīng)用非彈性軟尺測(cè)量,測(cè)量位置在髂前上嵴與最低肋骨連線中點(diǎn)處,檢測(cè)空腹(空腹12 h)血脂、血糖,抽血待查CRP、IL-6及omentin-1、vaspin的水平。
(一)肝臟B超檢查 由固定的、有經(jīng)驗(yàn)的超聲醫(yī)師應(yīng)用Elegra-Siemens公司(德國(guó))的B超儀扇形探頭(3.5~5.0 MHz)進(jìn)行檢查。參照《非酒精性脂肪性肝病診療指南》中NAFLD的B超診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷[4]。
(二)血生化參數(shù)的檢測(cè) 于上午8時(shí)空腹采取靜脈血查血糖(FBG)、總膽固醇(TCH)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST),均在本院臨床檢驗(yàn)中心采用全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó),型號(hào):BHBMD1600)檢測(cè)。
(三)測(cè)定CRP、IL-6 抽取肘靜脈血4 mL,注入干燥試管,4 ℃,3 000 r/min離心15 min,分離血漿-80 ℃保存待測(cè)CRP、IL-6,高靈敏度濁度法測(cè)定,單位mg/L。
(四)omentin-1、vaspin的測(cè)量 抽肘靜脈血8 mL,注入加有10%乙二胺乙酸二鈉30 μL及抑肽酶40 μL抗凝劑的試管中,混均,4 ℃,3 000 r/min離心15 min,分離血漿-80 ℃保存,待測(cè)omentin-1、vaspin。通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)量(上海晶天生物科技有限公司),單位均為ng/mL,嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
NAFLD組和對(duì)照組比較,腰圍(WC)、體質(zhì)指數(shù)(BMI)、空腹血糖、膽固醇、LDL-C、TG差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。年齡、性別、HDL-C、ALT、AST差異沒(méi)有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表1。
表1 NAFLD組和對(duì)照組臨床特征比較
NAFLD組IL-6(117±8.2)高于對(duì)照組(103±9.1),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.01),NAFLD組CRP中位數(shù)(四分位間距)為3.1(1.0~9.3)mg/L,顯著高于對(duì)照組1.1(1.0~6.9)mg/L;omentin-1中位數(shù)(四分位間距)1.6(0.5~7.5)ng/mL低于對(duì)照組2.8(0.4~7.5)ng/mL;vaspin水平中位數(shù)(四分位間距)2.1(0.7~6.3)ng/dL高于1.0(0.2~7.3)ng/dL,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z值-2.935~-1.605,P值0.003~0.03)。詳見(jiàn)表2。
表2 兩組IL-6、CRP、omentin-1和vaspin的比較[中位數(shù)(四分位間距)]
Vaspin水平分別與腰圍、LDL-C、CRP、IL-6成正比(r值分別為0.335,0.231,0.341,0.285,均P<0.05);與HDL-C、omentin-1呈負(fù)相關(guān)(r值分別為-0.221,-0.246,均P<0.05)。血清omentin-1水平與腰圍、CRP、IL-6呈負(fù)相關(guān)(r值為別-0.250,-0.238,-0.319,均P<0.05),與HDL-C呈正相關(guān)(r=0.326,P<0.05)。
NAFLD為因變量,以omentin-1、vaspin、腰圍、BMI、空腹血糖、總膽固醇、HDL-C、LDL-C、CRP、IL-6為自變量進(jìn)行Logistic回歸分析,結(jié)果表明omentin-1、vaspin、腰圍、CRP、IL-6為患者發(fā)生NAFLD的獨(dú)立相關(guān)因素[β值分別為1.896,1.471,2.012,2.971,1.984,2.0982,OR值(1.021~3.012),95%CI(1.431~4.979),均P<0.05]。
本研究探索了NAFLD患者omentin-1、vaspin血清水平,并與健康組對(duì)照研究,評(píng)估了這些脂肪因子與患者的IL-6、CRP關(guān)系。
研究認(rèn)為,NAFLD是代謝綜合征的組成部分,轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)正常的NAFLD,是NAFLD的早期階段,與胰島素抵抗合并的糖脂代謝紊亂密切相關(guān)[5]。本實(shí)驗(yàn)中,NAFLD組與正常對(duì)照組比較,體質(zhì)指數(shù)、腰圍、空腹血糖、三酰甘油、總膽固醇、LDL-C的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,HDL-C、ALT、AST差異沒(méi)有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,也支持上述觀點(diǎn)。
研究顯示,omentin-1與肥胖、IR等代謝紊亂呈負(fù)相關(guān)性[3.6]。Omentin-1通過(guò)抑制胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶/NF-κB通路活性,降低炎癥細(xì)胞誘導(dǎo)的內(nèi)皮黏附分子的表達(dá)。因此,omentin-1還具有抗炎,抗動(dòng)脈粥樣硬化作用[7]。本研究發(fā)現(xiàn),NAFLD組與對(duì)照組相比,omentin-1較低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血清omentin-1水平與腰圍、CRP、IL-6呈負(fù)相關(guān),與HDL-C呈正相關(guān),腰圍、IL-6、CRP是omentin-1水平下降的影響因素,HDL-C是omentin-1水平升高的危險(xiǎn)因素,也符合上述觀點(diǎn)。國(guó)外研究[8]報(bào)道omentin-1與NAFLD的發(fā)生密切相關(guān),是NAFLD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,與本研究發(fā)現(xiàn)omentin-1是NAFLD發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素相一致。本研究發(fā)現(xiàn)血清omentin-1水平與BMI無(wú)關(guān),omentin-1與腰圍呈負(fù)相關(guān),表明在表述身體脂肪分布方面,腰圍比BMI可能更好些。Omentin-1的血清水平與NAFLD患者的HDL-C水平呈正相關(guān),提示omentin-1可能是NAFLD發(fā)生的保護(hù)因素。
對(duì)經(jīng)肝穿刺證實(shí)的NAFLD患者研究發(fā)現(xiàn),血清vaspin水平明顯升高,是NAFLD患者肝細(xì)胞纖維化程度的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素[9-10]。血清vaspin水平升高,且vaspin水平與超聲診斷下的肝臟脂肪變性嚴(yán)重程度及肝內(nèi)脂肪含量呈正相關(guān)[11]。本研究中,與健康對(duì)照受試者相比,NAFLD患者的vaspin濃度更高。血清vaspin與腰圍和LDL呈正相關(guān)。Vaspin是NAFLD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,說(shuō)明vaspin可能是NAFLD發(fā)生的預(yù)測(cè)因子。
IL-6可誘導(dǎo)肝臟合成CRP,還可刺激肝臟分泌極低密度脂蛋白,導(dǎo)致高三酰甘油血癥,TNF-α和IL-6可參與調(diào)節(jié)其他脂肪因子的分泌[6,12]。本研究發(fā)現(xiàn)vaspin分別和IL-6、CRP呈正相關(guān),omentin-1與CRP、IL-6 呈負(fù)相關(guān),說(shuō)明了NAFLD可能與慢性炎癥有關(guān)。推測(cè)omentin-1、vaspin在NAFLD患者體內(nèi)表達(dá)可能受到IL-6、CRP炎癥因子的影響。隨著人脂肪含量(尤其是內(nèi)臟脂肪含量)增多,游離脂肪酸脂解增強(qiáng),TNF-α、IL-6、CRP等炎癥因子表達(dá)增強(qiáng),致使機(jī)體處于慢性炎癥狀態(tài),omentin-1表達(dá)由于受到炎癥因子的抑制,其表達(dá)水平降低,抗炎作用減弱,致使機(jī)體慢性炎癥持續(xù)存在,并逐漸加重,進(jìn)而促進(jìn)NAFLD的發(fā)生,而vaspin則因?yàn)檠装Y因子的作用,表達(dá)增加,促進(jìn)了NAFLD的發(fā)生[13]。
NAFLD患者omentin-1、vaspin、IL-6、CRP和健康組不同。Vaspin可能是NAFLD發(fā)生的預(yù)測(cè)因子,而omentin-1可能是預(yù)防NAFLD發(fā)生的保護(hù)性因子。其機(jī)制可能與炎癥因子有關(guān),具體機(jī)制需進(jìn)一步研究。