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        慢性乙型肝炎患者血清可溶性E-鈣黏蛋白表達與氧化應激的相關性分析

        2021-02-05 11:39:14許俊謝國艷黃敏
        肝臟 2021年1期
        關鍵詞:氧化應激血清水平

        許俊 謝國艷 黃敏

        研究表明,與健康人相比,HBV相關的肝癌(HCC)患者會出現(xiàn)過度的氧化應激[1]。然而,氧化應激在HBV相關疾病中的病理生理相關性仍有待闡明。CDH1基因編碼的E-鈣黏蛋白(E-cadherin)可以與核轉錄因子-kB(NF-kB)結合,從而防止NF-kB核定位[2]。同時,促炎細胞因子白細胞介素-1和腫瘤壞死因子-α等介導的E-cadherin表達降低,并減弱E-cadherin介導的langerhans細胞與角質形成細胞的粘附[3]。E-cadherin可以被蛋白酶分解,從而釋放出胞外N端可溶性片段,稱為可溶性E-cadherin(soluble E-cadherin,sE-cadherin)。既往研究認為,sE-cadherin只能作為非功能性肽發(fā)揮作用[4]。同時,sE-cadherin可能是導致HBV相關肝病發(fā)生和發(fā)展的細胞因子之一,HCC患者的sE-cadherin水平明顯高于健康個體[5]。本研究評估了CHB患者血清sE-cadherin水平和體內氧化應激的相關性,進一步揭示CHB的發(fā)病機制。

        材料與方法

        一、研究對象

        研究對象為2018年1月至2019年12月在上海新華醫(yī)院崇明分院診斷為HBsAg陽性54例患者,入組前6個月內未接受抗病毒治療。根據(jù)CHB的嚴重程度分為輕度16例,中度20例和重度18例,所有患者均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015年更新版)》的診斷標準[6]。排除合并有慢性丙型肝炎、酒精性肝病、自身免疫性肝病、代謝性肝病及藥物濫用者。選擇同期健康體檢者20名作為對照組。本研究根據(jù)《赫爾辛基宣言》的原則進行,并獲得醫(yī)院醫(yī)學倫理學委員會批準,所有研究對象簽署知情同意書。

        二、標本的采集和測定

        采集所有研究對象空腹靜脈血6 mL,分兩管。一管離心后分離血清,采用Au480全自動生化分析儀(日本Olympus公司)測定血清中AST和ALT,然后用采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(試劑盒購于美國Quidel公司)檢測血清中sE-cadherin、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和NADPH氧化酶2(NADPH oxidase 2,NOX2),操作方法按說明書進行;采用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)測定試劑盒(WST-1法)測定血清SOD濃度(試劑盒購于南京建城生物工程研究所)。另一管加入1 mL TRIzol 后-80 ℃保存?zhèn)溆谩2捎脤崟r熒光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR,RT-PCR)測定血漿中HBV DNA的水平。HBV DNA<2.0×103拷貝/mL為陰性。

        三、統(tǒng)計學分析

        采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件。計量資料以均數(shù)±標準差表示,比較采用方差分析;計數(shù)資料以例數(shù)表示,比較采用χ2檢驗;進行Pearson分析;采用二分類Logistic回歸分析探討重度CHB的影響因素,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

        結 果

        一、研究對象一般臨床資料比較

        各組研究對象的年齡和性別之間,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);與對照組比較,各CHB組患者血清中AST、ALT、sE-cadherin、MDA、NOX2和HBV DNA增加,GSH和SOD濃度降低,且隨著病情的加重呈相應的變化,差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。見表1。

        表1 研究對象一般臨床資料比較(±s)

        二、sE-cadherin與肝功能指標的相關性分析

        血清中sE-cadherin與AST、ALT及HBV DNA呈正相關(r=0.591、0.538、0.675,P<0.05)。

        三、sE-cadherin與氧化應激指標的相關性分析

        血清中sE-cadherin與GSH和SOD 呈負相關(r=-0.499、-0.492,P<0.05),與MDA和NOX2呈正相關(r=0.527、0.458,P<0.05)。

        四、CHB嚴重程度的影響因素

        將sE-cadherin、AST、ALT、HBV DNA、GSH、SOD、MDA和NOX2是否為重度CHB作為因變量進行多因素分析,結果sE-cadherin、HBV DNA和NOX2是重度CHB的影響因素(P<0.05)。見表2。

        表2 Logistic回歸分析CHB嚴重程度影響因素

        討 論

        越來越多的證據(jù)表明,血清sE-cadherin水平升高可能與全身炎癥反應的嚴重程度以及多器官衰竭有關[7]。重癥急性胰腺炎患者血清中sE-cadherin濃度高于輕度急性胰腺炎患者,同時,sE-cadherin濃度與炎癥和器官損傷的標志物成正比[8]。研究顯示,sE-cadherin在肝炎組織中高表達,并且與炎癥活動程度甚至肝纖維化相關,但尚無研究CHB患者中sE-cadherin與氧化應激之間的關系[9]。AST和ALT可以作為HBV誘導的肝臟炎癥和疾病進展的標志物[10]。本研究中,CHB患者的sE-cadherin濃度高于對照組,并且sE-cadherin水平與AST和ALT的水平呈正相關。血清中的HBV DNA水平與肝臟疾病的進展和組織病理學分級之間密切相關[11]。本研究結果顯示sE-cadherin與HBV DNA水平呈正相關。因此,sE-cadherin對慢性HBV感染的臨床預后具有預測價值。

        HBV介導的ROS可以誘導慢性感染和炎癥,從而導致嚴重的肝臟疾病[12]。研究證實,脂質氧化與HBV相關疾病的進展有關,MDA、GSH和SOD由于其穩(wěn)定性而通常被用作脂質氧化標志物[13]。NOX2是人類呼吸道合胞病毒誘導的NF-κB抑制蛋白(IκBα)磷酸化過程中的重要調節(jié)劑,可抑制甲型流感病毒的復制,進而改善由甲型流感病毒引起的肺部炎癥反應[14]。重要的是,血清NOX2是HBV相關并發(fā)癥進展的一個重要指標。本研究中,CHB患者的GSH和SOD水平低于健康者,與sE-cadherin呈負相關;CHB患者的MDA和NOX2高于健康者,與sE-cadherin呈正相關;同時,sE-cadherin對CHB嚴重程度具有診斷價值。

        綜上所述,CHB患者血清中sE-cadherin濃度升高,sE-cadherin與氧化應激呈正相關,可能是導致CHB相關肝病發(fā)生和發(fā)展的細胞因子之一。

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