趙靜

（遼寧省遼陽市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽 111000）

微生物是形體微小、數(shù)量繁多、肉眼看不見且廣泛存在于自然界的低等生物體，需借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、上千倍才能觀察到，可分為非細(xì)胞型微生物、真核細(xì)胞型微生物、原核細(xì)胞型微生物。醫(yī)院微生物檢驗(yàn)科主要負(fù)責(zé)病原微生物的檢驗(yàn)、病原學(xué)鑒定，采集痰液標(biāo)本、血液標(biāo)本、尿液標(biāo)本、糞便標(biāo)本、化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本等，經(jīng)過細(xì)菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)及一般細(xì)菌涂片、真菌涂片、結(jié)核菌涂片等，可研究病原體的特征，提供快速準(zhǔn)確的診斷結(jié)果，可指導(dǎo)合理應(yīng)用抗生素、有效控制醫(yī)院感染發(fā)生[1-2]。臨床微生物標(biāo)本采集、送檢過程中嚴(yán)格遵守規(guī)范是保證微生物診斷質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)，否則會(huì)嚴(yán)重影響致病菌分離培養(yǎng)的陽性率[3]。鑒于此，本研究旨在探討不同時(shí)段臨床標(biāo)本微生物檢驗(yàn)陽性率的結(jié)果差異，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2017 年1 月至2018 年1 月本院未全面落實(shí)微生物檢驗(yàn)規(guī)范階段的500份微生物檢驗(yàn)標(biāo)本作為A時(shí)段研究對(duì)象，包括104份痰液標(biāo)本（20.80%）、115份尿液標(biāo)本（23.00%）、144 份血液標(biāo)本（28.80%）、67 份膿液標(biāo)本（13.40%）、48 份腦脊液標(biāo)本（9.60%）、22 份糞便標(biāo)本（4.40%）。2018年2月至2019年2月本院全面落實(shí)微生物檢驗(yàn)規(guī)范階段的500 份微生物檢驗(yàn)標(biāo)本作為B 時(shí)段研究對(duì)象，包括107 份痰液標(biāo)本（21.40%）、111 份尿液標(biāo)本（22.20%）、134 份血液標(biāo)本（26.80%）、78 份膿液標(biāo)本（15.60%）、45 份腦脊液標(biāo)本（9.00%）、25份糞便標(biāo)本（5.00%）。2個(gè)時(shí)間段各類標(biāo)本資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 方法 ①微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集遵守一般原則，包括早期采集、無菌采集、根據(jù)目的菌的特性采用不同的采集方法、采集適量標(biāo)本及安全采集。②微生物檢驗(yàn)儀器為L(zhǎng)ABSTAR50 全自動(dòng)血液細(xì)菌培養(yǎng)儀（長(zhǎng)沙滕健醫(yī)療器械有限公司）、TDR-300Bplus 自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)細(xì)菌鑒定儀（北京中西遠(yuǎn)大科技有限公司），由經(jīng)驗(yàn)豐富的專業(yè)檢驗(yàn)醫(yī)師進(jìn)行微生物標(biāo)本檢驗(yàn)操作，操作應(yīng)嚴(yán)格按照儀器使用說明。③血液標(biāo)本采集時(shí)成人、兒童采血量分別為5、3 mL，將血培養(yǎng)瓶放入血液細(xì)菌培養(yǎng)儀，儀器將自動(dòng)旋轉(zhuǎn)并對(duì)血培養(yǎng)瓶進(jìn)行培養(yǎng)，并以10 min 為周期動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)瓶，若發(fā)現(xiàn)陽性瓶則自動(dòng)報(bào)警并在主程序界面該培養(yǎng)瓶位置號(hào)上顯示為紅色，持續(xù)培養(yǎng)5 d后，無微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)瓶，系統(tǒng)自動(dòng)報(bào)警并在主程序界面該培養(yǎng)瓶位置號(hào)上顯示為綠色。④尿液標(biāo)本應(yīng)在使用抗菌藥物前采集晨起后第1次尿液的中段尿，若懷疑有厭氧菌感染則標(biāo)本采集使用膀胱穿刺法，排尿困難者通過導(dǎo)尿采集尿液標(biāo)本；糞便標(biāo)本采集在患者自然排便后，選取3～5 g有黏液、膿血的糞便并置于無菌容器內(nèi)；痰液標(biāo)本應(yīng)采集3～5 mL晨痰且采集前患者需反復(fù)漱口，痰液標(biāo)本性狀應(yīng)為褐色血痰、干酪痰、黏液痰或含有少量新鮮血液的血痰；腦脊液采集方法主要有腦室穿刺術(shù)、腰椎穿刺術(shù)、小腦延髓池穿刺術(shù)，采集1～3 mL 腦脊液置無菌管內(nèi)立即送檢；膿液標(biāo)本需要患者具有采集的癥狀及疾病指征，采集方法分為開放性膿腫采集法、閉鎖膿腫采集法、燒傷傷口采集法、膿皰或水皰采集法、厭氧菌感染采集法等，注意采集前病灶局部避免使用消毒劑或抗菌藥物，且采集標(biāo)本除膿液外應(yīng)含有病灶部位的組織標(biāo)本，開放性傷口采集標(biāo)本前需先清創(chuàng)，去除表面菌群；閉鎖膿腫采集標(biāo)本前需常規(guī)消毒取樣部位皮膚，使用無菌注射器抽取膿液送檢；水皰和膿皰則常規(guī)消毒后用針頭挑破，無菌拭子采集皰液和基底部組織；厭氧菌感染采集標(biāo)本時(shí)使用針筒直接抽取病灶處的標(biāo)本，置于厭氧運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)送檢，注意避免接觸空氣。

1.3 觀察指標(biāo) ①尿液、痰液、腦脊液、糞便及膿液標(biāo)本檢測(cè)使用全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)細(xì)菌檢定儀，通過熒光檢測(cè)技術(shù)及計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)工作站，自動(dòng)進(jìn)行致病菌鑒定并判讀鑒定結(jié)果。②統(tǒng)計(jì)分析2個(gè)時(shí)間段內(nèi)各類微生物標(biāo)本的檢驗(yàn)報(bào)告，比較2個(gè)時(shí)間段各類標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果陽性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2 個(gè)時(shí)段的糞便標(biāo)本陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；B時(shí)段血液標(biāo)本、尿液標(biāo)本、腦脊液標(biāo)本陽性率均高于A時(shí)段，痰液標(biāo)本、膿液標(biāo)本陽性率均低于A 時(shí)段，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩時(shí)間段微生物檢驗(yàn)標(biāo)本陽性率比較

3 討論

我國(guó)由于藥物濫用、新藥少、院內(nèi)傳播等原因，微生物耐藥率較高，直接導(dǎo)致抗感染治療形勢(shì)嚴(yán)峻，臨床醫(yī)生面對(duì)疑似感染性疾病，存在是否該用抗生素、什么時(shí)候用、用什么藥和什么劑量及何時(shí)停藥的難題。我國(guó)衛(wèi)生部于2012 年發(fā)布了《抗菌藥物臨床應(yīng)用管理辦法》[4]，明確指出醫(yī)療機(jī)構(gòu)在臨床微生物標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果未出具前，可根據(jù)當(dāng)?shù)睾捅緳C(jī)構(gòu)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)情況經(jīng)驗(yàn)選用抗菌藥物，在臨床微生物標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果出具后應(yīng)根據(jù)檢測(cè)結(jié)果合理選用、調(diào)整抗菌藥物。

臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)方法較多，主要有涂片檢查法、培養(yǎng)與鑒定法、免疫法、分子生物學(xué)法等，可靠的檢驗(yàn)結(jié)果可指導(dǎo)臨床診斷、治療，為臨床科學(xué)用藥、控制感染提供依據(jù)。而微生物標(biāo)本的采集、保存、送檢等過程如操作不當(dāng)，將直接影響微生物培養(yǎng)鑒定結(jié)果，錯(cuò)誤的檢驗(yàn)結(jié)果將影響醫(yī)生的判斷，進(jìn)而導(dǎo)致誤診、漏診等情況，延誤患者治療的最佳時(shí)機(jī)，因此，加強(qiáng)控制微生物標(biāo)本檢驗(yàn)質(zhì)量是提高醫(yī)院診療水平的重要保證[5-6]。自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)細(xì)菌鑒定儀集數(shù)字、信息、計(jì)算機(jī)以及自動(dòng)化分析為一體，采用標(biāo)準(zhǔn)化的配套鑒定，可準(zhǔn)確快速的對(duì)數(shù)百種常見的致病菌進(jìn)行自動(dòng)分析鑒定[7]。本研究結(jié)果顯示，2 個(gè)時(shí)段的糞便標(biāo)本陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；B時(shí)段血液標(biāo)本、尿液標(biāo)本、腦脊液標(biāo)本陽性率高于A時(shí)段，痰液標(biāo)本、膿液標(biāo)本陽性率低于A時(shí)段，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。分析原因可能在于，全面落實(shí)微生物檢驗(yàn)規(guī)范時(shí)間段，微生物標(biāo)本檢驗(yàn)過程依據(jù)衛(wèi)生部醫(yī)政司頒布的《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》，在標(biāo)本的采集、保存、運(yùn)送過程、檢驗(yàn)過程都有嚴(yán)格規(guī)定，避免因采集方法不當(dāng)、采集量不足、標(biāo)本保存不當(dāng)、較長(zhǎng)時(shí)間未送檢等因素對(duì)標(biāo)本質(zhì)量的影響，確保微生物標(biāo)本檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性[8]。

綜上所述，分析不同時(shí)段臨床微生物標(biāo)本檢驗(yàn)的陽性率，可了解微生物標(biāo)本的質(zhì)量情況，進(jìn)而為微生物標(biāo)本檢驗(yàn)質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。