夏麗芳，何 倩，王 鑫，宋茜茜，張月娥，李志紅△

(1.河北省保定市第一中心醫(yī)院內(nèi)分泌二科 017000;2.河北省蠡縣醫(yī)院內(nèi)三科 071400;3.河北省保定市第一中心醫(yī)院內(nèi)分泌科 017000;4.河北省保定市第一中心醫(yī)院康復二科 017000)

高尿酸血癥(hyperuricemina，HUA)是嘌呤代謝障礙引起的代謝性疾病。調(diào)查顯示，我國不同地區(qū)HUA患病率為5.0%～23.5%，預計在未來10～20年，HUA將成為僅次于糖尿病的第二大內(nèi)分泌代謝性疾病，因此對HUA進行深入研究意義重大[1]。亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolatereductase，MTHFR)定位于人類第1染色體短臂，是葉酸代謝中一個重要的酶，MTHFR C667T基因位點突變可降低葉酸代謝關(guān)鍵酶的活性[2]。趙欣等[3]報道，葉酸可通過上調(diào)過氧化物酶體增殖物激活受體γ的表達，促進人脂肪間充質(zhì)干細胞成脂分化，影響肥胖的發(fā)生。且一項大型研究[4]發(fā)現(xiàn)，肥胖患者發(fā)生HUA的概率較高。故推測MTHFR C667T基因多態(tài)性可能與肥胖患者發(fā)生HUA有關(guān)，但目前關(guān)于三者間關(guān)系的報道較少。本研究選取136例HUA患者，研究MTHFR C667T基因多態(tài)性對肥胖患者HUA發(fā)生風險的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2019年8月保定市第一中心醫(yī)院收治的136例HUA患者(HUA組)及體檢中心150例健康人群(對照組)作為研究對象。HUA組均符合HUA的診斷標準[5]：連續(xù)2次空腹血尿酸水平檢測，男性大于420 μmol/L，女性大于360 μmol/L，且均為漢族人群，相互間不存在血緣關(guān)系。排除合并造血系統(tǒng)疾病者，由藥物、腫瘤、銀屑病、腎臟疾病、肝臟疾病及飲食等因素導致的繼發(fā)性HUA患者，妊娠期患者，合并精神疾病者，近期曾服用降尿酸藥物者。本研究獲得保定市第一中心醫(yī)院倫理委員會審核批準，所有患者對本研究均知情同意，并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1資料收集

收集研究對象性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、空腹血糖(GLU)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)等資料。

1.2.2MTHFR C667T基因型檢測

使用PCR-芯片雜交法MTHFRC667T基因檢測試劑盒，按杭州開泰生物技術(shù)有限公司血液基因組DNA提取試劑盒說明書，提取和純化DNA。PCR擴增，PCR反應(yīng)條件：94 ℃ 5 min，94 ℃ 25 s，56 ℃ 25 s，72 ℃ 25 s，共35個循環(huán)，最后72 ℃后延伸5 min，雜交顯色。反應(yīng)結(jié)束后取出芯片，放入生物芯片識讀儀(上海百傲科技有限公司，BE-3.0)中，用Baio Array Doctor V2.0軟件進行圖像掃描與數(shù)據(jù)分析，輸出MTHFR 3種基因型：667CC、667CT、667TT。

1.3 觀察指標

(1)比較兩組年齡、性別、舒張壓、飲酒史、吸煙史等一般資料；(2)比較兩組MTHFR C667T基因型頻率及等位基因頻率分布；(3)分析影響HUA發(fā)生的因素；(4)比較兩組不同BMI患者分布；(5)分析MTHFR C667T基因型與肥胖對HUA發(fā)生風險的交互作用。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結(jié) 果

2.1 兩組一般資料比較

兩組年齡、性別、舒張壓、飲酒史、吸煙史、GLU、TC、TG、BUN、Cr、合并糖尿病、心臟病、高血壓比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；HUA組BMI、收縮壓、高脂血癥患者占比較對照組高(P<0.05),見表1。

表1兩組一般資料比較

續(xù)表1兩組一般資料比較

2.2 兩組MTHFR C667T基因型頻率及等位基因頻率分布比較

對照組MTHFR C667T位點基因型分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗(P=0.80)。HUA組TT基因型頻率、T等位基因頻率均較對照組高(P<0.05)，見表2。

表2 比較兩組MTHFR C667T基因型頻率 及等位基因頻率分布[n(%)]

2.3 HUA發(fā)生的影響因素分析

以是否發(fā)生HUA為因變量，以BMI、收縮壓、高脂血癥等為自變量進行多因素分析發(fā)現(xiàn)，高BMI、高收縮壓、高脂血癥、基因型TT、等位基因T是HUA發(fā)生的危險因素(P<0.05),見表3。

表3 HUA發(fā)生影響因素的logistic多元回歸分析

2.4 兩組不同BMI患者分布比較

根據(jù)《中國成人超重和肥胖癥預防控制指南》[7]中BMI≥28 kg/m2為肥胖，HUA組BMI≥28 kg/m2患者占比高于對照組(P<0.05),見表4。

表4 比較兩組不同體質(zhì)量指數(shù)患者分布[n(%)]

2.5 MTHFR C667T基因型與肥胖對HUA發(fā)生風險的交互作用

BMI≥28 kg/m2時，TT型基因在組間分布比較，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；交互作用分析顯示，S=4.464，RERI=3.040，AP=0.406，見表5。

表5 MTHFR C667T基因型與肥胖對HUA發(fā)生 風險的交互作用

3 討 論

隨著我國人民生活水平的不斷提高，HUA發(fā)病率逐漸遞增，并表現(xiàn)出年輕化趨勢。流行病學調(diào)查顯示，90%的原發(fā)性高血壓患者合并HUA，血尿酸水平每增高59.5 μmol/L，高血壓發(fā)病相對危險增高25%，且HUA亦可增加腦卒中、冠心病等發(fā)病與死亡的風險[8]。但HUA發(fā)病機制尚未完全明了，陳曉波等[9]、林曦陽等[10]研究指出，HUA與高血壓、高血脂有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，除高收縮壓、高脂血癥外，高BMI、TT基因型、T等位基因亦是HUA發(fā)生的危險因素，提示肥胖及MTHFR C667T TT基因型、T等位基因可影響HUA的發(fā)生。

3.1 肥胖與HUA的關(guān)系

超重、肥胖是當今社會常見的一種現(xiàn)象，可引起代謝綜合征。胡夢妍等[11]報道，與健康人群相比，肥胖患者HUA發(fā)生率較高。本研究結(jié)果顯示，HUA組BMI較對照組高(P<0.05)，提示肥胖可能與HUA的發(fā)生有關(guān)。朱冰坡等[12]研究共納入1 363例老年體檢人群，進行單因素與二元logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)在校正年齡后，高脂血癥、肥胖是HUA的獨立危險因素，與本研究結(jié)論一致。尿酸在細胞外的水平取決于尿酸生成的速度和經(jīng)腎臟排出之間的平衡關(guān)系，排泄減少和(或)生成增加，或生成大于排泄，均可出現(xiàn)HUA。從這個角度講，肥胖導致HUA的機制可能為：(1)引起胰島素抵抗，增加腎小管近曲小管對尿酸/Na+的重吸收；(2)可通過激活腎素-血管緊張素系統(tǒng)，導致腎髓質(zhì)缺血，乳酸增加，競爭性抑制尿酸的排泄；(3)降低近端小管泌氨功能，造成尿液酸化，影響尿酸的排泄；(4)可促進黃嘌呤氧化酶的生成，增加尿酸合成量[13-14]。

3.2 MTHFR C667T基因多態(tài)性與HUA的關(guān)系

MTHFR是一種重要的一碳單位代謝酶，至今已發(fā)現(xiàn)近65個多態(tài)性位點，其中C667T是最為常見的突變位點之一[15-16]。KIMI 等[17]研究發(fā)現(xiàn)，血清尿酸水平較高者TT基因型檢出率較高，CC、TT、CT基因型患者血清尿酸水平具有明顯差異，MTHFR C667T基因多態(tài)性可能與HUA有關(guān)。日本的一項研究納入了793例49歲以上人群，發(fā)現(xiàn)血尿酸水平大于或等于7 mg/dL者TT基因型檢出率高于尿酸水平低于7 mg/dL者，并得出HUA與MTHFR 677T等位基因攜帶者之間存在顯著相關(guān)性的結(jié)論[18]。一項Meta分析[19]共納入1 470例患者，進行異質(zhì)性測試后發(fā)現(xiàn)，MTHFR C677T多態(tài)性是HUA的獨立危險因素，支持本研究結(jié)論。MTHFR基因第4外顯子667位點上存在C等位基因和T等位基因多態(tài)現(xiàn)象，分為野生型(CC型)、雜合型突變(CT型)和純合型突變(TT型)3種，C與T對應(yīng)氨基酸殘基分別為丙氨酸和纈氨酸，纈氨酸取代丙氨酸后使MTHFR穩(wěn)定性下降，直接影響MTHFR的活性和耐熱性，其中CT型、TT型人群的酶活性分別降低為CC型的65%和30%，導致由S-腺苷-同型半胱氨酸產(chǎn)生的腺苷優(yōu)先滲入尿酸前體池，使同型半胱氨酸和尿酸的合成相關(guān)聯(lián)，增加了尿酸的來源，且TT型個體常出現(xiàn)全身血管病變、腎血管動脈粥樣硬化等并發(fā)癥，降低了腎臟對尿酸的清除能力，從而誘發(fā)HUA[20-21]。

3.3 MTHFR C667T基因多態(tài)性對肥胖患者高尿酸血癥發(fā)生風險的影響

MAHESH 等[22]研究顯示，MTHFR C667T基因多態(tài)性與較低的高密度脂蛋白(HDL)水平有關(guān)，而HDL主要作用是促進體內(nèi)膽固醇逆化轉(zhuǎn)運，防止外周組織中過多脂質(zhì)堆積?？梢奙THFR C667T基因多態(tài)性與肥胖有關(guān)，結(jié)合上述分析，推測MTHFR C667T基因多態(tài)性與肥胖對HUA的發(fā)生可能存在交互作用。本研究通過分層分析發(fā)現(xiàn)，BMI≥28 kg/m2時，TT型基因在組間分布比較，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，交互作用分析顯示，RERI=3.040，AP=0.406，S=4.464，直接證實兩種因素在HUA的發(fā)生中存在正向交互作用，且在HUA發(fā)病總效應(yīng)中占比為40.60%。但本研究受客觀情況限制，納入樣本量較小，可能造成數(shù)據(jù)的偏倚，且由于本地區(qū)漢族人群較多，故納入漢族人群作為研究對象，而研究結(jié)果是否適用于其他民族的人群，仍需后續(xù)研究進一步完善、驗證。

綜上所述，MTHFR C667T基因TT型純合子突變攜帶增加HUA的風險，MTHFR C667T基因多態(tài)性、肥胖在HUA的發(fā)生中存在正向交互作用。