王石 李智超 郭夏 陶旭煒 周莉 曾凌空

新生兒持續(xù)肺動脈高壓(persistent pulmonary hypertension of the newborn, PPHN)是發(fā)生率較高的新生兒疾病[1-2]。目前臨床診斷PPHN及判斷患兒病情嚴(yán)重程度的金標(biāo)準(zhǔn)是心導(dǎo)管檢查，但因存在某些缺點(diǎn)而無法廣泛應(yīng)用，因此急需尋找到能及時準(zhǔn)確反映PPHN患兒病情嚴(yán)重程度的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)[3-4]。高遷移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein, HMGB1)屬于高遷移率族蛋白超家族，其在膿毒癥、腫瘤疾病、關(guān)節(jié)炎等急、慢性炎癥性疾病發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用[5]。近些年有研究發(fā)現(xiàn)[6-7]，HMGB1與肺動脈高壓(pulmonary arterial hypertension, PAH)的發(fā)生發(fā)展及肺血管重構(gòu)現(xiàn)象均存在密切聯(lián)系。目前尚缺少HMGB1與PPHN的相關(guān)文獻(xiàn)報道，故本研究擬觀察HMGB1在PPHN中的變化，并探討其臨床意義。

資料與方法

一、臨床資料

前瞻性研究本院2017年10月至2019年6月期間住院治療的62例PPHN患兒病例資料，根據(jù)患兒肺動脈收縮壓(pulmonary arterial systolic pressure, PASP)不同分為輕度組(35 mmHg70 mmHg,n=19例)[8]，同期選擇20例正常新生兒作為對照組。本研究方案已通過醫(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)。

二、病例納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

病例納入標(biāo)準(zhǔn)：(1) 所有患兒均符合PPHN相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]；(2) PPHN患兒及正常新生兒臨床資料均完整采集；(3) 患兒家屬均知曉研究內(nèi)容并簽署同意書。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：(1) 合并有房室間隔缺損、法洛四聯(lián)癥等器質(zhì)性心臟病及惡性心律失常的患兒；(2) 合并有炎癥感染反應(yīng)的患兒；(3) 合并有肝腎嚴(yán)重功能障礙、惡性腫瘤疾病及其他系統(tǒng)性疾病的患兒。

三、觀察指標(biāo)

1 血清HMGB1表達(dá)水平檢測：分別采集PPHN患兒及正常新生兒出生時臍靜脈血2 mL，3000 r/min離心10 min后吸取上層血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清HMGB1表達(dá)水平(試劑盒購自德國IBM公司)，由專職檢驗(yàn)科醫(yī)師按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2 PASP及心功能檢測：采用彩色多普勒超聲心動圖儀(購自美國HP公司，型號：HP5500)，超聲探頭頻率為2～4 MHz，分別檢測PPHN患兒及正常新生兒左室射血分?jǐn)?shù)、左室短軸縮短率、右室流出道內(nèi)徑及PASP等指標(biāo)，由專職超聲影像科醫(yī)師進(jìn)行操作。

3 血?dú)庵笜?biāo)檢測：采用動脈血?dú)夥治鰞x分別檢測PPHN患兒及正常新生兒出生時動脈血氧分壓(partial pressure of oxygen, PaO2)、動脈血氧飽和度(pulse oxygen saturation, SpO2)等血?dú)庵笜?biāo)。

四、統(tǒng)計學(xué)分析

結(jié) 果

一、各組PPHN患兒與對照組新生兒臨床資料比較

各組PPHN患兒與對照組新生兒性別、胎齡、出生體重、分娩方式等臨床資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(見表1)。

二、各組PPHN患兒與對照組新生兒血清HMGB1、PASP、血?dú)庵笜?biāo)及心功能比較

各組PPHN患兒血清HMGB1、PASP、右室流出道內(nèi)徑均明顯高于對照組新生兒(P<0.05)，各組PPHN患兒血清HMGB1、PASP、血?dú)庵笜?biāo)及心功能比較均存在明顯差異性(P<0.05)，且隨著病情加重，血清HMGB1、PASP、右室流出道內(nèi)徑明顯升高(P<0.05)，而左室射血分?jǐn)?shù)、左室短軸縮短率、PaO2、SpO2明顯降低(P<0.05)(見表2)。

表1 各組PPHN患兒與對照組新生兒臨床資料比較

表2 各組PPHN患兒與對照組新生兒血清HMGB1、PASP、血?dú)庵笜?biāo)及心功能比較

三、PPHN患兒血清HMGB1與PASP、血?dú)庵笜?biāo)及心功能的相關(guān)性關(guān)系

PPHN患兒血清HMGB1與PASP、右室流出道內(nèi)徑呈正相關(guān)性關(guān)系(P<0.05)，與左室射血分?jǐn)?shù)、左室短軸縮短率、PaO2、SpO2呈負(fù)相關(guān)性關(guān)系(P<0.05)(見表3)。

表3 PPHN患兒血清HMGB1與PASP、血?dú)庵笜?biāo)及心功能的相關(guān)性

討 論

較多的研究認(rèn)為[10-11]，PPHN與肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌間相互作用及肺血管重建等現(xiàn)象均具有密切的聯(lián)系。任何影響因素造成新生兒缺氧，均可激活上述作用機(jī)制，進(jìn)而使得肺血管內(nèi)壓力顯著性升高。當(dāng)PASP>30 mmHg時，即提示患兒存在肺動脈高壓癥狀，故臨床診斷PPHN和判斷患兒病情嚴(yán)重程度的關(guān)鍵為準(zhǔn)確檢測肺動脈壓力[12]。目前心導(dǎo)管技術(shù)是檢測PASP最為直接和準(zhǔn)確的方法，也是醫(yī)務(wù)人員公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn)，但此種方法對患兒可造成一定的創(chuàng)傷，尤其對于病情嚴(yán)重的新生兒而言難以承受[13]。目前臨床多通過彩色多普勒超聲心動圖儀檢測相關(guān)參數(shù)，從而間接獲得PASP以診斷PPHN和判斷患兒病情嚴(yán)重程度，但此種方法需要操作者具有豐富的工作經(jīng)驗(yàn)，且檢測耗費(fèi)時間較長，故應(yīng)尋找及時準(zhǔn)確反映PPHN患兒病情嚴(yán)重程度的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。

PAH的發(fā)病機(jī)制主要為肺固有細(xì)胞合成和釋放促炎癥細(xì)胞因子和炎癥趨化細(xì)胞因子，從而明顯增加血管通透性及白細(xì)胞浸潤程度，大量釋放較多促氧化劑和蛋白水解酶，最終導(dǎo)致肺組織嚴(yán)重?fù)p傷、血管收縮及血栓組織形成[14]。有研究發(fā)現(xiàn)[15]，炎癥性病理過程與PAH的發(fā)生發(fā)展及肺血管重構(gòu)現(xiàn)象有明顯的相關(guān)性，而HMGB1可通過激活活化模式識別受體(pattern-recognition receptors, PRRs)而促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生，故HMGB1大量合成和釋放可導(dǎo)致肺血管重構(gòu)和肺血管阻力顯著性增加。此外，HMGB1還可通過某些炎癥細(xì)胞因子對內(nèi)皮素-1、成纖維細(xì)胞生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子-β等的調(diào)控予以干預(yù)，從而導(dǎo)致肺血管重構(gòu)[16-19]。研究發(fā)現(xiàn)[20]，慢性阻塞性肺病患者血清及痰液中的HMGB1表達(dá)水平明顯高于對照組，提示HMGB1高表達(dá)可誘發(fā)呼吸氣道及肺血管結(jié)構(gòu)的重建現(xiàn)象，最終導(dǎo)致PAH的發(fā)生。由此可知，HMGB1在PAH發(fā)病過程中起著十分重要的作用，是疾病發(fā)病的調(diào)控細(xì)胞因子。但目前尚缺少HMGB1與PPHN的相關(guān)文獻(xiàn)報道，故本研究觀察不同病情嚴(yán)重程度PPHN患兒與正常新生兒血清HMGB1表達(dá)水平，結(jié)果顯示各組PPHN患兒血清HMGB1、PASP、右室流出道內(nèi)徑均明顯高于對照組(P<0.05)，而左室射血分?jǐn)?shù)、左室短軸縮短率、PaO2、SpO2明顯低于對照組(P<0.05)，且隨著病情加重血清HMGB1、PASP、右室流出道內(nèi)徑明顯升高，而左室射血分?jǐn)?shù)、左室短軸縮短率、PaO2、SpO2明顯降低，提示PPHN患兒病情越嚴(yán)重，血清HMGB1表達(dá)水平越高，HMGB1高表達(dá)是導(dǎo)致PPHN發(fā)生的重要作用機(jī)制。采用Pearson法分析PPHN患兒血清HMGB1與其他指標(biāo)的相關(guān)性，結(jié)果顯示PPHN患兒血清HMGB1與PASP、右室流出道內(nèi)徑呈正相關(guān)性關(guān)系(P<0.05)，與左室射血分?jǐn)?shù)、左室短軸縮短率、PaO2、SpO2呈負(fù)相關(guān)性關(guān)系(P<0.05)，提示血清HMGB1與PASP、血?dú)庵笜?biāo)及心功能在判斷PPHN患兒病情嚴(yán)重程度方面均具有較好的臨床價值。

綜上所述，PPHN患兒血清HMGB1與PASP、心功能及血?dú)庵笜?biāo)具有明顯相關(guān)性，可較好反映患兒病情嚴(yán)重程度，具有較好的臨床應(yīng)用價值，但本研究病例數(shù)相對較少，還需繼續(xù)擴(kuò)大樣本量。此外，HMGB1在PPHN發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制仍未研究清楚，還需以后進(jìn)行動物模型等實(shí)驗(yàn)予以探討。