李 巍，翟慢慢，田冬冬

(1鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院，河南 鄭州 450000；2河南省兒童醫(yī)院；3鄭州兒童醫(yī)院)

目前，因ABO血型不符引起的溶血性輸血反應(yīng)(HTR)已很少發(fā)生，但不規(guī)則抗體所導(dǎo)致免疫HTR、新生兒溶血病、交叉配血不和等情況的發(fā)生率仍較高。因此，在臨床輸血前進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查越來(lái)越普及，這有助于選擇相配合的血液進(jìn)行輸注，以保障患者的安全。現(xiàn)就其對(duì)預(yù)防HTR的影響進(jìn)行觀察分析。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析了2019年5月—2020年5月本院輸血科進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查的168例患兒相關(guān)資料(觀察組)，同時(shí)收集2018年4月—2019年4月未行不規(guī)則抗體篩查的160例患兒相關(guān)資料(對(duì)照組)。所有研究對(duì)象臨床資料均完整，有多次輸血史，患兒生命體征穩(wěn)定。排除伴有凝血功能障礙、心臟疾病、肝腎功能?chē)?yán)重障礙的患兒。觀察組：男81例，女87例；年齡4～12歲，平均(8.12±2.12)歲；輸血史0～5次，平均(2.11±0.24)次。對(duì)照組：男75例，女85例；年齡3～13歲，平均(8.09±2.09)歲；輸血史0～5次，平均(2.09±0.26)次。兩組一般資料比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，有可對(duì)比性。

1.2方法 儀器與試劑：抗-A、抗-B、抗-AB、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e血型定型試劑(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)，Banjo血型卡加樣儀(瑞士達(dá)亞美公司)，不規(guī)則抗體篩選紅細(xì)胞(江蘇力博醫(yī)藥生物技術(shù)股份有限公司)，TEG 5000血栓彈力圖分析儀與8Techno型全自動(dòng)血型分析儀(美國(guó)伯樂(lè)公司)，微柱凝膠卡(北京市斑駁斯技貿(mào)有限責(zé)任公司)?？乖到y(tǒng)包括ABO、Rh、Kidd、Duff、MNSs、lewis血型系統(tǒng)抗原。對(duì)照組：參照《臨床輸血學(xué)檢驗(yàn)》進(jìn)行檢測(cè)[1]，遵循常規(guī)流程進(jìn)行輸血：空腹采集患者肘靜脈血32 mL，鹽水凝集法檢測(cè)血型抗原，獲取患者的50μL紅細(xì)胞液，將紅細(xì)胞液與抗A血清、抗B血清各20μL進(jìn)行混合反應(yīng)，當(dāng)反應(yīng)液充分反應(yīng)后接合到反應(yīng)卡上，再次反應(yīng)10 min(37℃環(huán)境)，離心處理，查看結(jié)果，選取同血型的血液進(jìn)行交叉配血，結(jié)果相符后再進(jìn)行輸血。觀察組：其他檢查同對(duì)照組，不規(guī)則抗體篩查：空腹靜脈采血3 mL，并置于抗凝管中，在37℃水浴中處理10 min，以3000 r/min離心5 min，分離血漿待用。在微柱凝膠卡的三個(gè)微柱孔中加入50μL、0.5%～0.8%的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號(hào)抗體篩選細(xì)胞，然后分別將50μL血清加入已標(biāo)記好的凝膠管內(nèi)；37℃反應(yīng)15 min，離心5 min，然后進(jìn)行觀察。若紅細(xì)胞凝聚且懸浮于凝膠柱上方或中間則為陽(yáng)性，無(wú)凝聚且沉于底部為陰性。陽(yáng)性標(biāo)本需進(jìn)行抗體特異性檢測(cè)，并與標(biāo)準(zhǔn)譜細(xì)胞進(jìn)行對(duì)照，若與譜細(xì)胞(1份或數(shù)份)出現(xiàn)凝集而自身紅細(xì)胞不凝集，為特異性抗體；與血漿、自身紅細(xì)胞及所有譜細(xì)胞均凝聚，為非特異性抗體。需排查抗篩陽(yáng)性病例是同種抗體、自身抗體或是干擾因素造成的陽(yáng)性。護(hù)士根據(jù)結(jié)果選擇血型相同、配血符合的血液進(jìn)行交叉配血，并觀察免疫性HTR情況。檢測(cè)時(shí)同時(shí)需考慮可能存在漏檢，如抗-M、抗-N、抗P1、抗-A1、抗-H等，需嚴(yán)格進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.3評(píng)價(jià)指標(biāo) 不規(guī)則抗體的檢出情況，兩組免疫HTR情況。

2 結(jié)果

2.1不規(guī)則抗體的檢出情況 觀察組168例患兒中，檢出陽(yáng)性11例，占6.55%，其中特異性不規(guī)則抗體2例(1例抗e4，1例抗E2)，非特異性9例。其中女性、輸血次數(shù)>3次患兒陽(yáng)性檢出率較高。見(jiàn)表1。

表1 不同患兒不規(guī)則抗體的檢出情況[n(%)]

2.2免疫溶血性輸血不良反應(yīng) 觀察組免疫溶血性輸血不良反應(yīng)發(fā)生率為0.60%(1/168)，對(duì)照組為5%(8/160)。兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.422，P=0.035)。

3 討論

輸血是臨床救治患者常用的手段，但血液成分的復(fù)雜性以及患者個(gè)體之間的差異性易導(dǎo)致輸血不良反應(yīng)，其中HTR是較為嚴(yán)重的不良反應(yīng)之一，可導(dǎo)致發(fā)熱、胸痛、黃疸等，嚴(yán)重者可出現(xiàn)呼吸困難、休克等，嚴(yán)重危及患者的生命安全[2]。不規(guī)則抗體是引起HTR的主要因素之一，該抗體是指除抗-A、抗-B以外的血型抗體，常導(dǎo)致血型鑒定困難、交叉配血、輸血不良反應(yīng)等，一般會(huì)在輸血后1～4周出現(xiàn)，因而常被誤診為隱匿性出血，影響患兒的健康，增加患兒家長(zhǎng)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[3]。目前，篩查不規(guī)則抗體的方法較多，如鹽水介質(zhì)法、凝聚胺法、微住凝膠法等，其中微住凝膠法是一種較新型的血液檢驗(yàn)方法，檢測(cè)較為便捷、敏感且操作簡(jiǎn)單，較常規(guī)檢測(cè)方法更為可靠[4]。本研究使用微住凝膠法進(jìn)行篩查，患兒不規(guī)則抗體陽(yáng)性率為6.55%，其中非特異性規(guī)則抗體相對(duì)較多，提示了在輸血前進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查時(shí)需進(jìn)一步證實(shí)其特異性，保證輸血安全性。由于不規(guī)則抗體屬于免疫蛋白M，適宜反應(yīng)溫度為4～20℃，在麻醉與降溫情況下可發(fā)生不規(guī)則反應(yīng)，且受不同人群、地域的影響，因而非特異性規(guī)則抗體檢出率相對(duì)較多，輸血時(shí)需注意鑒別，配型時(shí)無(wú)相應(yīng)抗原血液，保障輸血安全。此外，本研究結(jié)果顯示，女性、輸血次數(shù)>3次患兒陽(yáng)性檢出率較高。因而，對(duì)于輸血次數(shù)>3次的女性患兒，不規(guī)則抗體篩選及特異性鑒定可采用不含相應(yīng)抗原血液進(jìn)行輸血。此外，本研究中觀察組免疫HTR發(fā)生率低于對(duì)照組。表明了進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查可有效減少HTR發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而保障輸血安全。在常規(guī)血液檢測(cè)中，根據(jù)血型抗原結(jié)果進(jìn)行交叉輸血，但是ABO血型系統(tǒng)外的所有紅細(xì)胞血型抗體多為免疫球蛋白M，因而可導(dǎo)致免疫HTR；此外，妊娠史女性、多次輸血患者發(fā)生HTR的風(fēng)險(xiǎn)較高，需注重不規(guī)則抗體篩查，避免患者輸血時(shí)出現(xiàn)不良反應(yīng)。

綜上所述，在進(jìn)行臨床輸血前，應(yīng)進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，以減少或避免免疫HTR風(fēng)險(xiǎn)，提高臨床輸血安全性。