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        中草藥鹿銜草活性成分的提取分離研究進(jìn)展

        2021-01-19 08:20:04尤子情劉知森曹雨希西楊偉東馬琳
        生物化工 2021年5期
        關(guān)鍵詞:醋酸乙酯鞣質(zhì)柱層析

        尤子情,劉知森,曹雨希西,楊偉東,馬琳

        (寶雞文理學(xué)院,陜西寶雞 721013)

        鹿銜草(Pyrola calliantha H.Andres),又名鹿壽茶、鹿蹄草、破血丹、背金牛草等,為鹿蹄草科植物[1],廣泛分布于我國(guó)江西、安徽、湖南等地[2]?!吨腥A本草》記載,鹿銜草具有補(bǔ)腎、強(qiáng)筋壯骨、祛風(fēng)除濕及收斂止血等功能[3],常用于治療腎虛腰痛、風(fēng)濕麻痹、筋骨萎軟及外傷出血等[4]。由于其對(duì)心血管系統(tǒng)具有強(qiáng)心、降壓和擴(kuò)血管的作用,近年來(lái)引起許多研究人員的關(guān)注,關(guān)于鹿銜草的研究主要集中在其成分、生物活性以及產(chǎn)品開發(fā)上。鹿銜草主要化學(xué)成分包括黃酮、酚苷、醌、鞣質(zhì)和多糖等物質(zhì)[5],本文對(duì)鹿銜草主要化學(xué)成分的提取方法進(jìn)行了總結(jié),以期為鹿銜草的綜合利用提供借鑒依據(jù)。

        1 不同活性物質(zhì)的提取分離

        1.1 黃酮

        鄭紹軍等人[6]采用硅膠柱層析分離,使用氯仿-甲醇梯度洗脫后,進(jìn)行RP-18分離,再用甲醇-水梯度洗脫后,采用Sephadex LH-20分離純化,首次從鹿銜草提取得到木犀草素、苜蓿素和山奈酚。蔡蕊等人[7]采用熱回流法提取鹿銜草中的總黃酮,發(fā)現(xiàn)50%乙醇水溶液的提取效果較好;以1∶25(g∶mL)料液比,超聲45 min,處理1次,提取溫度80 ℃為提取條件時(shí),超聲提取效果最佳;熱回流提取法所得總黃酮含量是超聲提取法的2.15倍。石娟等人[8]采用70%丙酮水溶液高速破碎提取鹿銜草全草,分別使用氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取,減壓蒸餾得到氯仿、醋酸乙酯和正丁醇萃取液,通過分析鑒定出2''-O-沒食子?;鸾z桃苷、金絲桃苷、高熊果酚苷等物質(zhì)。

        1.2 酚苷

        章 蕊 等 人[9]使 用 Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色譜柱成功分離出金絲桃苷、槲皮素-3-O-呋喃阿拉伯糖苷等成分,且分離效果較好,專屬性好。王軍憲等[10]使用70%丙酮水溶液提取鹿銜草全草,分別使用乙醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取并減壓蒸餾得到萃取液,使用Toyopearl HW-40(coarse)進(jìn)行柱層析分離,收集不同濃度的乙醇洗脫液,使用紫外可見分光光度法、高效液相色譜法、核磁共振、元素分析等方法,鑒定得到高熊果酚苷、腎葉鹿蹄草苷和6'-O-沒食子?;咝芄榆盏任镔|(zhì)。

        1.3 醌

        潘微薇等人[11]根據(jù)實(shí)驗(yàn)所得波譜數(shù)據(jù)以及鹿銜草主要成分的理化性質(zhì)分析,利用硅膠柱層析和Sephadex LH-20凝膠柱層析等方法,分離得到鄰甲基苯醌。上海中醫(yī)學(xué)院附屬曙光醫(yī)院中草藥實(shí)驗(yàn)小組[12]通過水煎醇沉法得到鄰甲基苯醌,并通過加入二氧化硫還原得到甲基氫醌,通過初步藥理試驗(yàn)證明其具有廣譜抑菌作用。

        1.4 鞣質(zhì)

        蔡蕊等人[13]采用正交設(shè)計(jì)法,比較了熱回流提取法、超聲提取法和冷浸提取法提取鹿銜草鞣質(zhì)的工藝,得出熱回流提取法中,以水為溶劑、料液比 1∶8(g∶mL)、提取溫度100 ℃、提取3次、每次提取1 h時(shí)效果最優(yōu);超聲提取法中,料液比1∶10(g∶mL)、提取溫度70 ℃、提取1次、每次1 h時(shí)效果最優(yōu);冷浸提取法中,料液比1∶12(g∶mL)、室溫浸提2次、每次18 h時(shí)效果最優(yōu);其中熱回流提取法提取含量更高、效率更優(yōu)。孫文基等人[14]通過乙醇提取法,加入醋酸-醋酸鈉緩沖溶液、甲醇進(jìn)行提取,發(fā)現(xiàn)深紫鹿蹄草中鞣質(zhì)含量最高。

        1.5 多糖

        高丹丹等人[15]使用95%乙醇回流提取2次,每次2 h,得到鹿銜草粗粉后,使用100 ℃水浴回流3次,每次2 h,得到濃縮液,80%醇沉后離心得到鹿銜草多糖。莫正昌等人[16]使用80%乙醇回流提取3次,每次1.5 h,采用硫酸-苯酚法測(cè)定多糖含量為45%。董晶晶等人[17]通過比較水提法、堿提法和酶提法,綜合評(píng)分得出3種提取方法的多糖得率排序?yàn)槊柑岱ǎ舅岱ǎ緣A提法。

        2 結(jié)語(yǔ)

        鹿銜草的主要化學(xué)成分包括黃酮、酚苷、醌、鞣質(zhì)和多糖等物質(zhì),當(dāng)前對(duì)于黃酮類化合物和酚類化合物的提取分離研究較多,且技術(shù)比較成熟,但對(duì)于醌類、鞣質(zhì)和多糖的研究還比較少,工藝也有待進(jìn)一步優(yōu)化。鹿銜草具有抗心律不齊、抑制肺炎球菌等作用,只有進(jìn)一步了解鹿銜草中具體的化學(xué)成分及提取方法,才能更好的開展鹿銜草的藥理研究。

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