龐春潔，張 林

（馬應龍藥業(yè)集團股份有限公司，湖北 武漢 430064）

愈創(chuàng)甘油醚片作為一種祛痰藥類非處方藥藥品，其主要有效成分為愈創(chuàng)甘油醚，臨床應用已有幾十年之久，其化學成分性質較穩(wěn)定[2]。國外很多國家也將該藥作為非處方產品銷售，說明該藥安全性良好。該藥物在臨床中不良反應一般較輕，不影響血壓，血壓維持平穩(wěn)，患者耐受性比較理想，而且用藥方便，市場應用價值較高[2]。在愈創(chuàng)甘油醚片生產過程中，為了保證產品質量，就需要對愈創(chuàng)甘油醚片的有效成分進行測定。愈創(chuàng)甘油醚片目前已收載于國家藥品標準中[3]，過往一般選擇滴定與萃取相結合的方式對愈創(chuàng)甘油醚片的有效成分進行測定，但是該方法的重現(xiàn)性并不理想，而且操作比較繁瑣[4]。本研究選擇高效液相色譜法（HPLC）對愈創(chuàng)甘油醚片有效成分進行測定，操作比較簡單方便，結果準確，具體試驗報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

選擇安捷倫1260型液相色譜儀。北京賽多利斯儀器有限公司的1/10000電子分析天平；昆山超聲儀器有限公司的KQ-500DE型超聲波清洗器。

1.2 試藥

選擇中國藥生物制品鑒定所的愈創(chuàng)甘油醚對照品；乙腈、磷酸、三乙胺分別選擇HPLC級、優(yōu)級純、分析純。

2 方法與結果

2.1 方法

①色譜條件：采用Agilent C18色譜柱，5 μm，150*4.6 mm；流動相選擇磷酸溶液（1%）-三乙胺溶液（1%）-乙腈，35:35:30比例；進樣量設置為10 μl，流速設置為每分鐘1.0 ml，檢測波長設置為273 nm。

②選擇波長：準確稱取愈創(chuàng)甘油醚對照品，并將其加入到流動相內進行溶解，稀釋成每1 ml含25 μg愈創(chuàng)甘油醚的溶液，以分光光度法進行測定，于273 nm波長處出現(xiàn)最大吸收，故將測驗檢測波長定為273 nm。

③考察線性關系：準確稱取0.0105 g愈創(chuàng)甘油醚對照品（經105℃干燥恒重），并將其放置在100 ml量瓶內，通過流動相將其溶解、稀釋到刻度，搖勻并準確取2 μl、4 μl、6 μl、8 μl、10 μl、15 μl、20 μl、30 μl，分別注入到液相色譜儀。縱坐標、橫坐標分別為峰面積、愈創(chuàng)甘油醚量，獲回歸方程A=0.6891C+688.02，r=0.9999，結果顯示愈創(chuàng)甘油醚在0.2～3.0 μg范圍內同色譜色譜面積線性關系比較理想。

④輔料干擾試驗：根據處方量準確稱取0.6 g輔料，放置在50 ml量瓶內，通過流動相將其溶解、稀釋到刻度，然后將其搖勻，進行濾過處理后準確量取2.0 ml續(xù)濾液，放置在50 ml量瓶內，通過流動相將其稀釋到刻度，進樣10 μl，光譜圖分析結果顯示輔料不存在干擾。說明該可方可準確的進行有效成分測定。

⑤穩(wěn)定性測試：選擇試品溶液，放置于室溫下，分別于0、1、2、4、8小時后進行測定，結果顯示峰面積基本未變，RSD為0.22%，結果提示在8小時內樣品均較穩(wěn)定。

⑥精密度試驗：選取線性關系范圍內的溶液，持續(xù)進樣5次，每次10 μl，愈創(chuàng)甘油醚峰面積的RSD為0.25%。結果提示該方法精密度較好，可滿足定量分析的要求。

⑦重復性試驗：稱取6份同一樣品，按上述方法對其含量進行測定，各樣品含量的RSD為0.2%，結果顯示該試驗方式重復性良好。

⑧回收率試驗：根據處方比例對樣品進行配制，分別加入標示量80%、100%、120%的愈創(chuàng)甘油醚，根據上述樣品含量測定方法進行處理，然后對回收率進行計算。

⑨測定樣品含量：選取10片樣品，將其研細，準確稱取相當于0.1 g的愈創(chuàng)甘油醚，放置在50 ml量瓶內，通過流動相將其溶解、稀釋到刻度，搖勻、濾過后準確量取2 ml續(xù)濾液，放置在50 ml量瓶內，選擇流動相將其稀釋到刻度，進樣10 μl，選擇外標法對其含量進行測定。

2.2 結果

2.2.1 回收率結果觀察

經過9次測定，加樣平均回收率為100.03%，RSD為0.39%，具體結果如表1所示。

表1 加樣回收率結果觀察

2.2.2 樣品含量測定結果觀察

采用外標法對樣品含量進行測定，2次測定結果分別為99.7%，99.2%。

3 討 論

游離愈創(chuàng)木酚是愈創(chuàng)甘油醚片常見的一種已知雜質，正常情況均能檢測出該雜質[5-6]。愈創(chuàng)甘油醚同分異構體則是另外一種雜質，但是選擇梯度洗脫，測定所需時間較長。本研究采用HPLC法，Agilent C18色譜柱，流動相選擇磷酸溶液-三乙胺-乙腈溶液，波長273 nm，通過等度洗脫就能有效分開同分異構體，進而明顯縮短測定時間，測定效率明顯提升。除此之外，當所選擇的色譜柱更換廠家品牌后，分離效果依然比較理想。同時在輔料干擾試驗中發(fā)現(xiàn)該測定方法不存在輔料干擾的情況，不影響試驗準確度。由此可以發(fā)現(xiàn)，該方法能對難分離物質進行有效分離，檢測準確，具有較強的可重復性，穩(wěn)定性也比較理想，具有比較顯著的優(yōu)越性。

本研究中結果顯示，該試驗方法加樣回收率達100.03%，RSD:0.39%，愈創(chuàng)甘油醚片有效成份含量測定結果顯示均達99%以上。

綜上所述，選擇HPLC法測定愈創(chuàng)甘油醚片的有效成分穩(wěn)定可靠，準確度高，而且操作簡單方便，在生產過程中可對產品質量進行有效控制。