盧彩霞

（大連金州區(qū)第一人民醫(yī)院內(nèi)分泌科，遼寧 大連 116600）

2 型糖尿病屬于臨床常見(jiàn)疾病，主要多發(fā)于中老年群體，以高血糖為主要特征，患者體內(nèi)過(guò)高的血糖水平可導(dǎo)致機(jī)體心肌細(xì)胞代謝異常，進(jìn)而影響心臟功能，引發(fā)心力衰竭等疾病，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致患者死亡[1]。有研究報(bào)道，2型糖尿病通常存在內(nèi)分泌失調(diào)等情況，可導(dǎo)致患者出現(xiàn)不良反應(yīng)，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量[2]。因此，本研究對(duì)60例2型糖尿病患者的內(nèi)分泌相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，并分析其變化的臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年1月至2019年1月于本院診治的2型糖尿病患者60例為研究組，其中男40例，女20例；年齡29～84 歲，平均（58.7±4.9）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合2型糖尿病相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；對(duì)本研究知情并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重肝腎和造血系統(tǒng)等原發(fā)性疾??；合并嚴(yán)重腦血管疾??；精神疾病患者。另選取40 例本院健康體檢者作為對(duì)照組，其中男24 例，女16 例；年齡31～86歲，平均（58.9±4.8）歲。兩組研究對(duì)象年齡、性別等臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及NK 細(xì)胞檢測(cè)方法 于早晨7：00～8：00 采集所有研究對(duì)象空腹靜脈血2 mL，將其保存于-30 ℃條件下，并于采血后3 h內(nèi)送檢，采用流式細(xì)胞儀測(cè)定其外周血中的CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及NK細(xì)胞百分比，具體檢測(cè)方法為：選擇干凈的試管，將100 μL的抗凝血血加入試管中，然后在各試管中分別加入異硫氰酸熒光素（FITC）-CD3/藻紅蛋白（PE）-CD4及同型對(duì)照各20 μL雙色標(biāo)記單抗試劑[3]。完成上述操作后可輕輕搖晃使其混合均勻，避光15 min 后將其取出，然后加入1 mL 的紅細(xì)胞溶解液，于室溫條件下避光10 min 后，以1 000 r/min 離心5 min，離心完成后去除上清液，在剩余固體中加入0.5 mL 的磷酸鹽緩沖液（PBS）重懸細(xì)胞，并在上述所有步驟完成后置于流式細(xì)胞儀上檢測(cè)，本研究所有操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.2 ACTH、CORT、IL-1β、TNF-α、IL-6 檢測(cè)方法 于早晨采集所有研究對(duì)象的肘靜脈血5 mL，采集完成后將2 mL置于干凈抗凝管中，然后加入EDTA抗凝劑，以3 500 r/min離心10 min，離心完成后取上清保存于-70℃環(huán)境下[4]。采用放射免疫分析法對(duì)所有標(biāo)本進(jìn)行促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）、皮質(zhì)醇（CORT）等指標(biāo)檢測(cè)，另外3 mL血液采用同樣的方法進(jìn)行白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等指標(biāo)檢測(cè)，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.2.3 NE、DA 檢測(cè)方法 采集所有研究對(duì)象空腹靜脈血2 mL，將其放入離心機(jī)中以合適的速率分離血漿和血清后，留下血漿保存于-70 ℃環(huán)境下備用。檢測(cè)時(shí)在血漿中加入同等體積的高氯酸0.1 mol/L，在冰浴中振搖混合90 s后，在冰浴中再次加入高氯酸原液1滴，在冰浴中繼續(xù)混合1.5 min后取出，使用離心機(jī)以1 800 r/min離心20 min，操作完成后取上清液置于微量離心管中，每次取樣10 μL，對(duì)其進(jìn)行去甲腎上腺素（NE）和多巴胺（DA）等指標(biāo)檢測(cè)[5]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用“±s”表示，予以t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，予以χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組神經(jīng)內(nèi)分泌指標(biāo)比較 兩組患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及NK 比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；研究組患者IL-1β、TNF-α、IL-6、NE、DA水平均顯著高于對(duì)照組，ACTH、CORT 水平低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.2 不同性別2型糖尿病患者神經(jīng)內(nèi)分泌指標(biāo)比較 男性與女性患者的血清CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；男性患者的IL-1β、TNF-α、IL-6、ACTH、CORT、NE及DA指標(biāo)與女性患者比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

表1 兩組神經(jīng)內(nèi)分泌指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組神經(jīng)內(nèi)分泌指標(biāo)比較（±s）

指標(biāo)CD4+（%）CD8+（%）CD4+/CD8+NK（%）IL-1β（ng/mL）IL-6（ng/mL）TNF-α（ng/mL）ACTH（ng/mL）CORT（ng/mL）DA（ng/mL）NE（ng/mL）對(duì)照組（n=40）47.1±5.6 29.3±7.2 1.51±0.23 19.2±3.6 0.09±0.03 5.9±1.6 1.1±0.4 17.2±5.9 324.6±18.7 745.6±22.8 563.7±25.9研究組（n=60）38.6±4.9 21.2±5.6 1.98±0.41 10.7±2.9 0.22±0.09 30.4±5.6 1.9±0.7 8.9±3.8 215.9±13.7 1 216.3±29.8 2 408.7±34.6 t值8.023 5 6.313 0 6.585 2 13.025 2 8.802 4 26.906 6 74.438 5 8.563 4 33.534 9 84.681 9 287.601 2 P值0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0 0.000 0

表2 研究組不同性別患者的神經(jīng)內(nèi)分泌指標(biāo)比較（±s）

表2 研究組不同性別患者的神經(jīng)內(nèi)分泌指標(biāo)比較（±s）

指標(biāo)CD4+（%）CD8+（%）CD4+/CD8+NK（%）IL-1β（ng/mL）IL-6（ng/mL）TNF-α（ng/mL）ACTH（ng/mL）CORT（ng/mL）DA（ng/mL）NE（ng/mL）男（n=40）37.3±5.6 22.5±7.8 1.95±0.87 11.5±6.6 0.23±0.11 37.1±15.9 1.8±0.5 8.9±3.3 186.5±27.3 7 594.3±52.9 2 683.4±33.8女（n=20）36.9±5.8 22.4±8.1 1.93±0.88 12.1±6.9 0.19±0.06 32.8±13.7 1.9±0.4 7.8±1.5 189.7±29.6 7 569.5±51.8 2 693.8±39.6 t值0.257 8 0.046 2 0.083 6 0.327 0 1.513 3 1.032 0 0.777 6 1.414 8 0.416 2 1.723 5 1.060 7 P值0.797 5 0.963 3 0.933 6 0.744 8 0.135 6 0.306 4 0.440 0 0.162 5 0.678 8 0.090 1 0.293 2

3 討論

2型糖尿病以高血糖為主要特征，患者長(zhǎng)期處于高血糖狀態(tài)下，會(huì)導(dǎo)致下丘腦-垂體-腎上腺軸活性增強(qiáng)，皮質(zhì)醇分泌增多[6]。皮質(zhì)醇可加速外周組織蛋白質(zhì)分解，增加脂肪分解，從而增加游離脂肪酸、氨基酸和甘油含量，進(jìn)一步提高血糖水平。另外，皮質(zhì)醇可抑制外周組織對(duì)葡萄糖的攝取和利用，使血糖進(jìn)一步升高。因此，糖尿病患者的皮質(zhì)醇高水平狀態(tài)也是導(dǎo)致胰島素分泌相對(duì)不足和血糖進(jìn)一步提高的主要原因。有研究報(bào)道，2型糖尿病患者皮質(zhì)醇分泌顯著高于正常人，低濃度ACTH可促進(jìn)B細(xì)胞增殖，高濃度的ACTH可對(duì)B 細(xì)胞增殖產(chǎn)生抑制作用[7]。本研究結(jié)果顯示，研究組患者血清ACTH 和CORT 顯著低于對(duì)照組，分析其原因可能與神經(jīng)系統(tǒng)分泌的某種物質(zhì)可導(dǎo)致患者早上的ACTH和CORT含量較低有關(guān)。

免疫系統(tǒng)通過(guò)識(shí)別自我和非我，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)作用，使其免受外來(lái)病原體的侵襲，并通過(guò)對(duì)自身抗原的免疫耐受有效防止自身免疫性疾病發(fā)生。因此，為保障機(jī)體內(nèi)環(huán)境平衡，免疫系統(tǒng)具有多方位和多層次的免疫調(diào)控體系。NK 細(xì)胞是一類獨(dú)特的淋巴細(xì)胞群體，占外周血淋巴細(xì)胞的5%～15%，能夠?qū)Σ《靖腥炯澳[瘤細(xì)胞進(jìn)行早期識(shí)別和清除，而且需預(yù)先刺激即可對(duì)病毒感染或惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞實(shí)施攻擊，同時(shí)可調(diào)動(dòng)大多數(shù)細(xì)胞參與[8]。除此之外，NK細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌功能較大，如TNF-α、IFN-γ、GM-CSF和趨化因子等，不僅能夠調(diào)節(jié)早期天然免疫應(yīng)答，而且能夠參與調(diào)節(jié)獲得性免疫應(yīng)答。本研究結(jié)果顯示，研究組患者外周血NK 細(xì)胞數(shù)量顯著少于對(duì)照組，說(shuō)明2型糖尿病患者較易出現(xiàn)自身免疫性并發(fā)癥的情況。

在免疫系統(tǒng)中，B細(xì)胞主要參與體液免疫，T淋巴細(xì)胞主要參與細(xì)胞免疫，是人體重要的免疫細(xì)胞群，CD4+、CD8+是外周血成熟T細(xì)胞的兩個(gè)主要亞群，能夠促進(jìn)其他免疫細(xì)胞的分化和增殖，協(xié)調(diào)細(xì)胞間相互作用[9]。本研究中研究組CD4+、CD8+明顯降低，提示2型糖尿病患者存在自身免疫調(diào)節(jié)功能減弱的情況。CD4+/CD8+比值升高，說(shuō)明2型糖尿病患者具有較為明顯的細(xì)胞免疫功能異常。TNF-α可加重炎癥反應(yīng)；IL-1β是2型糖尿病胰島β細(xì)胞凋亡的重要中介因子；IL-6是調(diào)節(jié)炎性反應(yīng)的主要介質(zhì)，具有刺激細(xì)胞生長(zhǎng)、促進(jìn)細(xì)胞分化和加速急性期蛋白合成的作用[10]。NE和DA屬于單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，可直接影響機(jī)體的行為和情緒等生理活動(dòng)。本研究結(jié)果顯示，研究組患者IL-1β、TNF-α、IL-6、NE和DA等指標(biāo)均高于對(duì)照組，說(shuō)明以上指標(biāo)在糖尿病的發(fā)生發(fā)展中均具有一定的作用。男性與女性2 型糖尿病患者的各指標(biāo)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明2型糖尿病患者的內(nèi)分泌指標(biāo)改變情況與性別無(wú)相關(guān)性。

綜上所述，2 型糖尿病患者各項(xiàng)內(nèi)分泌指標(biāo)改變較大，這些相關(guān)指標(biāo)的改變可導(dǎo)致患者的免疫功能減弱，增加患者并發(fā)癥發(fā)生率。因此，臨床在控制2 型糖尿病的同時(shí)，還應(yīng)注重嚴(yán)密監(jiān)測(cè)患者的內(nèi)分泌指標(biāo)變化，做好免疫功能重建工作，最大限度改善患者預(yù)后。