張洪

摘要：目的：分析抗苗勒氏管激素（AMH）預(yù)測(cè)卵巢儲(chǔ)備功能及卵巢反應(yīng)性的效果。方法：本文隨機(jī)抽取我院于2016年4月-2017年8月收治的93例不孕癥患者為研究對(duì)象。其中，42例患者接受IVF-ET治療。將患者的獲卵數(shù)（5個(gè)）作為分組依據(jù)，將>5個(gè)患者納入正常組，將≤5個(gè)的患者納入卵巢低反應(yīng)組。采集患者靜脈全血標(biāo)本，分離獲得血清檢測(cè)其AMH，并利用RT-PCR對(duì)患者的AMH mRNA進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：患者bAMH與初潮年齡、年齡呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，與竇卵泡數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）;IVF-ET患者卵巢反應(yīng)性與AMH mRNA、AMH有關(guān)（P<0.05）;AMH mRNA與受精卵數(shù)存在相關(guān)關(guān)系，bAMH與獲卵數(shù)呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：AMH用于卵巢儲(chǔ)備功能及卵巢反應(yīng)性預(yù)測(cè)，效果較好。

關(guān)鍵詞：抗苗勒氏管激素;卵巢儲(chǔ)備功能;卵巢反應(yīng)性

【中圖分類(lèi)號(hào)】 R711? ? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A? ? ? 【文章編號(hào)】2107-2306（2021）17--01

前言：目前臨床上預(yù)測(cè)女性卵巢儲(chǔ)備功能、卵巢反應(yīng)性的指標(biāo)數(shù)量較多。其中，AMH作為一種糖蛋白二聚體，其主要產(chǎn)生于女性患者的卵巢顆粒細(xì)胞及小卵泡中[1]。本文將93例不孕癥患者為研究對(duì)象，對(duì)AMH預(yù)測(cè)卵巢儲(chǔ)備功能及反應(yīng)性的效果進(jìn)行分析：

1資料與方法

1.1一般資料

本文隨機(jī)抽取我院于2016年4月-2017年8月收治的93例不孕癥患者為研究對(duì)象?；颊吣挲g26-37歲，平均年齡（32.1±4.2）歲;初潮年齡13-16歲，平均初潮年齡（14.9±1.0）歲。所有患者排卵功能及月經(jīng)周期均正常，且12w內(nèi)均未接受促排卵治療。所有患者中，42例患者接受IVF-ET治療。將患者的獲卵數(shù)（5個(gè)）作為分組依據(jù)，將>5個(gè)患者納入正常組，將≤5個(gè)的患者納入卵巢低反應(yīng)組。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本收集方法

①血清標(biāo)本收集方法。于患者月經(jīng)周期第3d清晨，采集患者3mL靜脈全血;IVF-ET患者，分別于其hCG注射、IVF周期Gn注射以及取卵當(dāng)日清晨，采集空腹患者3mL靜脈全血。與采集血清標(biāo)本2h內(nèi)進(jìn)行離心處理，獲取患者血清，并將其置入三個(gè)0.5mLEP管中。②卵泡液收集方法。IVF-ET患者行長(zhǎng)方案超促排卵，當(dāng)患者直徑高于16mm的卵泡數(shù)量超出3個(gè)時(shí)，肌內(nèi)注射10000IUhCG，等待36h后，去亂兵選出最大卵泡細(xì)胞液，置于-80℃冰箱內(nèi)保存，以備后續(xù)檢查。③顆粒細(xì)胞分離方法。于光學(xué)顯微鏡下，將卵母細(xì)胞周?chē)w粒細(xì)胞團(tuán)剝離下來(lái)，并置于卵泡液中，持續(xù)離心10min，于50%Percoll液中加入離心所得沉淀，仍然按照上述條件進(jìn)行離心，以去除細(xì)胞團(tuán)中的紅細(xì)胞。將界面處的顆粒細(xì)胞層吸出，將其置于0.2g/L膠原酶I型（2倍體積）進(jìn)行消化處理。取細(xì)胞懸液置入50%Percoll液（等量）中離心，以M199培養(yǎng)基洗滌后，運(yùn)用臺(tái)盼藍(lán)染色法確定，此時(shí)細(xì)胞存活率高于75%。經(jīng)純化細(xì)胞種于24孔培養(yǎng)板中，于CO25%、37℃環(huán)境孵箱內(nèi)培養(yǎng)。

1.2.2卵泡液、血清AMH蛋白檢驗(yàn)方法

以37℃恒溫箱融化患者的卵泡液標(biāo)本及血清標(biāo)本。向孔內(nèi)加入待測(cè)樣本、20μl標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)控樣本，并按照100μl/孔分別加入緩沖液。經(jīng)振蕩（每分鐘550-700r）處理后，于室溫條件下持續(xù)孵育1h。按照每次0.5min，持續(xù)5次的方式運(yùn)用洗液進(jìn)行洗板。分別于每孔內(nèi)混入100μl抗體生物素結(jié)合物，按上述條件振蕩并孵育。重復(fù)5次洗板。將混入物更換為酶結(jié)合溶液，重復(fù)振蕩、孵育及洗板。行RT-PCR。用于卵巢顆粒細(xì)胞AMH mRNA的檢測(cè)。

1.3觀察指標(biāo)

觀察不孕癥患者的一般狀況。

觀察IVF-ET患者的AMH相關(guān)性。

觀察不同卵巢反應(yīng)患者的AMH差異。

觀察患者AMH與受精卵數(shù)、獲卵數(shù)的相關(guān)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

通過(guò)SPSS24.0軟件對(duì)不孕癥患者的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。認(rèn)為患者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)為：P<0.05。

2結(jié)果

2.1不孕癥患者的一般狀況

93例不孕癥患者中，竇卵泡數(shù)（AFC）3-13個(gè)，平均（8.2±4.1）個(gè);早卵泡期血清AMH蛋白水平0.2-5.1ng/mL，平均血清AMH水平（1.94±1.37）ng/mL?；颊叩腷AMH與初潮年齡、年齡呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（P<0.05）;bAMH水平與AFC呈正相關(guān)關(guān)系（P<0.05）。

2.2IVF-ET患者的AMH相關(guān)性

AMH mRNA相對(duì)含量與bAMH、FFAMH呈正相關(guān)關(guān)系（P<0.05），結(jié)果如表1所示。

2.3不同卵巢反應(yīng)患者的AMH差異

42例IVF-ET患者中，正常組28例，低反應(yīng)組10例（另外4例為過(guò)反應(yīng)）。兩組患者的bAMH水平、AMH mRNA、FFAMH水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.4AMH與受精卵數(shù)、獲卵數(shù)的相關(guān)性

患者基礎(chǔ)血清AMH水平與獲卵數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系，患者卵巢顆粒細(xì)胞AMH mRNA表達(dá)、卵泡液AMH水平與受精卵數(shù)之間存在相關(guān)性。

3討論

3.1AMH

作為一種糖蛋白二聚物，AMH僅于性腺中表達(dá)。高珊[2]等在研究中證實(shí)，在卵巢儲(chǔ)備功能及卵巢反應(yīng)性預(yù)測(cè)中，AMH的預(yù)測(cè)價(jià)值良好。

3.2AMH在卵巢儲(chǔ)備功能、卵巢反應(yīng)性預(yù)測(cè)中的應(yīng)用

上述研究表明，月經(jīng)周期規(guī)律的女性，其血清AMH水平表達(dá)穩(wěn)定，女性患者bAMH水平與獲卵數(shù)之間呈正相關(guān)關(guān)系。卵巢反應(yīng)性與患者AMH mRNA及AMH存在關(guān)聯(lián)，卵巢反應(yīng)正常患者與低反應(yīng)組患者間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

結(jié)論：醫(yī)院可于卵巢儲(chǔ)備功能及反應(yīng)性預(yù)測(cè)中推行AMH預(yù)測(cè)。

參考文獻(xiàn)：

[1]何藝?yán)?，李蓉，喬? 抗苗勒氏管激素與卵巢儲(chǔ)備及反應(yīng)性相關(guān)研究進(jìn)展[J]. 生殖與避孕，2016，36（08）：653-659.

[2]高姍，趙冬妮，譚季春. 抗苗勒氏管激素評(píng)估卵巢儲(chǔ)備功能的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀[J]. 生殖與避孕，2016，36（08）：648-652.