劉東育 趙洪偉 李麗麗 馬慶慶(通信作者)

563000貴州航天醫(yī)院重癥醫(yī)學科，貴州遵義

慢阻肺可以分為穩(wěn)定期和急性加重期，慢阻肺的主要癥狀是咳嗽、咳痰、喘息、氣短，在穩(wěn)定期患者癥狀比較輕微，藥物治療能有效對病癥進行抑制。而急性加重期就表現(xiàn)在患者短期內(nèi)出現(xiàn)咳嗽加劇，痰多，喘息加重，咳痰呈膿性痰等并且伴隨著發(fā)熱等炎癥癥狀，這就是臨床所說的慢阻肺急性加重期(AECOPD)。AECOPD 的主要原因可以歸結(jié)為感染和空氣污染，其中感染占50%～70%，同時也有大概1/3 的患者找不出致病因。AECOPD 發(fā)作時一般常用藥物或增加常用藥物劑量服藥依然達不到控制病癥的效果。臨床中也常將呼吸困難、咳膿痰等癥狀持續(xù)2 d的病癥判定為急性較重。而因為急性加重期出現(xiàn)的癥狀與很多疾病容易混淆，如肺炎、氣胸、胸腔積液等癥狀有相似之處，所以在臨床中很容易誤診，最終延誤治療，導(dǎo)致病情加重。同時我們知道對于感染的有效抑制使用針對性的抑菌治療，才能對病菌起到抑制作用。所以在使用選擇抗菌藥治療前需確認病菌的類型，再合理適量地運用抗菌藥。AECOPD 患者及時有效的機械通氣可迅速有效改善通氣狀況[1-5]。但AECOPD 主要由下呼吸道感染引起，及早合理使用抗菌藥是控制病情、提早拔管的關(guān)鍵。所以提前進行檢測，先確定再用藥是非常必要的。為滿足試驗要求，本課題選取2017年1月-2019年12月收治的AECOPD 機械通氣患者的下呼吸道痰標本65 份，進行病原菌檢測，現(xiàn)報告如下。

資料與方法

本課題為滿足試驗要求挑選的研究對象全部來自我院2017年1月-2019年12月收治的AECOPD 機械通氣患者的下呼吸道痰標本65 份，男34 例，女31 例；年齡58～89 歲，平均(72.81±6.64)歲。

方法：對于行氣管插管的患者，即刻(第1天)留取深部痰液，用一次性配有標本收集瓶的無菌吸痰管通過氣管插管或者內(nèi)套管進行吸引，然后采集下呼吸道的分泌物，裝入標本收集瓶，并立即送到細菌培養(yǎng)室。對每份標本行常規(guī)痰培養(yǎng)并同時使用LAMP 快速檢測AECOPD 下呼吸道13 種病原體。第5 天后再次留取深部痰液標本送細菌常規(guī)培養(yǎng)及LAMP快速檢測下呼吸道13種病原體。

統(tǒng)計學處理：數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 17.0 軟件處理；配對的計數(shù)資料之間兩兩比較采用McNemarχ2檢驗，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

表1 第1天LAMP法與常規(guī)痰培養(yǎng)法檢測結(jié)果比較(n)

表2 第1天LAMP技術(shù)和培養(yǎng)法對各種病原菌檢出率的比較[n(%)]

結(jié)果

第1天LAMP法與常規(guī)痰培養(yǎng)法檢測結(jié)果比較：LAMP 法的總陽性率為61.5%，高于培養(yǎng)法的38.4%，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=2.067，P＜0.05)。見表1。

第1天LAMP技術(shù)和培養(yǎng)法對各種病原菌檢出率的比較：LAMP 技術(shù)檢測肺炎鏈球菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌、鮑曼不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌的陽性率均高于培養(yǎng)法，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表2。

機械通氣第1 天與第5 天病原菌分析：本組2 個時段檢測的病原菌無明顯差異，痰培養(yǎng)法不同時間檢測出的病原菌比例無統(tǒng)計學差異，與報道相符。LAMP 法第5 天檢出病原菌比例明顯升高，達80%陽性率。LAMP 技術(shù)已可檢測多種病原體，檢出率明顯高于傳統(tǒng)痰培養(yǎng)法。

討論

慢性阻塞性肺疾病是一種慢性氣道炎癥性疾病，是由于慢性支氣管炎，在受到氣流的持續(xù)限制后被診斷為慢阻肺。患有慢阻肺會出現(xiàn)慢性咳嗽，在早晨表現(xiàn)明顯，在夜間也有陣發(fā)性咳嗽，是一種終身性疾病。當病情急性發(fā)作時，會增加痰量，有時還會出現(xiàn)膿性痰，嚴重者可出現(xiàn)氣喘、呼吸困難等癥狀。慢阻肺患者肺功能較差，肺內(nèi)存在慢性炎癥改變。臨床分緩解期和急性加重期。AECOPD 是指慢阻肺患者咳痰喘的癥狀較重，伴或者不伴發(fā)熱。慢阻肺患者肺內(nèi)存在菌群，患者急性加重多因感冒等因素導(dǎo)致免疫力下降。AECOPD是指一種急性起病的過程，其特征為患者呼吸系統(tǒng)癥狀惡化，如呼吸困難、咳嗽、咳痰等癥狀加重，導(dǎo)致需要改變藥物治療。大量研究表明[6-8]，感染是AECOPD的最常見誘因。

痰培養(yǎng)主要是檢查有無致病菌感染。痰液是氣管、支氣管的分泌物或肺泡內(nèi)的滲出物。正常情況下，肺泡、支氣管和氣管可有少量分泌物，當呼吸道黏膜受到刺激時，分泌物增多，痰量也就增多。通過痰液檢測可以發(fā)現(xiàn)許多問題，比如致病菌、寄生蟲、血液等均能反映呼吸道疾病情況。痰培養(yǎng)尤其適用于呼吸道炎癥、支氣管擴張、肺結(jié)核、肺寄生蟲病等的診斷。痰培養(yǎng)迄今仍是臨床上應(yīng)用最普遍的病原學檢測方法。雖然痰培養(yǎng)能提供病原學依據(jù)并指導(dǎo)抗菌藥物治療，然而這種方法存在實驗周期長以及特殊細菌無法測出的不足。

本研究是對診斷AECOPD 進行機械通氣患者不同時段利用LAMP 技術(shù)進行病原體快速診斷體系的研究。LAMP 技術(shù)已經(jīng)檢測多種病原體，檢出率明顯高于傳統(tǒng)痰培養(yǎng)法。本研究針對AECOPD機械通氣患者的下呼吸道常見的13 種病原體設(shè)計引物，利用含LAMP 技術(shù)的基因芯片進行核酸擴增，作為快速、準確的病原體檢測方法，LAMP 檢測技術(shù)可在2 h內(nèi)檢測出感染病原菌，使患者及早得到有效治療，控制病情，提早拔管，縮短ICU住院治療時間。

LAMP 技術(shù)檢測的肺炎鏈球菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌，嗜麥芽窄食單胞菌的陽性率均高于培養(yǎng)法。

LAMP 技術(shù)檢測的病原菌與我院院感科提供的院感病原菌(痰培養(yǎng)及血培養(yǎng)結(jié)果)基本符合。該方法的建立為臨床AECOPD 進行機械通氣患者的下呼吸道感染致病菌檢測，提供了準確快捷實用的新途徑。