王軍華，胡蘋

（1.沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院2017級(jí)11班，遼寧 沈陽(yáng)110034；2.沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院遼寧省過(guò)敏性疾病過(guò)敏原致病機(jī)制研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室）

黃荊 （Vitex negundoLinn.） 為馬鞭草科（Verbenaceae）牡荊屬（VitexL.）植物，在我國(guó)山東、陜西、河南、甘肅、浙江等地均有分布［1－2］。黃荊入藥歷史悠久，在過(guò)去幾十年中，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)黃荊的化學(xué)成分及其藥理活性做了大量的研究，發(fā)現(xiàn)黃荊的化學(xué)成分主要包括萜類、黃酮類、木脂素類，以及多種揮發(fā)性成分，其藥理活性主要涉及抗腫瘤、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗氧化、抗菌、殺蟲等方面［3－7］。黃荊生物活性呈現(xiàn)多樣性，發(fā)掘黃荊的藥用價(jià)值具有十分重要的意義。

1 抗腫瘤作用

黃荊的藥理作用研究中，最廣泛且深入的是黃荊對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用。薛玉珍等［8］以不同濃度（1.0、10.0、100.0μg／ml）黃荊乙酸乙酯提取物（EVn－50）作用于體外培養(yǎng)的人宮頸癌Hela細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)隨著EVn－50的濃度不斷提高，EVn－50作用Hela細(xì)胞后表達(dá)出的凋亡效果越好；進(jìn)一步用間接免疫熒光標(biāo)記FCM檢測(cè)凋亡的Hela細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)Hela細(xì)胞中Bax、Caspase－3凋亡蛋白的表達(dá)量有所增加，而Bcl－2的表達(dá)量有所下降，這種效果還會(huì)隨著EVn－50的濃度增加而增加，表明EVn－50在影響Hela細(xì)胞增殖，促使其凋亡中發(fā)揮了重要作用。陳李霞等［9］用不同濃度EVn－50處理結(jié)腸癌HT－29細(xì)胞，研究發(fā)現(xiàn)EVn－50誘導(dǎo)HT－29細(xì)胞凋亡的作用隨濃度的增加而增強(qiáng)，從凋亡的HT－29細(xì)胞中檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Bcl－2蛋白的表達(dá)受到抑制，Bax蛋白的表達(dá)增強(qiáng)。方呈祥等［10］用不同濃度EVn－50作用于人乳腺癌MCF－7細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)中等濃度（3.0 mg／L）、高濃度（30.0 mg／L）作用48 h和72 h的EVn－50能降低細(xì)胞中Mcl－1和Bcl－2蛋白的表達(dá)，增加Bax蛋白的表達(dá)，低濃度（0.3 mg／L）效果不佳；結(jié)果表明，EVn－50能通過(guò)降低Mcl－2、Bcl－2蛋白表達(dá)，加強(qiáng)Bax蛋白表達(dá)來(lái)達(dá)到對(duì)MCF－7細(xì)胞的抑制作用；利用3.0 mg／L EVn－50處理MCF－7細(xì)胞，48 h后達(dá)到誘導(dǎo)乳腺癌MCF－7細(xì)胞凋亡的最大效果。徐榮等［11］將EVn－50作用于T47D裸鼠異種移植瘤細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)瘤細(xì)胞發(fā)生了大范圍的凋亡壞死，從而證實(shí)EVn－50在體內(nèi)具有抑制T47D人乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，達(dá)到抗乳腺癌的作用。李曉琴等［12］將EVn－50與順鉑聯(lián)合，作用于體外人卵巢癌CoC1細(xì)胞，觀察兩藥合用對(duì)細(xì)胞凋亡的影響，結(jié)果顯示EVn－50與順鉑能對(duì)CoC1細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)行阻滯，加強(qiáng)順鉑作用于CoC1后的壞死效果。

鄧宇傲等［13］將EVn－50和從中分離的4種黃荊子木脂素類化合物（Comp.6、7、8、10）作用于體外培養(yǎng)的人卵巢癌CoC1細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)隨著EVn－50和4種木脂素類化合物的濃度增加和時(shí)間延長(zhǎng)，CoC1細(xì)胞的增殖受到的抑制作用也在加強(qiáng)，其中Comp.8的抑制效果最佳，其IC50為1.40μg／ml，EVn－50的IC50為1.56 g／ml。蔡艷林等［14］從黃荊子中提取分離得到4種木脂素類化合物（Comp.6、7、8、10），結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這4種黃荊子木脂素類化合物都具有誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡的作用，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分析發(fā)現(xiàn)其作用機(jī)制是抑制細(xì)胞G1／G0期；其中Comp.8促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用最強(qiáng)，其EC50為22.9μg／ml，與紫杉醇（31.0μg／ml）接近，抗癌效果良好。陳艷華［15］用MTT法檢測(cè)不同濃度（0.1、1.0、10.0μmol／L）的黃荊子活性成分VBE－3［6－羥基－4－（4－羥基－3－甲氧基苯基）－3－羥甲基－5－甲氧基－3，4－二氫（3R，4S）－2－醛基萘］處理肝癌HepG2細(xì)胞24 h后，發(fā)現(xiàn)HepG2細(xì)胞的增殖能力有所下降，并且呈濃度和時(shí)間依賴性；通過(guò)Annexin V－PI法檢測(cè)VBE－3作用的HepG2細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)VBE－3作用于HepG2細(xì)胞48 h后，HepG2細(xì)胞的凋亡率為30%左右。李一春等［16］研究發(fā)現(xiàn)，隨著VBE－3的濃度和作用時(shí)間增加，其作用于HepG2細(xì)胞發(fā)生凋亡壞死的數(shù)量越多，還發(fā)現(xiàn)HepG2細(xì)胞被VBE－3處理后p－Akt和ERK1／2蛋白的表達(dá)減少，VBE－3表現(xiàn)出降低HepG2細(xì)胞中p－Akt和ERK1／2蛋白活性的效果。鄧君等［17］應(yīng)用不同濃度黃荊子乙酸乙酯提取物（purified vitexin compound 2，VB2）處理人絨毛膜癌JEG－3細(xì)胞，結(jié)果顯示VB2隨著濃度和時(shí)間增加對(duì)JEG－3的抑制作用增強(qiáng)，呈現(xiàn)出濃度和時(shí)間依賴性，160μmol／L VB2作用72 h，抑制率高達(dá)86%；JEG－3細(xì)胞中mTOR和4E－BP1 mRNA的表達(dá)隨VB2濃度增高而表達(dá)下調(diào)。

2 抗炎鎮(zhèn)痛作用

鄭承劍［18］研究發(fā)現(xiàn)，黃荊子中化合物vitedoin A和negundoin B通過(guò)減少小鼠巨噬細(xì)胞中一氧化氮合酶和環(huán)氧化酶－2的表達(dá)，來(lái)抑制小鼠巨噬細(xì)胞中NO的生成，從而達(dá)到抗炎效果；通過(guò)醋酸扭體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)黃荊子乙酸乙酯萃取物中分離出的一個(gè)芳基二氫萘類木脂素具有外周鎮(zhèn)痛作用。白軍等［19］發(fā)現(xiàn)EVn－50口服能減輕二甲苯導(dǎo)致的小鼠耳廓的腫脹，通過(guò)Wstern blot檢測(cè)顯示腹腔注射去甲斑螯素誘導(dǎo)全身性炎性大鼠血液中白細(xì)胞的p38MAPK蛋白表達(dá)受到抑制，TNF－α、COX－2炎性細(xì)胞因子的表達(dá)降低。Zheng等［2］對(duì)黃荊子乙酸乙酯萃取物的鎮(zhèn)痛特性進(jìn)行了研究，并對(duì)其有效成分進(jìn)行了分離和鑒定，在80%乙醇提取物和不同極性溶液萃取物中，乙酸乙酯萃取物在醋酸致小鼠扭體試驗(yàn)中具有最高的鎮(zhèn)痛活性；從乙酸乙酯萃取物中分離出兩種主要木脂素（Comp.1、2），乙酸乙酯萃取物和Comp.1可顯著降低動(dòng)物模型扭體次數(shù)，口服Comp.1產(chǎn)生顯著的鎮(zhèn)痛作用；通過(guò)福爾馬林痛覺模型實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯萃取物有與中樞鎮(zhèn)痛藥相同的鎮(zhèn)痛活性，Comp.1在外周起鎮(zhèn)痛作用，納洛酮不能對(duì)抗Comp.1的鎮(zhèn)痛活性，提示Comp.1的鎮(zhèn)痛作用可能是其自身的抗炎活性作用；進(jìn)一步采用二甲苯誘導(dǎo)耳廓腫脹試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)兩種木脂素表現(xiàn)出顯著抗炎活性，且抗炎活性呈濃度依賴性?？拙傅龋?0］利用不同溶劑提取黃荊葉的活性成分，并進(jìn)行抗炎、鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示不同溶劑的黃荊葉提取物具有不同的抗炎鎮(zhèn)痛作用，且效果不同，其中乙酸乙酯提取物的抗炎鎮(zhèn)痛效果最強(qiáng)。

3 抑菌作用

熊彪等［21］利用甲醇提取黃荊根、莖、葉、果實(shí)中的活性成分，并進(jìn)行抑菌試驗(yàn)，結(jié)果顯示黃荊不同部位的甲醇提取液都能夠有效抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，不同部位有不同的作用結(jié)果，黃荊子提取液的抑菌效果在其中表現(xiàn)最好，其次為莖、葉、根；研究還發(fā)現(xiàn)黃荊的甲醇提取液對(duì)黑曲霉沒有抑制作用，對(duì)靈芝菌絲的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用。熊彪［22］發(fā)現(xiàn)不同的溶劑提取物具有不同的抑菌效果，黃荊水提物對(duì)A組乙型鏈球菌、金黃色葡萄球菌和大部分桿菌有抑菌作用，黃荊的乙醇提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、青霉菌和曲霉菌的抑制效果較好，乙醚是抑菌效果最好的提取溶劑，其作用效果大于乙醇和水。王洪新等［23］研究表明，黃荊葉乙醚提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和部分真菌有很好的抑制作用。

4 殺蟲作用

Tandon等［24］研究發(fā)現(xiàn)，黃荊揮發(fā)油應(yīng)用在黃麻毛蟲的身上有生長(zhǎng)調(diào)節(jié)作用，延長(zhǎng)了試驗(yàn)昆蟲的幼蟲期和蛹期，增加了幼蟲死亡率和成蟲畸形，降低了試驗(yàn)昆蟲的成蟲出欄率、雌蟲繁殖力和育卵率。盧傳兵等［25］研究黃荊精油及其主要成分的毒性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，黃荊精油中桉樹腦的含量高，桉樹腦和黃荊精油能使作用的玉米象死亡，桉樹腦的LC50為0.7171 g／kg，殺蟲活性最高。盧傳兵等［26］將黃荊葉的水蒸氣提取精油作用于綠豆象、鋸谷盜，發(fā)現(xiàn)對(duì)這2種昆蟲有殺滅和驅(qū)趕的作用。

5 其他作用

蘇泉等［27］用甲醇提取脫脂黃荊子，結(jié)果顯示黃荊子的甲醇提取物有減緩豬油氧化的作用，且效果十分顯著，與BHT（2，6－二叔丁基－4－甲基苯酚）的作用效果相接近，黃酮類化合物可能是其抗氧化的有效成分。

綜上所述，牡荊屬植物黃荊的生物活性呈現(xiàn)多樣性。目前對(duì)黃荊的藥理作用研究主要集中在抗癌、抑菌和殺蟲三大領(lǐng)域，但其作用機(jī)制需進(jìn)一步明確和完善。黃荊分布廣泛，其綜合藥用經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，因此需要更加深入的研究黃荊的化學(xué)成分及其藥理作用。