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        不同性別、年齡腹瀉患兒的病原微生物檢驗(yàn)及其臨床研究

        2021-01-07 10:23:38王琪琪
        生物化工 2020年6期
        關(guān)鍵詞:致病菌病原試劑盒

        王琪琪

        (山西醫(yī)科大學(xué)晉祠學(xué)院,山西太原 030025)

        腹瀉是常見(jiàn)的兒科疾病,與多種致病因有關(guān),且具有較高的患病率、致殘率,是損害我國(guó)嬰幼兒身心健康發(fā)展的常見(jiàn)病因之一[1]。重視腹瀉患兒臨床診治具有重要的意義。隨著當(dāng)前分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展,以及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)、酶聯(lián)免疫吸附法的廣泛運(yùn)用,腹瀉患兒病原微生物檢出率得到明顯提高,指導(dǎo)醫(yī)生結(jié)合病原微生物的常見(jiàn)類型、分布特點(diǎn)等方面信息,準(zhǔn)確判斷腹瀉發(fā)病狀況,積極制定最佳合理、科學(xué)的治療方案[2-3]。然而,腹瀉患兒具有個(gè)體差異性特點(diǎn),所以進(jìn)一步明確不同年齡、性別腹瀉患兒的病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果顯得尤為重要。本文隨機(jī)選擇93名腹瀉患兒為研究對(duì)象,針對(duì)不同性別、年齡腹瀉患兒的病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果展開(kāi)探究,旨在為其后續(xù)防治措施提供重要的理論依據(jù)。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        入選標(biāo)準(zhǔn):(1)神志清楚,依從性良好;(2)與《兒童腹瀉病診斷治療原則的專家共識(shí)》[4]提到的部分標(biāo)準(zhǔn)相符合,且經(jīng)過(guò)臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查、便常規(guī)等確診;(3)患兒家長(zhǎng)已知曉研究,自愿簽署知情同意書(shū)。

        排除標(biāo)準(zhǔn):(1)認(rèn)知障礙;(2)合并心理疾患、先天性疾?。ㄏ篱]鎖、貧血、肺炎等)、惡性腫瘤、營(yíng)養(yǎng)不良、食物中毒等;(3)大便量不足3 mL;(4)研究過(guò)程中因自身原因而主動(dòng)退出。

        該研究已取得倫理委員會(huì)的審核批準(zhǔn),現(xiàn)參照入選標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn),隨機(jī)選取某醫(yī)院2018年8月至2020年3月期間收治的93例腹瀉患兒為研究對(duì)象,包括53例男患兒、40例女患兒;年齡為2個(gè)月至5歲,平均年齡為(2.35±0.27)歲;發(fā)病至入院時(shí)間為48~72 h,平均發(fā)病至入院時(shí)間為(57.21±13.10)h。

        1.2 方法

        入院后,采集所有患兒新鮮大便(4~8 mL),并于2 h內(nèi)送檢。

        1.2.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)及鑒定

        將樣本接種于培養(yǎng)基上,進(jìn)行分離培養(yǎng),借助氯霉素沙保弱葡萄糖培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂、SS瓊脂、玉米吐溫80瓊脂平板、堿性蛋白陳水組成培養(yǎng)基進(jìn)行病原菌分離培養(yǎng),用API試劑、Vitek一32試劑,鑒定培養(yǎng)菌株,同時(shí)按照玻璃珠柱凝集法鑒定病原微生物(大腸埃希菌、志賀菌、副溶血弧菌、沙門(mén)菌等),見(jiàn)圖1。

        1.2.2 病毒學(xué)檢驗(yàn)

        按ELISA法及配套試劑盒內(nèi)的標(biāo)本處理液,制作標(biāo)本(10%便懸液),檢驗(yàn)人輪狀病毒,此操作嚴(yán)格遵守ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū),以保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

        圖1 大腸埃希菌電鏡圖

        1.2.3 RT-PCR檢驗(yàn)

        選擇ROCHE全自動(dòng)核酸分離純化儀為工具,檢驗(yàn)腺病毒、星狀病毒、杯狀病毒,抽提并純化病毒RNA核酸,同時(shí)依照PCR擴(kuò)增試劑盒、反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書(shū),完成RT-PCR實(shí)驗(yàn),如若檢驗(yàn)結(jié)果呈PCR陽(yáng)性,立即送至測(cè)序中心。

        1.3 觀察指標(biāo)

        (1)統(tǒng)計(jì)不同病原微生物(病毒、致病菌、真菌及寄生蟲(chóng))檢出率。(2)比較分析不同性別、年齡(<1歲、1~2歲、3~5歲)腹瀉患兒病原微生物檢出率。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

        選擇SPSS25.0軟件程序包為工具,分析、處理研究期間所涉及的數(shù)據(jù)。其中,計(jì)量資料表示為(x—±s),組間數(shù)據(jù)比較行t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料表示為n(%),組間數(shù)據(jù)比較行χ2檢驗(yàn)。以p<0.05為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同病原微生物(病毒、致病菌、真菌及寄生蟲(chóng))檢出率

        所有患兒病原微生物檢出率為61.29%(57/93),病毒占比47.30%(44/93)、致病菌占比10.74%(10/93)、真菌及寄生蟲(chóng)占比3.25%(3/93),詳見(jiàn)表1所示。

        2.2 不同性別、年齡腹瀉患兒病原微生物檢出率

        男患兒、女患兒病原微生物檢出率比較差異無(wú)顯著性(p>0.05);年齡<1歲、年齡1~2歲、年齡3~5歲的腹瀉患兒病原微生物檢出率比較差異有顯著性(p<0.05),詳見(jiàn)表2所示。

        小兒腹瀉是目前臨床上常見(jiàn)的小兒疾病,表現(xiàn)為大便次數(shù)增多、大便性狀改變等一系列癥狀,若診治不及時(shí),會(huì)引發(fā)機(jī)體營(yíng)養(yǎng)不良、脫水、中毒,甚至不利于生長(zhǎng)發(fā)育。黃美戀[5]選擇急性腹瀉嬰幼兒開(kāi)展研究,對(duì)其病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果予以分析,發(fā)現(xiàn)結(jié)合該患兒病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果,即可指導(dǎo)制定相應(yīng)防治措施,以減少急性腹瀉發(fā)生概率。在此基礎(chǔ)上,對(duì)不同性別、年齡小兒急性腹瀉的病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了深入探究,認(rèn)為在實(shí)踐工作中根據(jù)急性腹瀉患兒個(gè)體差異性,明確常見(jiàn)病原微生物,可有效保證患兒機(jī)體健康水平。由此可見(jiàn),加強(qiáng)不同年齡、性別腹瀉患兒病原微生物檢測(cè),對(duì)明確病原菌、找出其病因具有關(guān)鍵性作用。

        表1 不同病原微生物(病毒、致病菌、真菌及寄生蟲(chóng))檢出率

        表2 不同性別、年齡腹瀉患兒病原微生物檢出率

        此次研究結(jié)果顯示,所有患兒病原微生物檢出率為61.29%,其中病毒檢出率47.30%、致病菌檢出率10.74%、真菌及寄生蟲(chóng)檢出率3.25%,說(shuō)明腹瀉患兒病原體以病毒感染為主。在本研究病例中,輪狀病毒是引起嬰幼兒腹瀉的主要病原體之一。該病毒由糞口途徑傳染,可通過(guò)感染與小腸連結(jié)的腸黏膜細(xì)胞,產(chǎn)生腸毒素,繼而引發(fā)腸胃炎,導(dǎo)致腹瀉,甚至脫水。男患兒、女患兒病原微生物檢出率比較無(wú)差異,但年齡<1歲、年齡1~2歲、年齡3~5歲的腹瀉患兒病原微生物檢出率比較差異有顯著性(p<0.05),考慮此種情況的發(fā)生和小兒機(jī)體免疫力有關(guān),即新生兒通過(guò)自認(rèn)被動(dòng)免疫可從母體獲得IgG(抗體)和SIgA(免疫球蛋白),可抵抗病原微生物的入侵;2歲以上患兒因自身免疫系統(tǒng)逐漸趨于完善,而1~2歲患兒自母體中吸收的抗體減弱,再加之自身免疫系統(tǒng)發(fā)育尚未完善,所以更容易導(dǎo)致病原體入侵人體,從而誘發(fā)相關(guān)疾病。

        3 結(jié)語(yǔ)

        通過(guò)監(jiān)測(cè)腹瀉患兒病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果,可判定疾病與性別無(wú)關(guān),但與年齡有關(guān),尤其是l~2歲小兒,最容易發(fā)生腹瀉。為此,醫(yī)護(hù)人員在工作中需重視腹瀉患兒病原微生物的檢測(cè),積極采取針對(duì)性防治措施。今后需深入探究腹瀉患兒病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果特點(diǎn)及分布特征,以期豐富研究成果,積極提升我國(guó)小兒身心健康發(fā)展水平。

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