尤 燕，牟衛(wèi)偉

（1.正大天晴藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，江蘇 連云港 222062；2.煙臺(tái)市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，山東 煙臺(tái)264670）

血管生成（angiogenesis）指在已有的血管上以出芽的方式形成新的毛細(xì)血管，是一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程，受機(jī)體的嚴(yán)密調(diào)控。生理情況下，血管生成在成年人非常罕見(jiàn)，幾乎只發(fā)生于女性特定的生理周期。但在一些病理情況下，如惡性腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化及糖尿病性視網(wǎng)膜病變等疾病中，血管生成可被異常激活，抗血管生成對(duì)于這些疾病的治療具有重要意義[1]。隨著血管生成機(jī)制的廣泛深入研究，新的促血管生成和抗血管生成因子不斷被發(fā)現(xiàn)和鑒定，抗血管生成藥物的研發(fā)和應(yīng)用也取得新的突破。

1 抗血管生成策略的理論基礎(chǔ)

早在1787年，Hunter就用angiogenesis一詞描述血管新生過(guò)程[2]。1863年，Virchow注意到惡性腫瘤組織中血管絕對(duì)數(shù)急劇增多[3]；1907年，Goldman觀察到腫瘤組織周圍有血管生成的現(xiàn)象[4]；1968年，Greenblatt和Shubik提出了腫瘤可產(chǎn)生彌漫性血管生成物質(zhì)促進(jìn)新血管生成的假說(shuō)[4]。1971年，哈佛大學(xué)Folkman在《新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志》上發(fā)表論文，首次提出了腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移依賴于血管生成的假說(shuō)[5]，為抗腫瘤血管生成靶向治療的研究工作提供了理論依據(jù)。Folkman后來(lái)被稱為“餓死腫瘤療法”理論之父。1987年，F(xiàn)olkman和他的同事從腫瘤細(xì)胞中分離獲得第一個(gè)腫瘤血管生長(zhǎng)因子——堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）[4]；1989年，F(xiàn)errara和他的同事首次分離和克隆了血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）[6]，并于1993年報(bào)道其制備的VEGF鼠源性抗體可體內(nèi)抑制多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[7]。

2 抗血管生成藥物的研究進(jìn)展及臨床應(yīng)用

VEGF及其受體（VEGF receptor，VEGFR）信號(hào)通路是血管生成最主要的通路之一。VEGF是一種能控制內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移、浸潤(rùn)及生存的重要的血管生成因子，包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E及胎盤生長(zhǎng)因子（PLGF），各亞型在生物體內(nèi)的含量、定位、活性等均有不同。VEGFR是一類酪氨酸激酶跨膜糖蛋白，主要包括VEGFR1、VEGFR2和VEGFR3。VEGF與位于內(nèi)皮細(xì)胞表面的受體VEGFR結(jié)合，進(jìn)而激活細(xì)胞內(nèi)下游信號(hào)通路，刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖、分化、成熟、遷徙，從而生成新生血管。VEGF和VEGFR在腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞中過(guò)度表達(dá)，但在正常血管內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)較低，因此可將其作為腫瘤導(dǎo)向治療的靶點(diǎn)，特異性較高[8]。

抗血管生成藥物主要以VEGF和VEGFR為作用靶點(diǎn)，通過(guò)抑制其表達(dá)，阻斷信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路或耗竭腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的VEGF，進(jìn)而抑制新生血管的生成，阻斷腫瘤血供，起到抑制腫瘤生長(zhǎng)、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的作用。因此針對(duì)VEGF及VEGFR的抗體和小分子酪氨酸激酶抑制劑（tyrosine kinase inhibitor，TKI）是抗血管生成治療的主要方法[9]。相關(guān)研究還發(fā)現(xiàn)，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGF）/ FGF受體（FGF receptor，F(xiàn)GFR）抑制劑[10]及血小板衍生生長(zhǎng)因子（platelet-derived growth factor，PDGF）/PDGF受體（PDGF receptor，PDGFR），在抑制惡性腫瘤的血管生成、減少腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移中起到一定作用[11]。此外，一些細(xì)胞外基質(zhì)水解片段，如血管生成抑素（angiostatin）、內(nèi)皮抑素（endostatin）、腫瘤抑素（tumstatin）和癌抑素（canstatin）等多種內(nèi)源性分子，可直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞，從而影響腫瘤細(xì)胞特有的調(diào)節(jié)通路，阻斷營(yíng)養(yǎng)供給，達(dá)到抑制腫瘤增殖或轉(zhuǎn)移的目的。

根據(jù)藥物特點(diǎn)，目前抗血管生成藥物大體可分為小分子多靶點(diǎn)血管生成抑制劑、包括抗體類在內(nèi)的大分子單靶點(diǎn)血管生成抑制劑和內(nèi)源性泛靶點(diǎn)血管生成抑制劑。

2.1 小分子酪氨酸激酶抑制劑

目前全球已批準(zhǔn)上市12個(gè)以VEGFR為主要靶點(diǎn)的抗血管生成藥物，均為口服制劑。

索拉非尼（Sorafenib）被認(rèn)為是第一個(gè)多靶點(diǎn)激酶抑制劑，2005年12月20日在美國(guó)首次獲準(zhǔn)上市，2006年在中國(guó)上市，一方面可抑制鼠白血病病毒癌基因同源物1（murine leukemia viral oncogene homolog 1，Raf1）、鼠肉瘤病毒致癌基因同源物B1（murine sarcoma viral oncogene homolog B1，B-Raf），通過(guò)抑制Raf/絲裂原活化的細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase，MEK）/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）信號(hào)通路直接抑制腫瘤生長(zhǎng)，另一方面通過(guò)抑制VEGFR2/3和PDGFRβ而阻斷腫瘤新生血管的形成，間接抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，臨床用于肝癌、腎細(xì)胞癌、分化型甲狀腺癌的治療[12]。索拉非尼聯(lián)合吉西他濱/順鉑對(duì)比吉西他濱/順鉑治療不能手術(shù)切除的IIIB-IV期非鱗非小細(xì)胞肺癌的研究結(jié)果提示，索拉非尼治療僅延長(zhǎng)了患者的中位無(wú)進(jìn)展生存期（progression-free survival，PFS），沒(méi)有改善患者的中位總生存期（overall survival，OS）[13]。

舒尼替尼（Sunitinib）除了抑制VEGFR，還可抑制其他多種酪氨酸激酶，如PDGFR和FMS樣酪氨酸激酶3（FMS-like tyrosine kinase-3，F(xiàn)LT3）等，2006年FDA批準(zhǔn)上市，2007年進(jìn)口中國(guó)，目前舒尼替尼已被FDA批準(zhǔn)用于治療胃腸道間充質(zhì)瘤、轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌和晚期胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤[14]。

培唑帕尼（Pazopanib）能抑制VEGFR1、VEGFR2 和 VEGFR3、PDGFRα/β、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1/3（FGFR1/3）、干細(xì)胞因子受體（c-Kit）、白介素2（IL-2）誘導(dǎo)的T細(xì)胞激酶（Itk）、淋巴細(xì)胞特異蛋白酪氨酸激酶（Lck）和跨膜糖蛋白受體酪氨酸激酶（c-Fms），2009年批準(zhǔn)上市，是第一個(gè)用于非胃腸間質(zhì)瘤和非脂肪細(xì)胞軟組織肉瘤的口服藥，已批準(zhǔn)用于腎癌和軟組織肉瘤的臨床治療[15]。

凡德他尼（Vandetanib）是一種苯胺喹唑啉化合物類多靶點(diǎn)激酶抑制劑，可有效抑制腫瘤細(xì)胞表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）、VEGFR、轉(zhuǎn)染重排（rearranged during transfection，RET）基因和乳腺腫瘤激酶（breast tumor kinase，BRK）的成員，2011年首次獲準(zhǔn)上市，用于甲狀腺髓樣癌的治療。研究顯示，凡德他尼可通過(guò)作用于腫瘤靶點(diǎn)RET酪氨酸激酶而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和存活，從而起到治療甲狀腺髓樣癌的效果，2005年獲得FDA孤兒藥資格，主要針對(duì)濾泡型、髓質(zhì)型、未分化型和局部復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移乳突型甲狀腺癌[16]。

卡博替尼（Cabozantinib）能強(qiáng)效抑制VEGFR和間質(zhì)表皮轉(zhuǎn)化因子（c-mesenchymal-epithelial transition factor，c-MET），此外，其作用靶點(diǎn)還包括RET、生長(zhǎng)停滯特異性基因6（growth arrestspecific 6 gene，GAS6）、干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體（stem cell factor receptor，SCFR，又稱c-Kit）、上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨酸激酶-2（human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2，TIE-2）和FLT-3[17]，2012年，F(xiàn)DA批準(zhǔn)卡博替尼用于治療轉(zhuǎn)移性甲狀腺髓樣癌，2016年批準(zhǔn)晚期腎細(xì)胞癌適應(yīng)癥，2019年批準(zhǔn)用于經(jīng)索拉菲尼治療后疾病進(jìn)展的肝細(xì)胞癌的二線治療。

瑞戈非尼（Regorafenib）能抑制包括血管新生（VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、TIE-2），腫瘤生長(zhǎng)（c-Kit、RET、Raf-1 和B-Raf）和腫瘤微環(huán)境（PDGFR和FGFR）相關(guān)靶點(diǎn)的活性[18]，2012年，F(xiàn)DA首次批準(zhǔn)上市，是第一個(gè)被證實(shí)可用于治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌（mCRC）的小分子多激酶抑制劑，2013年，F(xiàn)DA批準(zhǔn)用于治療胃腸道間質(zhì)瘤（GIST），是FDA批準(zhǔn)用于該適應(yīng)癥的第3個(gè)藥物，2017年批準(zhǔn)二線治療肝細(xì)胞癌（HCC），2017年在我國(guó)批準(zhǔn)上市。

阿昔替尼（Axitinib）選擇性抑制VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3，在納摩爾濃度就表現(xiàn)出對(duì)VEGFR、PDGFRβ和c-Kit的較高特異性和作用效果[19]，2012年1月27日，F(xiàn)DA批準(zhǔn)其用于經(jīng)其他全身治療無(wú)效的晚期腎細(xì)胞癌患者。至此，自2005年以來(lái)，先后有索拉非尼、舒尼替尼、貝伐珠單抗和帕唑帕尼4種抗血管生成藥物批準(zhǔn)用于晚期腎細(xì)胞癌的治療。2015年我國(guó)批準(zhǔn)進(jìn)口阿昔替尼片。

尼達(dá)尼布（Nintedanib）是三聯(lián)血管激酶抑制劑，作用于VEGFR1-3、FGFR1-3和PDGFRα/β 3種不同的促血管生成通路，以及RET、FLT3和肉瘤基因（sarcoma gene，SRC）家族，2014年經(jīng)美國(guó)FDA和歐盟批準(zhǔn)上市，是首個(gè)特發(fā)性肺纖維化（IPF）突破性治療藥物，歐盟還同時(shí)批準(zhǔn)尼達(dá)尼布聯(lián)合多西他賽用于肺腺癌患者的二線治療，2017年9月在我國(guó)獲準(zhǔn)上市。

樂(lè)伐替尼（Lenvatinib）通過(guò)抑制VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3、FGFR1-3、KIT、PDGFRα和RET的活性來(lái)抑制新血管的生成，從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)，2015年FDA首次批準(zhǔn)上市，臨床用于放射性碘難治性分化型甲狀腺癌的單藥治療及與依維莫司聯(lián)合治療晚期腎細(xì)胞癌[20]，2018年批準(zhǔn)用于不可切除HCC患者的一線治療。2018年，F(xiàn)DA授予PD-1抗體K藥聯(lián)合樂(lè)伐替尼“突破性新藥”資格認(rèn)定。

此外，我國(guó)自主研發(fā)并在中國(guó)首次獲批上市的抗血管生成靶向藥物也取得了一定進(jìn)展，已有3個(gè)藥物獲批上市。

阿帕替尼（Apatinib）是針對(duì)VEGFR，特別是VEGFR2的口服小分子抗血管生成酪氨酸激酶抑制劑，2014年10月17日在我國(guó)批準(zhǔn)上市，用于胃癌三線及三線以上治療[21]，是首個(gè)被證實(shí)可用于晚期胃癌標(biāo)準(zhǔn)化療失敗后的安全有效的小分子抗血管生成靶向藥物，目前已在肺癌、乳腺癌、肝癌等多種實(shí)體瘤中開展臨床試驗(yàn)。

安羅替尼（Anlotinib）是一種新型多靶點(diǎn)酪氨酸激酶抑制劑，能強(qiáng)效抑制VEGFR2/3、FGFR1-4、PDGFRα/β、c-Kit和Ret等多個(gè)靶點(diǎn)，從而發(fā)揮抗腫瘤血管生成和抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用[22]，2018年5月8日經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)上市，用于晚期非小細(xì)胞肺癌患者的三線治療[23]，2019年6月和9月分別獲批用于軟組織肉瘤和小細(xì)胞肺癌的治療，另有治療甲狀腺髓樣癌、結(jié)直腸癌、食管鱗癌、胃癌、肝癌等多種實(shí)體瘤的臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中。

呋喹替尼（Fruquintinib）是高選擇性的VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3抑制劑，可有效抑制血管與淋巴管的增生，對(duì)其他激酶幾乎沒(méi)有抑制活性[24]，于2018年9月4日在我國(guó)獲準(zhǔn)上市，用于轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的治療。

2.2 抗VEGF/VEGFR大分子藥物

全球批準(zhǔn)上市的抗VEGF/VEGFR的大分子藥物共有5種，包括3種單克隆抗體：貝伐珠單抗、雷莫蘆單抗、雷尼珠單抗，以及兩種融合蛋白：阿柏西普和康柏西普。

貝伐珠單抗（Bevacizumab）是全球首個(gè)獲批的抗腫瘤血管生成靶向藥物，含93 %人IgG骨架和7%鼠源結(jié)合域，也是第一個(gè)重組的人源化抗VEGF單克隆抗體，可識(shí)別所有的VEGF-A亞型，阻止VEGF與內(nèi)皮細(xì)胞表面的VEGFR結(jié)合，從而抑制細(xì)胞增殖及新生血管生成[25]。2004年FDA首次批準(zhǔn)上市，與化療聯(lián)合用于結(jié)腸癌的治療，2006年10月批準(zhǔn)與卡鉑和紫杉醇聯(lián)合，用于不能切除的局部進(jìn)展或轉(zhuǎn)移的非鱗非小細(xì)胞肺癌的一線治療，是迄今為止唯一一個(gè)在一線治療中被證實(shí)與化療藥物聯(lián)合應(yīng)用可為晚期非鱗非小細(xì)胞肺癌患者帶來(lái)生存獲益的抗血管生成藥物，此外，還獲準(zhǔn)用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、轉(zhuǎn)移性腎癌等惡性腫瘤。2010年2月在我國(guó)獲準(zhǔn)上市，用于治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌。

雷莫蘆單抗（Ramuciruma）是一個(gè)人源化單克隆抗體，選擇性地與VEGFR2的胞外區(qū)域結(jié)合，阻止VEGFR2的磷酸化，是全球唯一已經(jīng)上市的VEGFR2單克隆抗體。2014年4月21日FDA首次批準(zhǔn)，臨床主要用于治療胃癌、非小細(xì)胞肺癌、結(jié)直腸癌等惡性腫瘤[26]。2019年獲批用于甲胎蛋白≥400 ng/ml的肝癌二線治療，也是FDA批準(zhǔn)的首個(gè)生物標(biāo)志物驅(qū)動(dòng)的肝癌療法。2020年5月29日，F(xiàn)DA批準(zhǔn)雷莫蘆單抗與EGFR-TKI厄洛替尼（erlotinib）聯(lián)合用于EGFR第19外顯子缺失突變（19del）及第21外顯子L858R突變轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌的一線治療。

雷尼珠單抗（Ranibizumab）采用與貝伐珠單抗相同的鼠源抗體構(gòu)建而成，是第二代人源化IgG1單克隆抗體Fab片段，不含F(xiàn)c區(qū)，分子量更小，直接結(jié)合VEGF-A抑制其活性，能直接注射到眼睛玻璃體內(nèi)發(fā)揮作用。FDA于2006年6月30日批準(zhǔn)其用于治療年齡相關(guān)性黃斑變性（AMD）患者，雷尼珠單抗是第一個(gè)使AMD患者視力改善的VEGF抑制劑，2015年2月批準(zhǔn)用于治療糖尿病性黃斑水腫（DME），2017年4月成為首個(gè)FDA批準(zhǔn)用于治療所有類型糖尿病性視網(wǎng)膜病變的藥物，包括：AMD、視網(wǎng)膜靜脈阻塞（RVO）后的黃斑水腫（ME）、DME、糖尿病性視網(wǎng)膜病變（DR）、近視性脈絡(luò)膜新生血管（mCNV），2011年進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)。

此外，還有兩種融合蛋白。阿柏西普（Aflibercept）是一種與VEGF-A、VEGF-B和PLGF緊密結(jié)合的融合蛋白，通過(guò)與這些內(nèi)源性配體結(jié)合，此藥能抑制其與內(nèi)源受體的結(jié)合與活化，從而減少新血管的生成和降低血管通透性，2012年8月3日FDA批準(zhǔn)其用于結(jié)直腸癌[27]，2011、2012和2014年相繼批準(zhǔn)了阿柏西普治療濕性AMD、視網(wǎng)膜靜脈阻塞繼發(fā)黃斑水腫和DME?？蛋匚髌眨–onbercept）是一種玻璃體腔內(nèi)注射的，用中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的具有VEGF1和VEGF2兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)的新一代抗VEGF重組融合蛋白，可有效抑制新生血管生成，于2013年12月獲準(zhǔn)作為治療濕性年齡相關(guān)性新生血管黃斑病變用藥，是中國(guó)首個(gè)獲得世界衛(wèi)生組織國(guó)際通用名的生物創(chuàng)新藥?？蛋匚髌昭塾米⑸湟?016年10月獲得FDA批準(zhǔn)，直接進(jìn)入AMD Ⅲ期臨床試驗(yàn)。

2.3 內(nèi)源性泛靶點(diǎn)血管生成抑制劑

恩度（Endostar）是內(nèi)源性血管生成抑制因子內(nèi)皮抑素（endostatin，ES）的改良蛋白。1997年，F(xiàn)olkman和O'Reilly等從小鼠內(nèi)皮細(xì)胞瘤中分離到血管生成抑制因子內(nèi)皮抑素（endostatin），幾乎能完全抑制小鼠腫瘤誘導(dǎo)的血管生成，顯示較強(qiáng)的抗腫瘤活性，毒副作用輕[28]。羅永章等[29]在內(nèi)皮抑素的N端外加了9個(gè)氨基酸，開發(fā)出重組人血管內(nèi)皮抑制素注射液（恩度），屬于泛靶點(diǎn)血管內(nèi)皮細(xì)胞抑制劑。2005年9月，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局批準(zhǔn)恩度與長(zhǎng)春瑞濱/順鉑聯(lián)用治療晚期非小細(xì)胞肺癌[30]。該類藥物的作用機(jī)制及臨床應(yīng)用研究仍處于探索階段。

3 小結(jié)與展望

自2004年首個(gè)血管靶向藥物貝伐珠單抗獲批以來(lái)，無(wú)論是大分子或是小分子抗血管生成藥物的研究均取得顯著成就，臨床廣泛用于甲狀腺髓樣癌、腎細(xì)胞癌、肝癌等惡性實(shí)體瘤及視網(wǎng)膜病變的治療。其中小分子多靶點(diǎn)酪氨酸激酶抑制劑，通過(guò)抑制腫瘤血管生成和改善腫瘤微環(huán)境發(fā)揮抗腫瘤作用，作用顯著，并且均為口服制劑，臨床使用方便，得到深入研究和廣泛應(yīng)用。索拉非尼、舒尼替尼、瑞戈非尼、樂(lè)伐替尼、安羅替尼均獲批3個(gè)以上適應(yīng)癥。此外，F(xiàn)DA于2018年批準(zhǔn)的FGFR抑制劑厄達(dá)替尼（Erdafitinib）用于FGFR基因突變的膀胱癌，2019年批準(zhǔn)的PDGFR抑制劑阿伐普利尼（Avapritinib）用于胃腸道間質(zhì)瘤，進(jìn)一步拓展了抗血管生成小分子藥物的研究和應(yīng)用范圍。抗血管治療與其他靶向治療、免疫治療等聯(lián)合應(yīng)用也成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)，有望帶來(lái)新的突破。

抗血管生成藥物不僅具有抑制腫瘤血管生成的作用，還可能對(duì)人體正常血管造成損傷，引起高血壓、蛋白尿、手足綜合征等不良反應(yīng)。隨著精準(zhǔn)醫(yī)療的推進(jìn)，如何根據(jù)不同的腫瘤類型和個(gè)體差異實(shí)施科學(xué)合理的精準(zhǔn)治療策略，進(jìn)一步研發(fā)針對(duì)腫瘤血管的特異性藥物和用藥方案，提高其抗腫瘤療效的同時(shí)，減輕藥物毒副作用，規(guī)范抗血管生成藥物的臨床應(yīng)用，仍需要進(jìn)一步研究探索。