宮玉婷，劉曉倩

（新疆維吾爾自治區(qū)阿克蘇地區(qū)藥品檢驗(yàn)所，新疆 阿克蘇 843000）

0 引言

薄膜過濾法是一種檢驗(yàn)形式，在《中華人民共和國藥典》中也有所記載[1]，是通過微孔濾膜對(duì)細(xì)菌阻斷，從而對(duì)樣品中的可溶性成分進(jìn)行過濾，以此讓樣品中污染的細(xì)菌進(jìn)行檢出的一種試驗(yàn)形式[2]，操作簡(jiǎn)單，應(yīng)用快速，結(jié)果準(zhǔn)確。此種方式在無菌檢查中能夠快速的集菌。在藥物微生物限度檢查中，能夠?qū)⑺幬镏幸恍┏煞值囊志饔萌コ齕3]。

1 薄膜過濾法的臨床類型和特征

目前，在藥物檢驗(yàn)技術(shù)的不斷創(chuàng)新下，薄膜過濾法已成為當(dāng)前應(yīng)用廣泛的一種藥物測(cè)定方式[4]。薄膜過濾形式操作簡(jiǎn)單，快速以及數(shù)據(jù)清楚準(zhǔn)確，也被應(yīng)用于多種藥物的微生物檢驗(yàn)中。另外薄膜過濾法還可以將其作為微生物的回收和檢驗(yàn)形式。也有相關(guān)數(shù)據(jù)記錄了薄膜過濾法的檢驗(yàn)形式，且能夠保持在無菌狀態(tài)下處理，從而將藥物中的抑菌成分去除[5]。在藥物研究技術(shù)不斷發(fā)展下，薄膜過濾法也得到了改良，不僅僅應(yīng)用于液體的測(cè)定，對(duì)固體也能夠予以判定，臨床效果可行。

超濾屬于加壓膜分離方式，主要原理為在壓力一定條件下，小分子溶質(zhì)和容積穿入薄膜中，從而讓大分子的物質(zhì)得到純化。且超膜原理也是屬于膜分離的流程，超濾采用的是壓力活性膜[6]，通過外部環(huán)境的推動(dòng)從而得出顆粒、分子量較高的物質(zhì)。正常情況下，薄膜過濾法的優(yōu)點(diǎn)可以表現(xiàn)為成本低廉，操作簡(jiǎn)單，且不需要任何的化學(xué)試劑，研究條件更加穩(wěn)定。因此這種相似的形式在藥物檢驗(yàn)中起到了重要的效果。

2 在藥物無菌檢查中的應(yīng)用

2.1 抗菌藥物無菌檢查應(yīng)用?？咕幬飼?huì)對(duì)一些微生物的生長(zhǎng)進(jìn)行阻礙，因此應(yīng)用基礎(chǔ)檢查形式檢查會(huì)發(fā)生假陰性結(jié)果，但是并不代表藥物中沒有微生物甚至是致病性的微生物，因此薄膜過濾法是用來對(duì)藥物中可溶的抑菌性成分進(jìn)行去除，將細(xì)菌等微生物截取留在濾膜上，經(jīng)過處理后讓含有微生物的進(jìn)行生長(zhǎng)，達(dá)到微生物能夠定量被檢測(cè)，這樣有利于藥物微生物質(zhì)量控制和滅菌制劑的質(zhì)量控制。如臨床為了進(jìn)一步分析抗生素滴眼劑的微生物質(zhì)量依據(jù)和檢驗(yàn)形式，研究人員對(duì)五種抗生素滴眼劑進(jìn)行無菌測(cè)定，結(jié)果分析五個(gè)抗生素品種中，有18個(gè)生產(chǎn)廠家45批次的一般用途抗生素滴眼劑符合測(cè)定依據(jù)，證實(shí)薄膜過濾法可以用作控制菌檢查。在《中華人民共和國藥典》[7]中無菌檢查法也有不適用品類，如麗福康（注射用伏立康唑）、燈盞細(xì)辛注射液、注射用雙黃連（凍干）等等。

2.2 非抗菌藥物在無菌檢查中的應(yīng)用。臨床中也有分析認(rèn)為無菌檢查法中直接接種更加適合非抗菌作用的供試品，但是也有一些非抗菌作用的供試品應(yīng)用直接接種法后，檢查結(jié)果差強(qiáng)人意。比如注射液加進(jìn)的需氧菌（Aerobic bacteria）[8]、厭氧菌培養(yǎng)基試管以及真菌培養(yǎng)基試管后發(fā)生了渾濁反應(yīng)，導(dǎo)致結(jié)果不易被觀察，也無法判定，還需要經(jīng)過接種以及涂片染色后記錄，這種方式不僅導(dǎo)致培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，還進(jìn)一步導(dǎo)致污染概率提升。在選擇薄膜過濾法后，兩種培養(yǎng)基試管并不會(huì)導(dǎo)致渾濁反應(yīng)發(fā)生，這樣不僅僅對(duì)檢驗(yàn)周期縮短，也有利于結(jié)果的觀察。臨床分析中，應(yīng)用薄膜過濾法替代直接接種形式，對(duì)注射用阿昔洛韋等進(jìn)行無菌檢查，結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，直接接種法容易導(dǎo)致假陰性出現(xiàn)，薄膜過濾法能夠?qū)Π⑽袈屙f濃度導(dǎo)致的渾濁反應(yīng)消除，也能夠?qū)λ幬飳?dǎo)致的堿性環(huán)境消除，這樣有利于培養(yǎng)時(shí)間縮短，同時(shí)提升陽性檢出率。

3 在藥物微生物限度檢查中的應(yīng)用

在《中國藥典》中微生物限度檢查法中，記錄了薄膜過濾形式，同時(shí)將大腸桿菌（Escherichia coli）、沙門菌（Salmonella）、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus，S.aureus）、綠膿桿菌（Pseudomonas aeruginosa）、破傷風(fēng)梭菌（clostridium tetani）[9]作為藥物的控制菌要求測(cè)定。但是如果供試品存在抑菌成分，則控制菌將無法被檢出，因此目前臨床中對(duì)含有抑菌成分的供試品進(jìn)行多種研究[10]。

3.1 抗生素滴眼劑微生物分析。臨床研究人員通過開放式濾器將貼膜形式和薄膜過濾形式聯(lián)合用來消除抗生素活性，結(jié)果證實(shí)菌落回收率高達(dá)80.00%，且45批次的抗生素滴眼劑微生物限度均滿足依據(jù)，證實(shí)貼膜反應(yīng)用菌落計(jì)數(shù)方式可行，且薄膜過濾法能夠用作控制菌檢查，為《中國藥典》[11]抗生素滴眼劑微生物限度檢查建立科學(xué)的檢查形式。

3.2 眼膏軟膏劑微生物限度檢查。在眼膏以及軟膏劑微生物限度檢查中，進(jìn)行了8個(gè)品種以及15批樣品的考察試驗(yàn)形式，首先將供試品和肉豆蔻酸異丙酯混合的稀釋用品，進(jìn)行0.90%無菌氯化鈉溶液萃取后，選取萃取液應(yīng)用薄膜過濾法檢查分析是否有微生物，結(jié)果證實(shí)這一方式具有較高的科學(xué)性。

3.3 中成藥微生物限度檢查。中成藥可以應(yīng)用薄膜過濾法以及離心沉淀形式或者超聲細(xì)菌形式等來對(duì)中成藥中的抑菌效果清楚，應(yīng)用方式簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確，重現(xiàn)度較佳。

3.4 化學(xué)藥微生物限度檢查。對(duì)于基礎(chǔ)形式無法測(cè)定出污染菌的藥物有：復(fù)方磺胺甲惡唑（Sulfamethoxazole Co.）[12]、單磷酸阿糖腺苷（Danlinsuan Atangxian’gan Vidarabine Monophosphate）、硝呋太爾等應(yīng)用此種方式測(cè)定，結(jié)果證實(shí)均能夠?qū)λ幬镏械臍⒕煞诌M(jìn)行去除，從而讓藥物中被污染的微生物急性生長(zhǎng)，具有較高檢出率，能夠?qū)?xì)菌數(shù)和真菌數(shù)以及控制菌測(cè)定。

4 薄膜過濾法在藥物微生物試驗(yàn)中的應(yīng)用

臨床應(yīng)用薄膜過濾中和法作為中和抗菌藥物抗菌作用的方式之一，這種方式不僅僅取決于微生物在微孔濾膜上的物理保留性質(zhì)[13]，如濾膜孔徑大小、濾膜對(duì)抗菌藥物的吸附效果在濾膜上回收微生物的培養(yǎng)基礎(chǔ)。遺留在濾膜上的抗菌藥物可能在一定程度上對(duì)微生物的生長(zhǎng)起到抑制效果。且研究人員應(yīng)用薄膜過濾貼膜形式對(duì)抗菌藥物進(jìn)行活菌檢出率、回收率以及增殖試驗(yàn)，結(jié)果證實(shí)，薄膜過濾貼膜形式相對(duì)于《中國藥典》記錄的洗脫法進(jìn)行記錄，且貼膜法的回收率平均值要＞70.00%[14]，這也在一定程度上證實(shí)貼膜法能夠用作含抑菌成分中，藥物微生物限度的測(cè)定。

5 結(jié)論

綜合以上結(jié)論，對(duì)藥物的抗菌成分進(jìn)行消除時(shí)，薄膜過濾形式具有更為精準(zhǔn)的應(yīng)用效果，也是藥物檢驗(yàn)中最為多見的處理形式，外界因素得到消除后，不利因素的影響力也有所降低，以此所測(cè)定樣品的準(zhǔn)確度有所提升，在一定程度上能夠降低主觀因素導(dǎo)致的不良反應(yīng)，以此保障樣本取得樣品量，因此測(cè)定結(jié)果更為公正，更具有科學(xué)性和客觀度，樣品發(fā)生污染過程中也能進(jìn)行科學(xué)的清理。因此上述研究對(duì)于臨床也具有一定的推廣意義，以及實(shí)驗(yàn)價(jià)值，值得臨床進(jìn)一步展開分析，從而為臨床研究提供參考標(biāo)準(zhǔn)。