李娜，田立玲

（1.吉林省藥品審核查驗(yàn)中心疫苗檢查中心，吉林 長春 130000；2.吉林省輝南縣三和制藥有限公司，吉林 長春 130000）

0 引言

太子參消徵丸是一種比較常用的中藥制劑，主要是用于消除淤血、淤腫，相對來說有良好的效果。但中藥制劑有一定的特殊性，本品中用到的中藥種類較多，而不同中藥有不同的作用和效果，怎樣保證本品適用于對癥的患者是一項(xiàng)難題。同樣因?yàn)橹兴幹苿┑奶厥庑?，進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的檢定存在很高的難度，如何準(zhǔn)確判定中藥制劑的質(zhì)量成為醫(yī)藥界的難題。對于太子參消徵丸來說，原標(biāo)準(zhǔn)收載于吉林省食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑標(biāo)準(zhǔn)JLZL-ZB-0261-2013中。當(dāng)前中藥制劑的質(zhì)量控制方法簡單，無法保證良好控制太子參消徵丸的質(zhì)量。因此為了確保臨床用藥安全，保證藥品的質(zhì)量，很懂研究認(rèn)為檢測阿魏酸的含量有一定的幫助作用?；诖耍驹囼?yàn)選擇高效液相色譜法測定太子參消徵丸中主要中藥成分當(dāng)歸中的阿魏酸含量[1-3]。

1 儀器與試藥

島津LC-2010A高效液相色譜儀，阿魏酸對照品，購于中國藥品生物制品檢定所（供含量測定用，批號為：110773-201313），乙腈為色譜純，水為純化水，其他試劑均為分析純。色譜柱：WondasilTM C18 5μm，250×4.6 mm；太子參消徵丸（規(guī)格：9 g，由遼源市中醫(yī)院制劑室提供，批號：20171128，20171219，20171013）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件。色譜柱：WondasilTMC185μm250×4.6 mm；流動相：乙腈為流動相A；0.085%磷酸為流動相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫，柱溫35℃，流速1.0 mL/min；檢測波長為316 nm。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，見表1。

2.2 溶液的制備

表1 色譜條件

2.2.1 對照品溶液的制備：取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含7μg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備：取重量差異項(xiàng)下的大蜜丸5 g，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇80 mL，回流提取至提取液無色，提取液回收甲醇至干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1-2，用乙醚振搖提取5次（40 mL，30 mL，20 mL，20 mL，20 mL），合并乙醚提取液，回收乙醚至干，殘?jiān)眉状既芙?，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取濾液，即得。

2.2.3 陰性對照溶液：為進(jìn)一步考察試驗(yàn)的合理性，取不含當(dāng)歸的陰性對照樣品。依正文所述方法進(jìn)行測定。

2.3 專屬性試驗(yàn)。按處方配置無當(dāng)歸的陰性樣品，按供試品制備方法制備樣品，結(jié)果顯示，陰性樣品色譜在與阿魏酸峰相應(yīng)的保留時(shí)間附近無干擾峰檢出，從而證明本方法是合理可行的。

2.4 線性關(guān)系的考察。分別精密吸取對照品溶液（0.006695 mg/mL）2.0、4.0、8.0、12.0、16.0、20.0μl依次注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)X，阿魏酸峰面積為縱坐標(biāo)Y作圖，得一直線，近似通過原點(diǎn)。結(jié)果表明，阿魏酸在0.01339μg-0.1339μg范圍內(nèi)樣品含量與峰面積呈良好的線性關(guān)系。其線形回歸方程為y=9.5E+6X相關(guān)系數(shù)γ2=0.9986。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)。取同一供試品溶液依法分別于0、2、5、8、10小時(shí)進(jìn)樣測定阿魏酸峰面積積分值，RSD=0.6%。表明本品在10小時(shí)內(nèi)阿魏酸的含量基本穩(wěn)定。

2.6 加樣回收率試驗(yàn)。精密稱取已知含量的樣品6份約2.5 g，精密稱定。精密加阿魏酸對照品溶液（0.006695 mg/mL）3.0 mL，依法測定，結(jié)果見表2。

表2 回收率試驗(yàn)

如表所示，測得阿魏酸的平均回收率為93.29%，RSD＝1.95%。結(jié)果表明本法回收率較好，準(zhǔn)確度較高。

2.7 含量測定。取樣品分別按照供試品制備方法制備供試品溶液，每丸含量阿魏酸按mg計(jì)，結(jié)果：

廠家1遼源市中醫(yī)院制劑室，批號20171128，均值（mg/丸）0.1599。

廠家2遼源市中醫(yī)院制劑室，批號201712190，均值（mg/丸）1635。

廠家3遼源市中醫(yī)院制劑室，批號20171013，均值（mg/丸）1635。

3 討論

3.1 波長的選擇。通過實(shí)驗(yàn)，阿魏酸在316nm有強(qiáng)吸收，故選擇316nm為測定波長。

3.2 提取溶劑的選擇。試驗(yàn)選用甲醇，乙醇作為提取溶劑進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，甲醇提取效率最高，故選擇甲醇作為提取溶劑。

3.3 提取方法的選擇。以甲醇為溶劑，提取方法分別采用回流提取1小時(shí)，超聲提取1小時(shí)，索氏提取器提取近無色后用乙醚提取5次，結(jié)果顯示索氏提取器提取的樣品陰性無干擾，最終選取索氏提取器提取的方法。

4 結(jié)論

太子參消徵丸是由鱉甲、炮山甲、水紅花子、當(dāng)歸、凌霄花、黑大豆、澤蘭、丹參、太子參、白術(shù)、黃芪、夏枯草、土鱉蟲、桃仁、防己、地龍、大黃、冬蟲夏草等16味組成的中藥復(fù)方制劑。在這味制劑中，太子參是一種中藥，是石竹科植物孩兒參的干燥塊根，在我國多地均有分布。其具有益氣健脾，生津潤肺的功效，因此在中醫(yī)臨床上常用于治療脾虛體倦，食欲不振，病后虛弱，氣陰不足，自汗日渴，肺燥干咳等病癥。消癥丸的功能主治是舒肝行氣、活血化痰、軟堅(jiān)散結(jié)。消癥丸主治氣滯血瘀痰凝所致的乳腺增生病。癥見乳房腫塊，乳房脹痛或刺痛，可伴胸脅疼痛，善郁易怒，胸悶，脘痞納呆，月經(jīng)量少色暗，經(jīng)行腹痛。舌暗紅或有瘀點(diǎn)、瘀斑，苔薄白或白膩。脈弦或澀。

阿魏酸是桂皮酸（又稱肉桂酸）的衍生物之一，能夠清除自由基，促進(jìn)清除自由基的酶的產(chǎn)生，增加谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶和醌還原酶的活性，并抑制酪氨酸酶活性，來調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能。阿魏酸主要存在于阿魏、川芎、石松、木賊、升麻、稻、洋蔥、萊菔、梓樹、白花春黃菊、光葉子花樣等植物的某個(gè)部分中。阿魏酸具有抗血小板聚集，增強(qiáng)前列腺素活性，鎮(zhèn)痛，緩解血管痙攣等作用，其在阿魏、當(dāng)歸、川芎、升麻、酸棗仁等中藥材中的含量較高，并且作為這些中藥材的有效成分。同時(shí)阿魏酸的毒性較低，所以在醫(yī)學(xué)方面有比較廣泛的用途。

對于阿魏酸的檢測，高效液相色譜法（HPLC法）是一種有效的方法，操作起來簡單快捷、結(jié)果準(zhǔn)確、精密度高。根據(jù)對文獻(xiàn)的分析可以得知，使用該方法進(jìn)行阿魏酸的檢測，流動相多選擇酸性系統(tǒng)，比如說甲醇-水-磷酸系統(tǒng)、甲醇-水-冰乙酸系統(tǒng)等，需要注意的是，試驗(yàn)過程中中可適當(dāng)調(diào)整甲醇的用量，以便于進(jìn)一步提升檢測結(jié)果。除了HPLC法之外，進(jìn)行阿魏酸的測定還可以使用薄層掃描法、薄層分光光度計(jì)法、高效毛細(xì)血管電泳法等。效果都比較好，但研究最廣泛的還是使用HPLC法進(jìn)行不同中藥制劑中阿魏酸的測定。[1]在本次研究中，使用HPLC法進(jìn)行太子參消徵丸中阿魏酸的測定，選擇乙腈為流動相A，0.085%磷酸為流動相B。梯度洗脫的標(biāo)準(zhǔn)按照以下進(jìn)行：0-38 min時(shí)，A為13%，B為87%；38-55 min時(shí)，A為60%，B為40%；55-65 min時(shí)，A為80%，B為20%；65-85 min時(shí)，A為13%，B為87%。柱溫35℃，流速1.0 mL/min；檢測波長為316 nm。理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。結(jié)果得知，阿魏酸在0.01339μg-0.1339μgμg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，且回收率為93.29%[4-6]。

總而言之，HPLC法簡便，準(zhǔn)確，靈敏，可用于太子參消徵丸中阿魏酸的含量測定。