高 飛 包書(shū)茵 奧烏力吉

1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，黑龍江哈爾濱 150040；2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古通遼 028000；3.內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古通遼 028000

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是自身免疫疾病中常見(jiàn)的炎癥關(guān)節(jié)病，可導(dǎo)致軟骨和骨骼損傷以及殘疾[1]。藥物治療主要包括緩解病情抗風(fēng)濕藥、非甾體類抗炎藥、糖皮質(zhì)激素等，但往往伴隨著白細(xì)胞和血小板減少、肝功能損害、藥物依賴等副作用[2]。JAK-STAT 信號(hào)通路是許多促炎性細(xì)胞因子發(fā)揮作用的主要途徑之一，參與調(diào)節(jié)RA 的病理生理過(guò)程。本文將近年來(lái)中藥經(jīng)JAK-STAT 信號(hào)通路治療RA的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，旨在為中藥治療RA 的相關(guān)研究提供參考。

1 JAK-STAT 信號(hào)通路概述

JAK-STAT 通路主要由酪氨酸激酶相關(guān)受體、JAKs 和STATs 三個(gè)部分構(gòu)成。JAK 是JAK/STAT 通路的主要發(fā)起者，由四個(gè)成員組成：JAK1、JAK2、JAK3和TYK2，是非受體蛋白酪氨酸激酶，能夠通過(guò)轉(zhuǎn)磷酸化或自磷酸化使酪氨酸殘基磷酸化[3]。STAT 處于JAK下游，是細(xì)胞質(zhì)信號(hào)介質(zhì)和核轉(zhuǎn)錄因子。在激活之前，以非活性蛋白的形式存在于細(xì)胞質(zhì)中。在激活JAK相關(guān)的細(xì)胞因子受體后，STATs 結(jié)合有活性的磷酸化受體，進(jìn)而被JAKs 磷酸化。隨后，STATs 被二聚化并從胞質(zhì)溶膠轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核，與同源啟動(dòng)子元件結(jié)合，從而調(diào)節(jié)基因表達(dá)[4]。

2 JAK-STAT 信號(hào)通路與RA

功能失調(diào)的JAK-STAT 信號(hào)通路能夠使RA 成纖維樣滑膜細(xì)胞過(guò)度增殖，從而促進(jìn)滑膜炎、軟骨降解及骨質(zhì)破壞。白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-1、IL-6、IL-10 及干擾素（interferon，IFN）等致病因子通過(guò)不同途徑激活JAK-STAT 信號(hào)通路，從而在RA 疾病進(jìn)展中發(fā)揮生物作用[5]。

3 中醫(yī)藥經(jīng)JAK-STAT 信號(hào)通路治療RA 研究進(jìn)展

RA 屬中醫(yī)“痹癥”范疇，在《素問(wèn)·痹論》中記載“風(fēng)寒濕三氣雜至，合而為痹也”；《醫(yī)林繩墨·痹》：“久風(fēng)入中，肌肉不仁，所以為頑痹者也?！敝嗅t(yī)認(rèn)為RA主要是由風(fēng)、寒、濕侵襲人體，加之正氣不足或臟腑功能失調(diào)而致。中醫(yī)善以宣痹止痛、祛風(fēng)除濕為治療原則加以辨證施治，隨著現(xiàn)代研究高速發(fā)展，諸多學(xué)者將臨床經(jīng)驗(yàn)深入到機(jī)制研究，取得了一定進(jìn)展。

3.1 中藥提取物

劉玉等[6]研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)體外培養(yǎng)的RA 成纖維樣滑膜細(xì)胞受白花丹素干預(yù)后，JAK2/STAT3 蛋白水平明顯降低。膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（collagen induced arthritis，CIA）大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞經(jīng)體外給予苦參堿后，JAK2、STAT1/3 的磷酸化水平下降[7]。研究證實(shí)白藜蘆醇能夠抑制CIA 大鼠滑膜組織STAT1 及STAT3蛋白的激活，從而降低RA 成纖維樣滑膜細(xì)胞增殖活力并誘導(dǎo)其凋亡[8]。采用黃芩苷對(duì)CIA 大鼠進(jìn)行干預(yù)后，其關(guān)節(jié)滑膜組織p-JAK/JAK、p-STAT3/STAT3 顯著降低，說(shuō)明黃芩苷通過(guò)抑制JAK-STAT 信號(hào)通路發(fā)揮作用[9]。實(shí)驗(yàn)證實(shí)羌活醇能夠與JAK2/3 直接結(jié)合，從而抑制JAK-STAT 信號(hào)通路[10]。仙茅苷可降低CIA大鼠的爪腫脹和關(guān)節(jié)炎評(píng)分，并顯著抑制JAK1、JAK3和STAT3 的蛋白表達(dá)水平[11]。肉桂醛通過(guò)降低血清IL-6 水平，抑制JAK2、STAT1 和STAT3 的磷酸化，調(diào)控JAK、STAT1/3 信號(hào)通路的激活，進(jìn)而降低關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度[12]。綠原酸和木犀草素是金銀花的主要成分，實(shí)驗(yàn)證實(shí)，兩者可協(xié)同誘導(dǎo)IL-1β 刺激的RSC-364細(xì)胞凋亡，同時(shí)JAK1、STAT3、p-STAT3 表達(dá)均顯著降低[13]。Wang 等[14]發(fā)現(xiàn)，姜黃素可能通過(guò)減弱JAK2磷酸化，下調(diào)STAT1 和STAT3 的DNA 結(jié)合活性，成纖維樣滑膜細(xì)胞增殖和DNA 合成。徐文俊[15]發(fā)現(xiàn)，青藤堿能夠抑制CIA 小鼠滑膜細(xì)胞中p-JAK1、p-STAT1、p-STAT3 表達(dá)水平，從而發(fā)揮治療RA 的作用。Su 等[16]通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)CIA 大鼠經(jīng)西藏貓乳干預(yù)后，JAK2和STAT3 的mRNA 和蛋白水平均顯著降低。鄧龍飛等[17]發(fā)現(xiàn)，威靈仙總皂苷對(duì)于佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠具有抗炎作用，其機(jī)制可能與抑制佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠JAK2、STAT3 mRNA 表達(dá)，并降低p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3 相對(duì)表達(dá)有關(guān)。范為民等[18]發(fā)現(xiàn)，經(jīng)漢防己甲素干預(yù)后，佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3 蛋白表達(dá)量減少，證實(shí)漢防己甲素可以抑制JAK2/STAT3 信號(hào)通路激活，進(jìn)而減輕滑膜炎癥，改善滑膜血管新生。另有研究表明，芫花素對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠JAK2、STAT3 的表達(dá)及磷酸化有明顯的抑制作用[19]。

3.2 中藥復(fù)方/制劑

閆國(guó)強(qiáng)等[20]證實(shí)，與模型組相比，通痹膠囊能夠有效降低佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠血清及滑膜組織中IL-6、IFN-γ 水平，并抑制滑膜組織中JAK2、STAT3 蛋白磷酸化。痹證寧方聯(lián)合甲氨蝶呤干預(yù)風(fēng)寒濕痹證CIA 大鼠后，能夠抑制JAK3、STAT3 合成，從而抑制JAKSTAT 信號(hào)通路[21]。何蓮花等[22]通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，二妙散能夠顯著下調(diào)腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α 誘導(dǎo)的RA 成纖維樣滑膜細(xì)胞中JAK1、STAT1、STAT6 的磷酸化表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)表明，隨著風(fēng)濕定膠囊劑量的增加，RA 大鼠足腫脹體積均逐漸減小，關(guān)節(jié)滑膜組織中p-JAK3、p-STAT3 的蛋白表達(dá)水平均逐漸下調(diào)，提示風(fēng)濕定膠囊可能通過(guò)調(diào)控JAK/STAT 信號(hào)通路，進(jìn)而發(fā)揮其抑制炎癥、延緩關(guān)節(jié)破壞的作用[23]。桂昆風(fēng)濕合劑含藥血清能夠使成纖維樣滑膜細(xì)胞促凋亡蛋白Bax 和caspase-3 表達(dá)升高，抗凋亡蛋白Bcl-2 表達(dá)降低，并抑制p-JAK2、p-STAT3 表達(dá)[24]。楊爽[25]采用Western blot 檢測(cè)TNF-α 刺激后的MH7A 細(xì)胞，經(jīng)桂枝芍藥知母湯處理后JAK2、STAT3 蛋白表達(dá)有降低趨勢(shì)，并具有濃度依賴性。王永輝等[26]研究發(fā)現(xiàn)，風(fēng)濕寧膠囊可促進(jìn)寒濕痹阻型RA 模型大鼠負(fù)反饋調(diào)節(jié)因子SOCS3 蛋白及mRNA 的表達(dá)，抑制JAK2、STAT3 蛋白及mRNA 的過(guò)表達(dá)，可能是其治療RA 的重要機(jī)制之一。姜玉寶[27]通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)斷藤益母湯干預(yù)組CIA 大鼠JAK2、STAT3 的基因和磷酸化水平較模型組降低，說(shuō)明斷藤益母湯對(duì)JAK/STAT通路有抑制作用。五味溫通除痹膠囊可改善佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠關(guān)節(jié)軟骨損傷程度，抑制JAK2、STAT3 mRNA的表達(dá)及磷酸化[28]。Li 等[29]研究發(fā)現(xiàn)，新痹通靈能夠抑制CIA 大鼠IL-1β 和IL-6 水平，并顯著提高IL-10和IL-4 水平，體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明新痹通靈對(duì)成纖維樣滑膜細(xì)胞增殖和凋亡的影響是通過(guò)抑制p-JAK2和p-STAT3 的水平來(lái)實(shí)現(xiàn)。二十五味驢血丸是一種傳統(tǒng)的藏族專利處方藥，實(shí)驗(yàn)證實(shí)其能夠顯著降低CIA大鼠血清促炎性細(xì)胞因子（TNF-α、IL-6 和IL-17）水平，而抗炎細(xì)胞因子IL-10 則顯著增加，Bax、SOCS1 和SOCS3 蛋白表達(dá)水平上調(diào)。同時(shí)，滑膜組織中p-JAK2/JAK2 和p-STAT3/STAT3 蛋白水平顯著降低，進(jìn)而抑制滑膜組織的炎癥反應(yīng)并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[30]。Yang 等[31]發(fā)現(xiàn)，蒙藥中倫阿湯可抑制CIA 大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞增殖，并降低JAK2、STAT1 和STAT3 mRNA 的表達(dá)以及磷酸化JAK2、STAT1 和STAT3 蛋白水平。

4 小結(jié)及展望

中藥單體及復(fù)方/制劑在治療RA 方面已經(jīng)取得了令人矚目的成果，從中醫(yī)中藥中尋找成本低、療效好、副作用小的治療方法已成為RA 患者及研究學(xué)者的一種迫切需求。而將JAK-STAT 信號(hào)通路作為切入點(diǎn)，篩選臨床中應(yīng)用有效的單味中藥或復(fù)方，借助現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室技術(shù)，從多角度深入研究，對(duì)挖掘中醫(yī)藥治療RA 的潛在價(jià)值具有重要意義。