方震，楊雪，藺曉源，易健*

(1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長(zhǎng)沙 410208；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南 長(zhǎng)沙 410007)

近年來(lái)，隨著人類(lèi)生活方式的改變和人口預(yù)期壽命的增加，未來(lái)幾十年里中國(guó)高血壓的患病率也將逐漸升高。雖然高血壓患者的接受率和治療率得到了提高，但絕對(duì)比率卻依然不容樂(lè)觀[1]，其可導(dǎo)致嚴(yán)重的心血管疾病，甚至死亡[2]。但目前現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)于高血壓的病因及發(fā)病機(jī)制認(rèn)識(shí)并不明確，并且高血壓的藥物防治亦存在諸多不足。高血壓屬中醫(yī)“眩暈”“頭痛”等的范疇，中醫(yī)辨證常將其分為痰濕壅盛型、陰虛陽(yáng)亢型、肝火亢盛型、和陰陽(yáng)兩虛型四種[3]。而選擇并建立合適的高血壓動(dòng)物模型，尤其是病證結(jié)合的動(dòng)物模型，成為中醫(yī)藥防治高血壓發(fā)病機(jī)制研究及新藥研發(fā)的關(guān)鍵。因此本文將目前研究中常用的高血壓疾病動(dòng)物模型及其中醫(yī)病證結(jié)合動(dòng)物模型的應(yīng)用簡(jiǎn)要介紹如下，以期能為高血壓病的中西醫(yī)防治基礎(chǔ)研究提供有效參考。

1 高血壓疾病動(dòng)物模型

1.1 自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats，SHR)

SHR大鼠模型是目前最常見(jiàn)的且應(yīng)用最多的模型，SHR是用一只收縮壓持續(xù)在150～175 mmHg的雄性Wistar京都種大鼠與收縮壓為130～140 mmHg的雌性Wistar京都種大鼠交配，得到收縮壓都大于150 mmHg的子代，再選用血壓較高的大鼠進(jìn)行近親交配，依次進(jìn)行這種選擇性近親交配20代而獲得穩(wěn)定的高血壓遺傳性，其血壓升高是由多基因遺傳決定的，在發(fā)病機(jī)制、外周血管阻力的變化、鹽敏感性以及并發(fā)癥方面都與人類(lèi)高血壓病高度類(lèi)似，是目前研究高血壓病發(fā)病機(jī)制和篩選降壓藥物的理想動(dòng)物模型。SHR高血壓的形成與腎素-血管緊張素系統(tǒng) (RAS) 的活性過(guò)度增加、心肌組織內(nèi)皮素受體的減少、絲裂素活化蛋白激酶表達(dá)增強(qiáng)以及絲裂素活化蛋白激酶磷酸酶的表達(dá)下降、阻力血管結(jié)構(gòu)改變微血管痙攣、狹窄甚至閉塞等原因相關(guān)。其中RAS的活性增高是高血壓形成和維持的重要原因。相關(guān)研究表明，SHR的血壓隨著周齡升高，會(huì)激活RAS[4]。而RAS元件基因的過(guò)表達(dá)可導(dǎo)致心肌纖維化，最終會(huì)導(dǎo)致心肌肥大[5]。這些研究對(duì)高血壓的發(fā)病機(jī)制、高血壓的治療以及新藥的開(kāi)發(fā)等研究有重大意義。SHR還存在明顯的血管功能障礙，容易引起心、腦、腎等多種器官的并發(fā)癥。譚文鵬等[6]研究發(fā)現(xiàn)SHR心肌組織中miR-133a的表達(dá)水平顯著降低,最終大鼠因心力衰竭而死亡。王海燕等[7]研究發(fā)現(xiàn)SHR大鼠腦基底動(dòng)脈腦血管對(duì)縮血管物質(zhì)的反應(yīng)性明顯降低，最終大鼠出現(xiàn)腦梗死。宋曉紅等[8]研究結(jié)果顯示SHRs會(huì)出現(xiàn)腎臟和胰腺微循環(huán)功能損害，使其血流灌注水平降低，且胰腺相比于腎臟微循環(huán)損害更加嚴(yán)重，另有研究也表明胰腺的損害可能與高血壓有關(guān)而產(chǎn)生胰島素抵抗。這些研究都說(shuō)明SHR可以出現(xiàn)心、腦、胰腺多種器官的并發(fā)癥，對(duì)高血壓并發(fā)癥的發(fā)病機(jī)制及其防治的研究有著重大意義。

以上的研究發(fā)現(xiàn)，SHR可以廣泛的運(yùn)用于高血壓的發(fā)病機(jī)制、心腦腎等器官并發(fā)癥的研究以及不同機(jī)制降壓藥物的篩選，是作為高血壓病動(dòng)物模型的首選。但由于SHR的培育條件高、造價(jià)貴，目前大量使用還存在一定困難，一些相關(guān)課題由于成本原因也無(wú)法使用。

1.2 腎性高血壓大鼠模型(reno vascular hypertension，RVH)

RVH是一側(cè)或兩側(cè)腎動(dòng)脈主干或分支狹窄、阻塞導(dǎo)致腎血管流量減少引起腎缺血發(fā)生的高血壓, 為繼發(fā)性高血壓最常見(jiàn)的病因[9]。兩腎一夾(two kidney one clip,2K1C)RVH大鼠模型與雙腎雙夾(two kidney two clip,2K2C)RVH大鼠模型較為常用。2K1C是經(jīng)典的制備高血壓模型的方法,因?yàn)樵撃Ｐ偷闹苽洳僮骱?jiǎn)單且成功率高，應(yīng)用十分廣泛。李立強(qiáng)等[10]通過(guò)腹部正中作為開(kāi)口途徑，使用鈦合金血管夾左腎動(dòng)脈，從而建立2K1C大鼠模型并用Vevo 2100彩色多普勒超聲快速評(píng)價(jià)2K1C大鼠模型的造模是否成功，動(dòng)態(tài)的觀察腎臟血液的灌注，具有較高的準(zhǔn)確性，可以提高造模的成功率。RAS系統(tǒng)與高血壓的發(fā)生有密切的關(guān)系，Chen L J等[11]研究表明RAS系統(tǒng)中的重要調(diào)控因子血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)及其相關(guān)酶ACE2的表達(dá)失衡是引發(fā)高血壓病的一個(gè)重要原因，且ACE2作為RAAS的負(fù)調(diào)節(jié)因子，ACE2/Apelin信號(hào)通路對(duì)高血壓具有積極保護(hù)作用。石曉翠等[12]通過(guò)研究闡明了AngⅡ?qū)AS系統(tǒng)的直接作用為高血壓發(fā)病機(jī)制的研究和理解補(bǔ)充了新的理論，對(duì)研究高血壓病新型治療手段和治療藥物有重要參考價(jià)值。因其操作的簡(jiǎn)便性和很高的成功率RVH大鼠模型還可廣泛應(yīng)用于高血壓心腦腎相關(guān)并發(fā)癥的研究，如利用RVH大鼠建立的腦動(dòng)脈瘤模型及腦動(dòng)脈瘤機(jī)制探討[13]。

雖然RVH不具備自發(fā)性形成高血壓的特點(diǎn)，但與人類(lèi)高血壓的病理過(guò)程依然有可比性，且因其制備方法簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)，可以大量使用。其中2K1C模型是目前國(guó)際上最常用的高血壓動(dòng)物模型之一。

1.3 其他

除去以上兩種經(jīng)典模型外，目前科學(xué)研究中還有一些較為常用的高血壓動(dòng)物模型。例如N-硝基-L-精氨酸甲酯誘導(dǎo)的高血壓模型，該模型尤其適合于高血壓中一氧化氮系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)的研究[14]；醋酸去氧皮質(zhì)酮鹽敏感性高血壓模型對(duì)于高血壓水鈉代謝相關(guān)機(jī)制以及相關(guān)藥物的治療研究[15]；此外還有神經(jīng)源性高血壓大鼠模型、應(yīng)激性高血壓大鼠模型、飲食性高血壓大鼠模型以及特殊的妊娠高血壓大鼠模型等[16-19]。

2 高血壓中醫(yī)病證結(jié)合動(dòng)物模型

2.1 肝陽(yáng)上亢證模型

中醫(yī)沒(méi)有高血壓的具體病名，但根據(jù)其不同的癥狀表現(xiàn)可分為不同的證型。高血壓肝陽(yáng)上亢型可見(jiàn)頭脹痛, 頭重腳輕, 頭暈?zāi)垦?面紅目赤, 性急易怒, 舌紅少苔脈弦等“上實(shí)”癥候，伴見(jiàn)腰膝酸軟、腰痛、耳鳴、多夢(mèng)失眠、脈細(xì), 口干苦等“下虛”癥候。目前構(gòu)建高血壓肝陽(yáng)上亢型大鼠模型主要為RVH大鼠模型以及SHR。姚佳梅等[20]用附子湯對(duì)SHR進(jìn)行灌胃，SHR出現(xiàn)血壓穩(wěn)定升高、易激惹程度增加、提起頸部欲咬人、旋轉(zhuǎn)時(shí)間縮短、痛閾降低等近似人類(lèi)高血壓病肝陽(yáng)上亢證的特征，從而復(fù)制出SHR肝陽(yáng)上亢型大鼠。田艷鵬[21]采用2K1C高血壓大鼠模型加灌附子湯法也同樣復(fù)制了高血壓肝陽(yáng)上亢證大鼠模型，其復(fù)制的大鼠模型同樣具有血壓明顯升高 ,不同程度激惹、眼結(jié)合膜充血、旋轉(zhuǎn)時(shí)間明顯縮短及口渴、消瘦等肝陽(yáng)上亢等證候特征。兩組研究制備的大鼠模型第四周與第六周所得出的各項(xiàng)數(shù)據(jù)數(shù)值都沒(méi)有太大出入，均具有病證結(jié)合的特點(diǎn)，而2K2C高血壓大鼠模型加灌附子湯法還具有病理生理相結(jié)合的優(yōu)點(diǎn)。但由于手術(shù)損傷可造成大鼠死亡，故目前多采用SHR加灌附子湯的模型。

2.2 痰濕壅盛證模型

朱丹溪在《丹溪心法》中有“無(wú)痰不作?！?，故痰濕是高血壓的重要致病因素，痰濕壅盛型高血壓可見(jiàn)眩暈頭痛、頭重如裹、胸悶納呆、嘔吐痰涎、舌胖苔膩，脈滑等癥候。目前研究中常用的制備痰濕壅盛型高血壓大鼠的方法是通過(guò)高脂飲食建立痰濕證大鼠模型，吳賽等[22]用由12%豬油、5%蔗糖、5%奶粉、5%花生粉、10%雞蛋、1%麻油、2%食鹽、60%普通飼料組成的高脂飼料喂養(yǎng)建立了痰濕壅盛型大鼠，其制備的大鼠模型具有飲食減少、體質(zhì)量增加、活動(dòng)度降低、反應(yīng)慢等癥狀。陳騰蛟與徐男[23]分別給予大鼠高脂飼料、高脂高鹽飼料和高脂高糖飼料來(lái)建立痰濕壅盛型高血壓大鼠，其中以高脂高鹽飲食誘導(dǎo)建立的痰濕壅盛型高血壓大鼠動(dòng)物模型最符合中醫(yī)痰濕壅盛型高血壓的辨證分型特點(diǎn),且成模率較高。目前使用喂養(yǎng)高脂飼料制作痰濕壅盛型高血壓模型的方法已被運(yùn)用于相關(guān)實(shí)驗(yàn)中，如半夏白術(shù)天麻湯對(duì)痰濕壅盛型高血壓的作用以及對(duì)下丘腦的影響即采用的此種方法[24-25]。

2.3 血瘀證模型

虞摶提出“因瘀致?！钡膶W(xué)術(shù)思想，并使用“行血清經(jīng)”的方法治療，故血瘀也是發(fā)病的重要影響因素。血瘀證型的高血壓可見(jiàn)胸中刺痛、疼痛拒按且夜間痛甚、面色黧黑、舌質(zhì)紫暗或有瘀點(diǎn)瘀斑等癥候。王麗穎等[26]通過(guò)流行病學(xué)調(diào)查分析，瘀血阻絡(luò)證型占高血壓患者的15.12%。目前研究中的血瘀型高血壓大鼠模型的建立主要是在SHR的基礎(chǔ)上通過(guò)多因素復(fù)合作用，例如饑餓、疲勞、寒濕、驚嚇，高脂飲食等多重因素的影響下建立的[27]。而且缺乏關(guān)于血瘀型高血壓大鼠模型的相關(guān)文獻(xiàn)研究，但蔡大可等[28]研究復(fù)方芪麻膠囊對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠心臟血流動(dòng)力學(xué)及對(duì)氣虛血瘀證大鼠血液流變學(xué)的影響中通過(guò)多因素復(fù)合作用建立氣虛血瘀型高血壓大鼠模型。張魁星等[29]通過(guò)對(duì)Wistar大鼠的腎動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎并進(jìn)行高鹽飲食進(jìn)行飼養(yǎng)，術(shù)后4周測(cè)量大鼠血壓均在140 mmHg以上，并采集視網(wǎng)膜圖像發(fā)現(xiàn)存在明顯的瘀血出血現(xiàn)象，此研究說(shuō)明采集視網(wǎng)膜圖像觀察瘀血現(xiàn)象可以作為血瘀證模型的評(píng)價(jià)指標(biāo)。

2.4 陰虛陽(yáng)亢證模型

《素問(wèn)》曰：“陰平陽(yáng)秘，精神乃治；陰陽(yáng)離決，精氣乃絕。”故中醫(yī)認(rèn)為陰平陽(yáng)秘與陰陽(yáng)調(diào)和是人體健康的重要因素，陰陽(yáng)失衡必然會(huì)導(dǎo)致疾病的發(fā)生。在《中藥新藥治療高血壓的臨床研究指導(dǎo)原則》中陰虛陽(yáng)亢也是高血壓中醫(yī)證型的一種，其主癥有眩暈、頭痛、腰酸、膝軟、五心煩熱，次證有心悸、失眠、耳鳴、健忘、舌紅、少苔,脈弦細(xì)而數(shù)。陰虛陽(yáng)亢證型高血壓大鼠陽(yáng)亢癥狀較為容易分辨且易于表現(xiàn)，目前陰虛陽(yáng)亢證型高血壓大鼠建模方法大多與肝陽(yáng)上亢型高血壓大鼠一致，多以2K1C高血壓大鼠模型加灌附子湯法建立大鼠模型或以SHR加灌附子湯的方法造模[30-32]。如周丹等[33]即通過(guò)SHR加灌附子湯的方法進(jìn)行造模，并對(duì)小鼠的易激惹的程度進(jìn)行了分級(jí)。

2.5 高血壓陰陽(yáng)兩虛證模型

王冰曰：“無(wú)陰則陽(yáng)無(wú)以生，無(wú)陽(yáng)則陰無(wú)以化?！惫嗜梭w陰陽(yáng)處于平衡互根的狀態(tài)。若全身陰陽(yáng)虛衰，則臟腑功能失調(diào)，久病及腎，故出現(xiàn)腰膝酸軟、頭暈耳鳴、畏寒肢冷等虛損癥候。據(jù)《中藥新藥治療高血壓的臨床研究指導(dǎo)原則》陰陽(yáng)兩虛型高血壓主證為眩暈、頭痛、腰酸、膝軟、畏寒肢冷，次證有耳鳴、心悸、 氣短、夜尿頻、舌淡、苔白, 脈沉細(xì)弱，由于這些癥狀在動(dòng)物模型上難以體現(xiàn)，目前在知網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫(kù)的相關(guān)文獻(xiàn)中并沒(méi)有找到具體關(guān)于陰陽(yáng)兩虛型高血壓大鼠的研究進(jìn)展。相關(guān)實(shí)驗(yàn)闡明SHR是最接近人類(lèi)高血壓發(fā)病情況的一種模型，灌服中藥桂附八味丸全方能起到最好的糾正其血壓作用，由于桂附八味丸屬陰、陽(yáng)雙補(bǔ)的中藥,因此可以認(rèn)為SHR可屬高血壓陰陽(yáng)兩虛模型。

3 小結(jié)與展望

西醫(yī)目前常用的幾種高血壓大鼠模型還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠用于高血壓中醫(yī)藥應(yīng)用的研究，但對(duì)于高血壓動(dòng)物模型的中醫(yī)藥研究，目前為止已經(jīng)可以復(fù)制出十分相似動(dòng)物模型的證型僅有肝陽(yáng)上亢型與痰濕壅盛型，通過(guò)手術(shù)造成腎動(dòng)脈狹窄所形成的高血壓與人類(lèi)高血壓的發(fā)病情況也不盡一致,對(duì)于伴有腎虛癥狀的高血壓模型還是不能很精準(zhǔn)的建造出對(duì)應(yīng)的具有特異性的模型，只通過(guò)以方測(cè)證的方法，通過(guò)藥物的功效來(lái)推測(cè)所用到的大鼠模型具有哪些相應(yīng)證型表現(xiàn)，其科學(xué)性與實(shí)用性還存在一定的局限。且中醫(yī)疾病的病機(jī)是不斷變化的，在高血壓這一疾病中，病人在疾病的發(fā)展過(guò)程中證型會(huì)發(fā)生改變，而單純的某一證型的大鼠模型難以反映出這一動(dòng)態(tài)變化過(guò)程。由此得出，目前所常用的高血壓動(dòng)物模型難以滿足中醫(yī)藥研究的發(fā)展，還需要探索出更多適合中醫(yī)理論和病證的模型。

雖然目前關(guān)于高血壓動(dòng)物模型的研究和應(yīng)用較少，局限于肝陽(yáng)上亢型與痰濕壅盛型，且關(guān)于其他證型的動(dòng)物模型及應(yīng)用都存在一定的缺失，但作為目前與人類(lèi)發(fā)病情況最相似的SHR，或許可以從該模型入手，針對(duì)中醫(yī)的病因和發(fā)病機(jī)制，在SHR的基礎(chǔ)上復(fù)制出與中醫(yī)相適應(yīng)的動(dòng)物模型，這樣才能為高血壓的中醫(yī)防治與臨床方面研究的突破打好基礎(chǔ)。