王鳳娟 何衛(wèi)紅

疫病監(jiān)測(cè)采樣的一般原則與采樣方法

王鳳娟①何衛(wèi)紅②

（①山東省曹縣動(dòng)物防疫監(jiān)督所 274400 ②山東省菏澤市動(dòng)物衛(wèi)生技術(shù)中心）

在動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)中，采樣方法、采樣部位、采樣數(shù)量和樣品質(zhì)量直接決定監(jiān)測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和監(jiān)測(cè)結(jié)論的科學(xué)性。因此，對(duì)采樣人員、采樣方法、采樣技術(shù)都有特定的要求。

1 采樣的一般原則

（1）凡是血液凝固不良、天然孔流血的病、死動(dòng)物，應(yīng)耳尖采血涂片，首先排除炭疽，炭疽病死的動(dòng)物嚴(yán)禁剖檢。（2）采樣時(shí)應(yīng)從胸腔到腹腔，先采實(shí)質(zhì)臟器，盡量做到無(wú)菌，避免外源性的污染，最后采腔腸器官等內(nèi)容物易造成污染的組織、內(nèi)容物。（3）采取的病料必須有代表性，采取的臟器組織應(yīng)為病變明顯部位。取材時(shí)應(yīng)根據(jù)不同疫病或檢驗(yàn)?zāi)康?，采其相?yīng)血樣、活體組織、臟器、腸內(nèi)容物、分泌物、排泄物或其他材料。肉眼難以判定病因時(shí)，應(yīng)全面系統(tǒng)采集病料。（4）病料最好在使用治療藥物前采取，用藥后會(huì)影響病料中病原微生物的檢出。死亡動(dòng)物的內(nèi)臟病料采取，最遲不超過(guò)死后6h(尤其在夏季)，否則，尸體腐敗，難以采到合格的病料。（5）血液樣品在采集前一般禁食8h。采集血樣時(shí)，應(yīng)根據(jù)采樣對(duì)象、檢驗(yàn)?zāi)康募八柩看_定采血方法與采血部位。（6）采樣時(shí)應(yīng)考慮動(dòng)物福利和環(huán)境的影響，防止污染環(huán)境和疫病傳播，做好環(huán)境消毒和廢棄物的處理，同時(shí)做好個(gè)人防護(hù)預(yù)防人畜共患病感染。

2 采樣的種類(lèi)和時(shí)間

采樣前，必須考慮采樣目的，根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目和要求的不同，選擇適當(dāng)?shù)臉颖竞筒蓸訒r(shí)機(jī)是十分重要的。應(yīng)嚴(yán)格按規(guī)定時(shí)間采樣，合理采集樣本。（1）當(dāng)疫病診斷時(shí)，采集病死動(dòng)物的有病變的臟器組織、血清和抗凝血。采集樣品的大小及量要滿足診斷的需要，以及必要的復(fù)檢和留樣備份。①一般情況下，對(duì)于采集的常規(guī)病料組織，有臨診癥狀需要做病原分離的，樣品必須在病初的發(fā)熱期或癥狀典型時(shí)采樣，病死的動(dòng)物，應(yīng)立即采樣。②采集血液樣品如果是用于病毒檢驗(yàn)樣品，在動(dòng)物發(fā)病初體溫升高期間采集，對(duì)于沒(méi)有癥狀的帶毒動(dòng)物，一般在進(jìn)入隔離場(chǎng)后7d以前采樣，用于免疫動(dòng)物血清學(xué)診斷時(shí)，需采集雙份血清監(jiān)測(cè)比較抗體效價(jià)變化的，第一份血清采于發(fā)病初期并作凍結(jié)保存，第二份血清采于第一份血清后3~4周，雙份血清同時(shí)送實(shí)驗(yàn)室。③用于寄生蟲(chóng)檢驗(yàn)樣品，因不同的血液寄生蟲(chóng)在血液中出現(xiàn)的時(shí)機(jī)及部位各不相同。因此，需要根據(jù)各種血液寄生蟲(chóng)的特點(diǎn)，取相應(yīng)時(shí)機(jī)及部位的血制成血涂片和抗凝血，送實(shí)驗(yàn)室。（2）進(jìn)行免疫效果評(píng)價(jià)監(jiān)測(cè)時(shí)，動(dòng)物免疫后14~20d，隨機(jī)采集同群動(dòng)物血清樣品30份。（3）進(jìn)行疫情監(jiān)測(cè)或流行病學(xué)調(diào)查時(shí)，根據(jù)區(qū)域內(nèi)養(yǎng)殖場(chǎng)戶數(shù)量和分布，按一定比例隨機(jī)抽取養(yǎng)殖場(chǎng)戶名單，然后每個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)戶按估算的感染率，計(jì)算采樣數(shù)量，隨機(jī)采取。

3 采樣數(shù)量

（1）診斷時(shí)，1~5只(頭)病死動(dòng)物的有病變的器官組織、血清和抗凝血各10份。（2）免疫效果監(jiān)測(cè)時(shí)，每群血清樣品應(yīng)采集30份。（3）疫情監(jiān)測(cè)或流行病學(xué)調(diào)查時(shí)采集血清、各種拭子、體液、糞尿或皮毛樣品等，采樣數(shù)量可根據(jù)動(dòng)物年齡、季節(jié)、周邊疫情情況估算其感染率，然后計(jì)算應(yīng)采樣品數(shù)量。（4）當(dāng)種群疫病監(jiān)測(cè)凈化時(shí)，要制定疫病監(jiān)測(cè)凈化方案，按照方案確定的采樣次數(shù)和采樣日期，逐頭采樣。

（2020–03–24）

S8851.2+1

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