★ 彭文明 易徐航 張倫寧（萍鄉(xiāng)市食品藥品檢驗(yàn)所 江西 萍鄉(xiāng) 337000）

近年來，中藥注射劑的安全性越來越受到關(guān)注，特別是重金屬與有害元素的殘留問題。要建立中藥中重金屬元素與有害元素的限量控制標(biāo)準(zhǔn)，首先要建立較為先進(jìn)的各元素標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。目前重金屬與有害元素殘留測定方法主要有原子吸收法（AAS）、原子熒光法（AFS）、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法（ICP-OES）、電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）等，其中ICP-MS 以其靈敏度高、專屬性強(qiáng)，且一次能分析數(shù)十種元素而得到廣泛應(yīng)用［1-2］。電感耦合等離子體質(zhì)譜（inductively coupled plasma mass spectrometry，ICP-MS）是一種新型的元素和同位素分析技術(shù)，具有檢出限低、動態(tài)線性范圍寬、干擾少、分析精密度高和分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，可同時(shí)完成多元素的測定，具有極高的檢測效率，是痕量、超痕量元素分析領(lǐng)域中最先進(jìn)的方法［3-4］。目前，《中國藥典》（2015 年版第四部）對中藥注射劑中鉛、鎘、砷、汞、銅制定了限度標(biāo)準(zhǔn)，但其他元素還沒有法定限度標(biāo)準(zhǔn)。中藥注射劑中重金屬與有害元素污染來源很復(fù)雜，對重金屬與有害元素超標(biāo)的原因及對策的研究勢在必行。為

評價(jià)紅花注射劑中各元素情況，通過查閱文獻(xiàn)，本文采用微波消解法對樣品進(jìn)行前處理，同時(shí)采用ICP-MS 法測定紅花注射液中鉻（52Cr）、銅（63Cu）、鋅（66Zn）、鉬（98Mo）、鉛（208Pb）、鋇（138Ba）、硼（11B）、鋁（27Al）8 種元素的含量，以期為紅花注射液的質(zhì)量控制和臨床用藥安全提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

NexION350X 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（PerkinElmer 股份有限公司），MARS6 微波消解儀(美國CEM 公司)。硝酸為優(yōu)級純（北京化學(xué)試劑廠），ME-204（萬分之一天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司），電子分析天平CP225D（十萬分之一，賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司），酸度計(jì)（賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司）。鉻（52Cr）、銅（63Cu）、鋅（66Zn）、鉬（98Mo）、鉛（208Pb）、鋇（138Ba）、硼（11B）、鋁（27Al）、鍺（74Ge）、銦（115In）、鉍（209Bi）購于國家有色金屬及電子材料；甲醇、乙腈（HPLC 級，購于北京百靈威科技有限公司）；其他試劑均為分析純；水為I 級水。

2 方法與結(jié)果

2.1 ICP-MS 工作條件射頻功率為1 400 kW，等離子體氣：15.0 L/min；輔助氣：0.25 L/min；載氣：0.80 L/min；掃描方式為Full Quant，積分時(shí)間為100 ms，采集次數(shù)為3 次。

2.2 溶液的制備

2.2.1 供試品溶液的制備取待測樣品2.0 mL 置微波消解罐中，加5 %硝酸3 mL，雙氧水0.5 mL，按操作規(guī)程安裝好裝置，180 ℃、20 min 進(jìn)行消解，消解結(jié)束后，緩緩放氣，取出內(nèi)罐，置加熱板上，120 ℃加熱約10 min，放冷，溶液轉(zhuǎn)移置25 mL 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，同法制備試劑空白。

2.2.2 對照溶液的制備取11B、63Cu、66Zn、138Ba元素的單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（均為1 000 mg/L），用5 %硝酸稀釋成11B、63Cu、66Zn、138Ba 分別為10、50、100、250、500 ng/mL 系列對照溶液；52Cr、208Pb 分別為1、5、10、25、50 ng/mL 系列對照溶液；98Mo為0.1、0.5、1、2.5、5 ng/mL 系列對照溶液；27Al為100、500、1 000、2 500、5 000 ng/mL 系列對照溶液。

2.2.3 內(nèi)標(biāo)溶液的制備取74Ge、115In、209Bi 單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（均為1 000 mg/L），用5 %硝酸溶液制成濃度為74Ge、115In、209Bi（均為50 ng/mL）的混合溶液作為內(nèi)標(biāo)溶液。

2.3 線性關(guān)系考察取“2.2.2”項(xiàng)下系列對照溶液，按“2.1”項(xiàng)下條件進(jìn)行測定，儀器的內(nèi)標(biāo)進(jìn)樣管在儀器分析工作過程中始終插入混合內(nèi)標(biāo)溶液中，依次將各個(gè)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定,得出各元素線性回歸方程，見表1。

表1 8種元素線性范圍及相關(guān)系數(shù)

2.4 回收試驗(yàn)精密吸取已知含量亞寶藥業(yè)180911批號的紅花注射液2 mL 置微波消解罐中，共9 份，分 別 精 密 加 入11B、63Cu、66Zn、138Ba 250 ng/mL；52Cr、208Pb 25 ng/mL；27Al 2 500 ng/mL、98Mo 2.5 ng/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液各1 mL（27Al 2 680.6 ng/mL、11B 231.5 ng/mL、138Ba 153.9 ng/mL、52Cr 2 041.89 ng/mL、63Cu 60.53 ng/mL、98Mo 1.11 ng/mL、208Pb 13.50 ng/mL、66Zn 249.79 ng/mL），按“2.2.1”項(xiàng)下步驟操作，按“2.1”項(xiàng)下條件進(jìn)行測定，計(jì)算各元素的回收率及RSD 值，結(jié)果見表2。

表2 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=9）

2.5 精密度試驗(yàn)分別精密吸取11B、63Cu、66Zn、138Ba 250 ng/mL；52Cr、208Pb 25 ng/mL；27Al 2 500 ng/mL、98Mo 2.5 ng/mL 的混合對照溶液，搖勻。分別于1 d 內(nèi)和5d 內(nèi)用ICP-MS 測定，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算，其RSD值均<5 %，說明此方法精密度較好。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)精密吸取亞寶藥業(yè)180911 批號的紅花注射液2mL 置微波消解罐中（共6 份），按“2.2.1”項(xiàng)下步驟制備供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下條件，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定上述8 種元素，樣品中所含鉻（52Cr）、銅（63Cu）、鋅（66Zn）、鉬（98Mo）、鉛（208Pb）、鋇（138Ba）、硼（11B）、鋁（27Al）含量見表3。

表3 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

2.7 方法檢出限取試劑空白連續(xù)測定20 次，所得的標(biāo)準(zhǔn)偏差的3 倍對應(yīng)的濃度，計(jì)算鉻（52Cr）、銅（63Cu）、鋅（66Zn）、鉬（98Mo）、鉛（208Pb）、鋇（138Ba）、硼（11B）、鋁（27Al）各元素的檢出限，依次為0.016、2.265、0.333、0.794、0.635、0.056、5.548、15.039 ng/mL。

2.8 樣品的測定精密量取紅花注射液2 mL，按“2.2.1”項(xiàng)下步驟制備供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下條件，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定上述8 種元素，樣品中所含鉻（52Cr）、銅（63Cu）、鋅（66Zn）、鉬（98Mo）、鉛（208Pb）、鋇（138Ba）、硼（11B）、鋁（27Al）含量見表4。

表4 紅花注射液中8種元素測定結(jié)果

3 小結(jié)

微波消解技術(shù)具有溶樣快速和處理徹底等優(yōu)點(diǎn)，其結(jié)合電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）測定重金屬元素日益得到廣泛應(yīng)用［5-6］，故本文采用微波消解法對樣品進(jìn)行前處理，電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）測定，可有效去除基質(zhì)干擾，結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好。本文比較了外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法2種測定方法，結(jié)果顯示內(nèi)標(biāo)法具有更高的精密度和準(zhǔn)確性。內(nèi)標(biāo)元素選擇的原則主要包括：電離電位、質(zhì)量數(shù)、沸點(diǎn)相近。綜合考慮，最終采用74Ge、115In、4Bi 為內(nèi)標(biāo)元素進(jìn)行校正。目前國內(nèi)外對注射液的重金屬及有害元素限量規(guī)定較少，而國際上對中藥制劑僅規(guī)定的為口服劑型的限量要求，對中藥注射劑并無明確規(guī)定［7］。本實(shí)驗(yàn)采用ICP-MS 法，建立了紅花注射液中8 種元素的測定法，操作簡便快速，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，為中藥注射劑的質(zhì)量評價(jià)提供了新的思路。