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        不同免疫學(xué)檢驗(yàn)方法對于結(jié)核病的臨床價(jià)值研究

        2020-12-19 05:14:10王永春
        大醫(yī)生 2020年17期
        關(guān)鍵詞:蛋白芯片膠體金結(jié)核

        王永春

        (濰坊市腦科醫(yī)院,山東濰坊 261000)

        結(jié)核病威脅著人們的健康,降低了人們的生活質(zhì)量。研究發(fā)現(xiàn),我國具有龐大的結(jié)核菌感染群體,可見我國結(jié)核病的防治和診療已經(jīng)到了刻不容緩的時(shí)刻[1]。就目前來說,我國結(jié)核病的診斷仍是一個(gè)難題,醫(yī)生只能憑借患者的體征和痰涂片培養(yǎng)去分析患者的結(jié)核病類型,具有一定的誤差概率。隨著科技的提升,影像學(xué)的出現(xiàn)改變了醫(yī)生的疾病診斷方式,使得結(jié)核病的檢查更加便捷、高效,但由于痰培養(yǎng)需時(shí)較長,再加上患者的陽性反應(yīng)率較高,所以仍難以在第一時(shí)間確診患者的結(jié)核病類型。

        結(jié)核病被列為免疫介導(dǎo)慢性疾病的范疇,當(dāng)前最佳的診斷方式是免疫學(xué)檢驗(yàn),該方式已經(jīng)在各個(gè)醫(yī)療機(jī)構(gòu)中廣泛推廣[2]。需要注意的是,免疫學(xué)檢驗(yàn)方法有多種,其中最為認(rèn)可的方法有兩種:第一種是蛋白芯片法;第二種是膠體金法。蛋白芯片法又可分為三種抗體形式,即蛋白16 kD、蛋白38 kD和結(jié)核菌脂阿拉伯甘露糖(LAM),任一形式均可確定患者是否被感染。膠體金色法的原理是葡萄球菌A蛋白(SPA)膠體金綴合物可使得已經(jīng)形成結(jié)合的結(jié)核IgG抗體表現(xiàn)為紅色,所以顏色的變化就代表著患者是否被感染[3]。本研究以2019年10月至2020年4月因結(jié)核病而入濰坊市腦科醫(yī)院治療的90例患者為研究對象,對其實(shí)施差異化的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法,分別記錄差異化檢驗(yàn)方法下結(jié)核病的陽性反應(yīng)率數(shù)據(jù),現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取2019年10月至2020年4月因結(jié)核病而入濰坊市腦科醫(yī)院治療的90例患者為研究對象納入結(jié)核組,其中男性47例,女性43例,年齡21~87歲,平均年齡(35.54±10.02)歲,90例患者中,3例患者患有骨關(guān)節(jié)結(jié)核,5例患者患有結(jié)核性胸膜炎,7例患者患者結(jié)核性腦膜炎,剩余的75例患者為肺結(jié)核。同期另選取90例非結(jié)核患者作為對照組,其中男性45例,女性45例;年齡33~86歲,平均年齡(47.77±6.02)歲,對照組患者未患有結(jié)核病,27例患者表現(xiàn)為慢性支氣管炎,10例患者表現(xiàn)為塵肺,10例患者表現(xiàn)為支氣管肺炎,18例患者表現(xiàn)為肺癌,13例患者表現(xiàn)為急性下呼吸道感染,12例患者表現(xiàn)為淋巴結(jié)炎。

        納入標(biāo)準(zhǔn):①患者符合2002版《內(nèi)科學(xué)》[4]的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn);②患者同意整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程;③患者積極配合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的采集;④患者未發(fā)現(xiàn)其它并發(fā)癥。

        排除標(biāo)準(zhǔn):①患者存在嚴(yán)重的并發(fā)癥;②患者存在本實(shí)驗(yàn)抵觸情緒;③患者不符合疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)。

        1.2 方法

        1.2.1 蛋白芯片法 借助PBT-X2型芯片閱讀儀(貴州信邦制藥股份有限公司)對患者血清進(jìn)行檢測,搭配使用結(jié)核分枝桿菌IgG抗體檢測試劑盒(貴州信邦制藥股份有限公司),其中特異性抗體有三種,第一是LAM;第二是蛋白16 kD;第三是38 kD。以上三種抗體出現(xiàn)任一陽性結(jié)果就代表著患者為陽性,如果以上三種抗體檢測結(jié)果均表現(xiàn)為陰性,就代表著患者為陰性。

        1.2.2 膠體金法

        借助迪比多試劑盒(貴州信邦制藥股份有限公司)實(shí)施患者檢測,通過斑點(diǎn)免疫膠體金滲濾技術(shù)去分離結(jié)核桿菌膜蛋白,并在硝酸纖維素膜幫助下進(jìn)行固定,此時(shí)膜下的結(jié)核抗原將與之前分離的結(jié)核桿菌膜蛋白發(fā)生特異性結(jié)合,隨后葡萄球菌A蛋白(SPA)膠體金綴合物可使得已經(jīng)形成結(jié)合的結(jié)核IgG抗體表現(xiàn)為紅色,所以,如果檢測過程中出現(xiàn)紅色斑點(diǎn),就意味著患者為陽性,反之則患者為陰性。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

        采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,計(jì)數(shù)資料采用[例(%)]表示,行χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        對于結(jié)核組患者來說,其膠體金法陽性反應(yīng)率數(shù)據(jù)達(dá)到了71.11%,對應(yīng)的比例是64/90,而對照組的膠體金法陽性反應(yīng)率數(shù)據(jù)為7.80%,對應(yīng)的比例是7/90,結(jié)核組顯著優(yōu)于對照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);另外,LAM數(shù)據(jù)中,結(jié)核組蛋白芯片法反應(yīng)率為47.78%,對應(yīng)的比例是43/90,蛋白16 kD數(shù)據(jù)中,結(jié)核組蛋白芯片法反應(yīng)率為26.67%,對應(yīng)的比例是24/90,蛋白38 kD數(shù)據(jù)中,結(jié)核組蛋白芯片法反應(yīng)率為46.67%,對應(yīng)的比例是42/90,以上數(shù)據(jù)對照組對應(yīng)的蛋白芯片法反應(yīng)率分別是 8.90%(8/90)、0.00%(0/90)、8.90%(8/90),結(jié)核組顯著優(yōu)于對照組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。

        表1 差異化檢驗(yàn)方法下統(tǒng)計(jì)結(jié)核病的陽性反應(yīng)率[例(%)]

        3 討論

        結(jié)核病屬于致命傳染病的一種,其主要是由分歧桿菌引發(fā)的,可借助影像學(xué)或者顯微鏡培養(yǎng)法進(jìn)行判斷。在臨床上,結(jié)核病表現(xiàn)出了低熱和咳嗽等癥狀,部分患者也出現(xiàn)了夜間盜汗癥狀,必須得到重視。當(dāng)前來說,結(jié)核病是我國致死率最高的感染疾病,如不及時(shí)進(jìn)行有效的預(yù)防和控制,必將危及人們的生命。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),我國肺結(jié)核患病率數(shù)據(jù)為421/10萬,菌陽患病率數(shù)據(jù)為171/10萬,涂陽性肺結(jié)核患病率達(dá)到了154/10萬[5]。由此可見,我國的基礎(chǔ)衛(wèi)生狀況仍存在嚴(yán)重的不足,且群眾不具備完善的醫(yī)療意識,結(jié)核病仍在繼續(xù)蔓延。

        對于結(jié)核病來說,群眾需要做好有效的預(yù)防,而醫(yī)護(hù)人員也應(yīng)尋找快速、準(zhǔn)確的診斷方案。分枝桿菌培養(yǎng)是目前最常見的結(jié)核病診斷方式,其優(yōu)勢是精度高、操作簡單,但其同樣存在著培養(yǎng)周期長等問題,患者疾病的確診需要等待6周的時(shí)間,患者正是由于漫長時(shí)間的等待才延誤了最佳的治療時(shí)機(jī),造成了疾病的不必要傳染。另外,影像學(xué)診斷也是當(dāng)前的主流診斷方式,其表現(xiàn)為快速有效,受到了廣泛的認(rèn)可,但該方式對于小典型的癥狀無法診斷,形成了患者誤診或漏診的狀況。隨著科技的發(fā)展,免疫學(xué)檢驗(yàn)方法成為了最佳的檢驗(yàn)途徑,其中最為認(rèn)可的方法有兩種:第一種是蛋白芯片法;第二種是膠體金法。免疫學(xué)檢驗(yàn)方法既包含了影像學(xué)信息,又彌補(bǔ)了痰涂片培養(yǎng)法的缺點(diǎn),檢驗(yàn)效果不錯(cuò)。

        蛋白芯片法又可分為三種抗體形式,即蛋白16 kD、蛋白38 kD和結(jié)核菌脂阿拉伯甘露糖(LAM),任一形式均可確定患者是否被感染。對于結(jié)核分枝桿菌來說,其細(xì)胞壁的主要成分是LAM,所以LAM角度的抗原性檢測有著極強(qiáng)的特異性,需要注意的是,其他的菌落細(xì)胞壁也存在LAM,所以該方式并不能全完確定患者的疾病類型。與LAM不同的是,蛋白16 kD和蛋白38 kD僅在結(jié)核分枝桿菌中存在,在其它的菌落中未發(fā)現(xiàn),抗原性檢測具有特異性,并作為患者疾病診斷的主要依據(jù)。

        膠體金色法的原理是葡萄球菌A蛋白(SPA)膠體金綴合物可使得已經(jīng)形成結(jié)合的結(jié)核IgG抗體表現(xiàn)為紅色,所以顏色的變化就代表著患者是否被感染。膠體金法的疾病診斷存在三個(gè)角度的優(yōu)勢:第一,結(jié)果穩(wěn)定。血清中IgG的含量一直處于穩(wěn)定的狀態(tài),并不受細(xì)菌活力等的影響,最后的檢驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)非常穩(wěn)定;第二,使用方便。由于膠體金法需要高精度的儀器,所以檢驗(yàn)過程中都是自動化進(jìn)行,人工操作的部分較少,單次的膠體金法數(shù)據(jù)檢驗(yàn)只需要十幾分鐘,使用非常便捷;第三,準(zhǔn)確率高。不同于蛋白芯片法,其最主要的區(qū)別就是準(zhǔn)確率高,這也是其在臨床上廣泛使用的原因。

        本研究發(fā)現(xiàn),對于結(jié)核組患者來說,其膠體金法陽性反應(yīng)率數(shù)據(jù)達(dá)到了71.11%,而對照組的膠體金法陽性反應(yīng)率數(shù)據(jù)為7.80%,結(jié)核組顯著優(yōu)于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);另外,LAM、蛋白16 kD和蛋白38 kD數(shù)據(jù)中,結(jié)核組蛋白芯片法陽性反應(yīng)率分別是 47.78%(43/90)、26.67%(24/90)、46.67%(42/90),而對照組蛋白芯片法陽性反應(yīng)率分別是8.90%(8/90)、0.00%(0/90)、8.90%(8/90),結(jié)核組顯著優(yōu)于對照組,且膠體金法免疫檢驗(yàn)優(yōu)于蛋白芯片法免疫檢驗(yàn),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。周方明等[6]指出,蛋白芯片法與膠體金法的結(jié)合檢測并不會大幅度提高疾病診斷率,所以膠體金法更佳。

        綜下所述,膠體金法對于結(jié)核疾病的診斷有著顯著的優(yōu)勢,表現(xiàn)為結(jié)果穩(wěn)定、使用便捷、準(zhǔn)確率高,該方式可在以后工作中實(shí)施廣泛的推廣。

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