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        長(zhǎng)鏈非編碼RNA BANCR在眼表鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義

        2020-12-18 09:06:56皮百木張洪陽(yáng)任艷竹
        實(shí)用癌癥雜志 2020年12期
        關(guān)鍵詞:眼表組織學(xué)鱗狀

        王 鋒 皮百木 張洪陽(yáng) 任艷竹

        眼表鱗狀細(xì)胞癌為一種發(fā)病率比較低的原發(fā)性惡性腫瘤,多見(jiàn)于60歲左右男性,其病因還不明確,不過(guò)與戶外勞動(dòng)、灰塵、風(fēng)沙刺激、眼外傷、遺傳等多種因素有關(guān)[1]。眼表鱗狀細(xì)胞癌的惡性程度高、預(yù)后差,??砂l(fā)生轉(zhuǎn)移,從而危及生命[2]。手術(shù)為該病的主要治療方法,但是對(duì)于機(jī)體特別是眼睛的損傷比較大,易造成外觀和功能的雙重缺陷[3]。為此對(duì)眼表鱗狀細(xì)胞癌的早期診斷、早期治療,是改善患者生活質(zhì)量和生存率的有效途徑,特別是準(zhǔn)確的腫瘤組織病理學(xué)診斷,對(duì)于臨床醫(yī)生選擇合適的治療方案具有重要價(jià)值[4]。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(LncRNAs)是一種不具有蛋白質(zhì)編碼能力的長(zhǎng)鏈RNA,其是由≥200個(gè)nt的RNA轉(zhuǎn)錄本組成,具有進(jìn)化保守性、復(fù)雜性、多樣性等特點(diǎn)[5]。LncRNAs可通過(guò)招募組蛋白修飾復(fù)合物到基因組的特定區(qū)域,從而調(diào)控基因的表達(dá)。已有研究顯示LncRNAs在調(diào)控腫瘤發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用,如增殖、抑制凋亡和轉(zhuǎn)移。LncRNA BANCR是一種腫瘤促進(jìn)因子,能激活白介素-6/stat3信號(hào)通路,LncRNA BANCR的肝癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移都顯著提高[6]。臨床研究證實(shí)BANCR在人類惡性腫瘤中呈現(xiàn)顯著性差異表達(dá),在主要惡性腫瘤中都作為致癌基因,發(fā)揮誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞增殖、激活自噬、抑制凋亡等多種作用[7]。本文具體探討了LncRNA BANCR在眼表鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義,以明確LncRNA BANCR的作用機(jī)制?,F(xiàn)總結(jié)報(bào)告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        本研究得到了醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)與所有入選患者的知情同意。2010年8月到2018年8月選擇在本院診治的眼表鱗狀細(xì)胞癌患者82例作為研究對(duì)象,納入標(biāo)準(zhǔn):年齡30~70歲;符合眼表鱗狀細(xì)胞癌的診斷標(biāo)準(zhǔn);臨床與病理資料完整;首次發(fā)?。恍g(shù)前無(wú)經(jīng)歷任何治療。排除標(biāo)準(zhǔn):臨床資料缺乏者;妊娠與哺乳期婦女;嚴(yán)重心、肝、腎功能異?;颊摺?/p>

        在82例患者中,男性50例,女性32例;年齡最小37歲,最大68歲,平均年齡(58.67±2.81)歲;平均病程(4.23±0.12)年;平均體重指數(shù)(21.47±2.90)kg/m2;臨床分期:Ⅰ期39例、Ⅱ期25例、Ⅲ期18例;組織學(xué)分化:高分化46例,中分化22例,低分化14例;遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移37例;病變部位:球結(jié)膜40例,角膜緣42例;吸煙37例,飲酒41例。

        1.2 LncRNA BANCR表達(dá)檢測(cè)

        取所有患者的病灶組織標(biāo)本(觀察組)與癌旁組織標(biāo)本(對(duì)照組),所有標(biāo)本暫存于液氮中,于-80 ℃冰箱或液氮中長(zhǎng)期儲(chǔ)存。qRT-PCR試劑盒購(gòu)自大連TAKARA公司,檢測(cè)探針購(gòu)自上海生工公司,各稀釋液、生化試劑等均購(gòu)自中衫公司。提取總組織標(biāo)本的RNA,反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。LncRNA BANCR檢測(cè)引物:正向引物:5'-TGCGAAGGATTCCCTGGTCGAAAGC-3',反向引物:5'-AATCGAGCCAGGGTATT-3'。PCR程序:預(yù)變性:95 ℃ 30 s,PCR反應(yīng):95 ℃ 5 s,60 ℃ 30 s,共40個(gè)循環(huán),以2-ΔΔCt作為檢測(cè)值,2-ΔΔCt≥2作為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。

        1.3 調(diào)查資料

        調(diào)查所有患者的一般資料,包括性別、年齡、體重指數(shù)、病程、臨床分期、組織學(xué)分化、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、病變部位、生活行為(吸煙、飲酒)等。從病檢確診日期開(kāi)始,到患者死亡或隨訪截止日期為止,隨訪截止日期為2020年2月1日。

        1.4 統(tǒng)計(jì)方法

        在統(tǒng)計(jì)分析時(shí)應(yīng)用的軟件是SPSS 22.00,通過(guò)百分比以及均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示計(jì)量數(shù)據(jù)與計(jì)數(shù)數(shù)據(jù),χ2檢驗(yàn)和獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)來(lái)進(jìn)行對(duì)比,通過(guò)單因素方差分析來(lái)進(jìn)行組間對(duì)比,相關(guān)性分析應(yīng)用的是直線相關(guān)分析,多因素采用COX回歸分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α<0.05。

        2 結(jié)果

        2.1 LncRNA BANCR表達(dá)陽(yáng)性率對(duì)比

        觀察組的LncRNA BANCR表達(dá)陽(yáng)性率為54.9%(45/82),顯著高于對(duì)照組的2.4%(2/82),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=55.144,P=0.000)。

        2.2 不同病理特征眼表鱗狀細(xì)胞癌患者的LncRNA BANCR表達(dá)陽(yáng)性率

        在82例患者中,不同組織學(xué)分化、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、吸煙患者的LncRNA BANCR表達(dá)陽(yáng)性率對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

        表1 不同病理特征眼表鱗狀細(xì)胞癌患者的LncRNA BANCR表達(dá)陽(yáng)性率(例,%)

        2.3 眼表鱗狀細(xì)胞癌患者LncRNA BANCR表達(dá)與其他指標(biāo)的相關(guān)性

        直線相關(guān)分析顯示患者的LncRNA BANCR表達(dá)與組織學(xué)分化、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、吸煙存在顯著相關(guān)性(P<0.05)。見(jiàn)表2。

        表2 眼表鱗狀細(xì)胞癌患者LncRNA BANCR表達(dá)與其他指標(biāo)的相關(guān)性(n=82)

        2.4 預(yù)后情況

        所有患者隨訪到2020年2月1日,平均隨訪時(shí)間(31.72±2.28)個(gè)月。82例患者中死亡30例,死亡率為36.6%。

        2.5 影響因素分析

        在82例患者中,以患者隨訪預(yù)后死亡作為因變量,COX回歸分析顯示LncRNA BANCR、組織學(xué)分化、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、吸煙都為影響患者預(yù)后死亡的主要因素(P<0.05)。見(jiàn)表3。

        表3 影響眼表鱗狀細(xì)胞癌患者預(yù)后死亡的因素(n=82)

        3 討論

        眼球表面組織主要為薄層上皮組織,包括角膜、角膜緣、球結(jié)膜等部位。眼表腫瘤類型繁多,其中良性以囊腫、乳頭狀瘤、色素痣、囊腫為主,而惡性腫瘤以鱗狀細(xì)胞癌為主[8]。眼表鱗狀細(xì)胞癌是一種原發(fā)性上皮惡性腫瘤,也可由上皮內(nèi)上皮癌遷延多年惡變而來(lái)。該病多數(shù)起源于瞼裂區(qū)的球結(jié)膜或角膜緣,在發(fā)病早期表現(xiàn)為無(wú)痛性的、不規(guī)則的粉紅色結(jié)節(jié)狀隆起,生長(zhǎng)緩慢。該病的發(fā)病病因還不明確,在男性中的發(fā)病人數(shù)遠(yuǎn)高于女性,可能與男性從事戶外活動(dòng)和田間勞動(dòng)明顯多于女性有關(guān)[9]。

        當(dāng)前眼表鱗狀細(xì)胞乳頭狀瘤-上皮內(nèi)瘤變-鱗狀細(xì)胞癌這一過(guò)程的發(fā)生機(jī)制還不明確,不過(guò)有多種基因?qū)?xì)胞的增殖和凋亡起到調(diào)控作用。LncRNA屬于非編碼RNA的一種,是一類不編碼蛋白的RNA分子,具有更高的組織器官特異性,缺少或缺乏開(kāi)放閱讀編碼框[10]。LncRNA具有保守的二級(jí)結(jié)構(gòu),可通過(guò)lncRNA-蛋白相互作用、mRNA剪接、表觀遺傳沉默、lncRNA-miRNA相互作用等,參與細(xì)胞分化、胚胎發(fā)育、細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞凋亡等多個(gè)腫瘤發(fā)生等多種生物學(xué)過(guò)程的調(diào)控[11]。BANCR是9號(hào)染色體上的轉(zhuǎn)錄物,其通過(guò)改變細(xì)胞遷移、增殖來(lái)影響腫瘤的發(fā)生[12]。BANCR在多種惡性腫瘤組織與細(xì)胞系中的表達(dá)上升,為一種促癌因子。本研究顯示觀察組的LncRNA BANCR表達(dá)陽(yáng)性率為54.9%,顯著高于對(duì)照組的2.4%(P<0.05);在82例患者中,不同組織學(xué)分化、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、吸煙患者的LncRNA BANCR表達(dá)陽(yáng)性率對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);直線相關(guān)分析顯示患者的LncRNA BANCR表達(dá)與組織學(xué)分化、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、吸煙存在顯著相關(guān)性(P<0.05)。從機(jī)制上分析,LncRNA BANCR表達(dá)上調(diào)與腫瘤病理特征、生活行為密切相關(guān)。當(dāng)前也有研究顯示LncRNA BANCR表達(dá)上調(diào)可提高惡性腫瘤細(xì)胞的惡性程度,也可降低惡性腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的藥物敏感性,可作為骨肉瘤預(yù)后評(píng)估和治療靶點(diǎn)的潛在生物標(biāo)志物[13]。

        眼球表面惡性腫瘤是眼科常見(jiàn)的腫瘤,其中鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生率占80%以上,在病理特征上有明顯的異型性,呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng),排列成不規(guī)則的乳頭狀,巢中央可見(jiàn)癌株。LncRNAs被認(rèn)為是腫瘤基因表達(dá)的重要調(diào)節(jié)因子,涉及到表觀遺傳轉(zhuǎn)錄調(diào)控、基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控和轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)調(diào)控等,并且部分LncRNAs通過(guò)影響基因增強(qiáng)子的活性來(lái)促進(jìn)基因調(diào)控[14]。本研究所有患者隨訪到2020年2月1日,平均隨訪時(shí)間(31.72±2.28)個(gè)月,82例患者中死亡30例,死亡率為36.6%;COX回歸分析顯示LncRNA BANCR、組織學(xué)分化、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、吸煙都為影響患者預(yù)后死亡的主要因素(P<0.05)。從機(jī)制上分析,LncRNA BANCR高表達(dá)可影響腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、遷移,還可能直接或通過(guò)其他途徑影響腫瘤細(xì)胞增殖活性,從而影響患者的預(yù)后[15]。本研究也存在一定的不足,所收集的樣本量較少,雖然證明了LncRNA BANCR與病理特征、預(yù)后之間的關(guān)系,但相互之間具體的作用機(jī)制尚未研究清楚。

        綜上所述,LncRNA BANCR在眼表鱗狀細(xì)胞癌中呈現(xiàn)高表達(dá)狀況,與患者的病理特征與預(yù)后顯著相關(guān),可作為眼表鱗狀細(xì)胞癌病情與預(yù)后評(píng)估的潛在生物標(biāo)志靶點(diǎn)。

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