方宇鵬 （池州職業(yè)技術學院，安徽省池州市 247000）

組培苗工廠化生產技術是在特定的條件下，應用組織培養(yǎng)技術加快苗木繁殖的方法，是全新的育苗技術之一，對一些繁殖系數(shù)較低或難以通過種子繁殖的珍貴樹種尤為重要[1]。大別山冬青(Ilex dabieshanensisK.Yao & M.B.Deng)又名小苦丁茶，是冬青科(Aquifoliaceae)冬青屬(Ilex)常綠闊葉喬木，原產安徽大別山及江西等地[2]，其葉色青翠，果實紅艷，生長旺盛，且耐修剪性強，適應性強，耐貧瘠和干旱環(huán)境，病蟲害發(fā)生率低，是園林綠化上的優(yōu)良、珍貴樹種[3]。目前，大別山冬青在生產中主要通過扦插進行繁殖，但其扦插繁殖系數(shù)較低[4]，導致其種苗在市場上較為短缺。因此，為開發(fā)推廣大別山冬青這種珍稀植物品種，在短期內獲得大量優(yōu)質種苗，滿足其生產應用的需要，筆者對大別山冬青組培快繁技術進行了研究，并取得了一定的成效?，F(xiàn)將研究的大別山冬青組培苗工廠化生產技術總結介紹如下，以期為推動大別山冬青的園林應用，豐富我國綠化樹種奠定基礎。

1 外植體選取

選擇由安徽省安慶市太湖縣宏安冬青樹種植農民專業(yè)合作社提供的5年生扦插苗，取無病蟲害、生長旺盛的一年生枝條作為外植體來源。

2 外植體處理

用自來水將具有腋芽的一年生枝條沖洗30 min，然后去除葉片，留少量葉柄，放入盛有洗衣粉溶液的燒杯中漂洗，并不斷攪動，沖洗干凈后瀝干，放置于超凈工作臺上，用75%酒精消毒20 s，無菌水沖洗5次后，將其置于0.1%升汞液中消毒8 min，然后用無菌水沖洗3～5次，再將其表面的水分用無菌紙吸干，最后將經消毒的莖段（外植體）剪切成長0.5～1.0 cm的莖段，每莖段帶1～2個腋芽，接種到初代培養(yǎng)基上誘導腋芽萌發(fā)[5]。

3 組培苗擴繁

3.1 腋芽誘導培養(yǎng)

以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L作為培養(yǎng)基進行腋芽誘導，每個培養(yǎng)瓶中分別接種3個莖段。外植體接種后置于溫度（23±3）℃、光照2 000 Lux、16 h/d的條件下培養(yǎng)，腋芽誘導率可達100%。

3.2 繼代增殖培養(yǎng)

將前期初代培養(yǎng)誘導后產生的新梢，切割成莖段，每個莖段帶1個新腋芽，處理后轉接到MS+6-BA 1.0 mg/L +IBA 0.3 mg/L培養(yǎng)基中，每瓶接種2個莖段，增殖系數(shù)可達4.6。

3.3 生根培養(yǎng)

將長至3～4 cm高的健壯大別山冬青試管苗接種到1/2 MS+NAA 0.3 mg/L +IBA 0.2 mg/L生根培養(yǎng)基中，其生根率可達95%。

3.4 馴化移栽

在大別山冬青組培苗生根后、株高達4 cm左右時進行煉苗與移栽。選擇根系發(fā)達、生長健壯的組培苗，先將瓶蓋打開，覆上保鮮膜在人工氣候室內放置2～3 d。再從培養(yǎng)瓶中取出小苗，洗凈根部培養(yǎng)基，移栽至消毒過的蛭石（V）∶珍珠巖（V）∶泥炭土（V）=2∶1∶2的混合基質中，要求控制環(huán)境條件，前期適當遮陽，保持一定濕度，成活率可達85%。

4 結論與討論

大別山冬青作為優(yōu)良的園林綠化珍貴樹種，經過組織培養(yǎng)，能進行較大規(guī)模的生產，較好地滿足了當?shù)厥袌鰧Υ髣e山冬青的需求。值得注意的是，在組培苗實際生產中，馴化移栽是極為重要和關鍵的一個環(huán)節(jié)，組培苗移栽的成活與否與基質、環(huán)境條件等密切相關。因此，需嚴格做好組培苗移栽環(huán)境的調控工作。