孫 濤，王廣麗，劉建洋，張子臣

(山東標準檢測技術有限公司，山東 濟南 250101)

2004年國家發(fā)布實施了《GB/T 5009.199—2003 蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》方法，此后農(nóng)藥殘留快速檢測技術逐步應用到生產(chǎn)生活的各個領域。農(nóng)藥殘留快速檢測技術相對于實驗室檢測技術具有低成本、短周期的特點，在農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)、運輸、存儲、銷售等多個環(huán)節(jié)有明顯應用優(yōu)勢。針對農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)銷售周期短的特性，農(nóng)藥殘留快速檢測可在農(nóng)產(chǎn)品到達餐桌之前，對其農(nóng)藥殘留風險進行預判，這也是該技術近年來得到高速發(fā)展的主要原因。在實際工作中，農(nóng)藥殘留快速檢測結果的準確性會受到檢測儀器、檢測試劑、環(huán)境溫度、前處理操作和時間控制等幾方面影響，為確保檢測結果的準確性，筆者根據(jù)多年工作實踐針對性提出解決對策。

1 檢測儀器的影響

農(nóng)藥殘留快速檢測儀是針對我國國情和農(nóng)產(chǎn)品市場監(jiān)管需求而研發(fā)的專用檢測儀器，其是按國家標準《GB/T 5009.199—2003》中的酶抑制法對蔬菜、水果中有機磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量進行準確、快速檢測。目前，市售的農(nóng)藥殘留快速檢測儀經(jīng)歷了幾次更新?lián)Q代后，在輕量化、便攜性方面取得了較大進步，但其核心部件沒有發(fā)生變化，仍然是分光光度計。因此，要保證儀器檢測結果的準確性，需要對分光光度計進行查驗和校準。查驗是指在檢測前先對檢測儀器各個通道的吸光度能量值進行重復性、穩(wěn)定性檢查，確保能滿足檢測要求，如果發(fā)現(xiàn)異常應及時處理，避免因儀器自身原因造成的準確性偏差。校準是指在檢測前用標準樣品對儀器準確度進行校準，有條件的可以多做幾次空白試驗和對比試驗，確保儀器各項參數(shù)在合理范圍。

2 檢測試劑的影響

農(nóng)藥殘留快速檢測試劑的效能是影響檢測結果的主要因素。要保證農(nóng)藥殘留快速檢測的準確性，就要嚴格按照《GB/T 5009.199—2003》規(guī)定進行試劑配置，需要儲存保管試劑的，儲存條件要符合標準要求。其中，顯色劑、底物配制成溶液后要嚴格按照標準要求冷藏保存，切勿冷凍儲存。乙酰膽堿酯酶作為農(nóng)藥殘留快速檢測的核心試劑，其活性能否達到實驗要求決定農(nóng)藥殘留快速檢測的準確性，因此每次檢測前必須先做空白實驗，保證3 min的吸光度變化值△A0在0.3以上才檢測，確保酶試劑的活性符合實驗要求。

3 環(huán)境溫度的影響

乙酰膽堿酯酶是農(nóng)藥殘留快速檢測的核心試劑。從反應原理看，有機磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯農(nóng)藥與乙酰膽堿競爭性作用于膽堿酯酶，即膽堿酯酶與乙酰膽堿結合催化乙酰膽堿生成乙酰和膽堿，另外膽堿酯酶與有機磷農(nóng)藥結合而阻斷反應進行。因此，利用膽堿酯酶催化反應的抑制法可快速檢測有機磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯農(nóng)藥的殘留。乙酰膽堿酯酶的活性對環(huán)境溫度敏感，37℃是其發(fā)揮活性的最佳溫度，過高或者過低都會影響其活性，進而影響檢測的準確性，所以每次檢測之前幾種試劑都要先進行解凍。試劑從冷藏箱取出，待溫度恢復到37℃左右才能進行檢測。當環(huán)境溫度無法滿足實驗要求時，檢測要在37℃恒溫水浴中進行，以保證乙酰膽堿酯酶的最佳活性溫度。

4 前處理操作的影響

樣品前處理也是決定農(nóng)藥殘留快速檢測成敗的關鍵因素。合理準確的樣品前處理方式，可以最大程度減少果蔬汁自身屬性對準確性的影響，因為有些蔬菜、水果汁液中一些成分會對乙酰膽堿酯酶產(chǎn)生作用，還有些蔬果汁液顏色較深，也會影響檢測結果的準確性，因此前處理階段要采取相應措施避免這些果蔬的汁液滲出。如韭菜、香菜等細莖類蔬菜可以采取整體浸泡的方式提取，番茄、蘑菇等體積較大的球形蔬菜可以用緩沖液反復洗脫的方式提取。

5 時間控制的影響

能否準確控制反應時間是農(nóng)藥殘留快速檢測成敗的核心，這不僅需要精準掌握幾種試劑加入的時間間隔，還要盡可能縮短操作時間，保證快速準確添加試劑，減少人為因素對結果準確性的影響。若條件允許，選擇對照實驗和樣品測試實驗能夠同步進行的檢測儀器，如不能同步進行，試劑反應時間、環(huán)境溫度、乙酰膽堿酯酶活性等變化因素都會對結果準確性產(chǎn)生影響。具備同步檢測功能的農(nóng)殘檢測儀可以最大限度規(guī)避這些不利因素的影響，進而提高檢測結果的準確性。

綜上所述，農(nóng)藥殘留快速檢測結果的準確性受多方面因素影響，在實際工作中要綜合考慮上述因素，減少誤差、精準控量、準確控制反應時間，避免各種不利條件的影響，確保農(nóng)藥殘留快速檢測工作準確順利進行。