姜碧薇

[摘要]目的：本試驗(yàn)旨在研究酶茵共同處理蕎麥秸稈對(duì)其營(yíng)養(yǎng)成分、發(fā)酵品質(zhì)及纖維結(jié)構(gòu)的影響。方法：試驗(yàn)分為6組，對(duì)照組為未經(jīng)處理的蕎麥秸稈，試驗(yàn)I組為使用阿魏酸脂酶處理的蕎麥秸稈（酶活≥10000U/g），經(jīng)發(fā)酵30天后測(cè)其營(yíng)養(yǎng)成分、發(fā)酵品質(zhì)及纖維結(jié)構(gòu)，每組3個(gè)重復(fù)。結(jié)果：（1）各試驗(yàn)組蕎麥秸稈的干物質(zhì)、粗灰分、中性洗滌纖維含量顯著低于對(duì)照組（P<0.01），試驗(yàn)組粗蛋白、粗脂肪含量與對(duì)照組無(wú)顯著差異（P>0.05）。（2）試驗(yàn)組蕎麥秸稈酵母菌和乳酸菌數(shù)量最多，霉菌數(shù)量最少，菌落總數(shù)居中，且抑制了黃曲霉毒素B1的產(chǎn)生。（3）試驗(yàn)組與對(duì)照組相比蕎麥秸稈的纖維結(jié)構(gòu)有所破壞。結(jié)論：阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈可顯著降低其粗灰分、中性洗滌纖維含量，改善發(fā)酵品質(zhì)并破壞其纖維結(jié)構(gòu)。

[關(guān)鍵詞]阿魏酸脂酶;蕎麥秸稈;營(yíng)養(yǎng)成分;纖維結(jié)構(gòu)

[中圖分類號(hào)] S816.53

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

目前來(lái)講，飼用酶制劑的研發(fā)和應(yīng)用是生物技術(shù)在動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)和飼料工業(yè)中應(yīng)用最成功的的例子。應(yīng)用飼用酶制劑不僅可以改善飼料的利用效率、提高動(dòng)物生產(chǎn)性能，還能夠開(kāi)發(fā)新的飼料資源，減少環(huán)境污染，在實(shí)現(xiàn)我國(guó)畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略中有著廣闊的應(yīng)用前景。阿魏酸脂酶能切斷細(xì)胞壁中多糖一多糖、多糖一木質(zhì)素間的交聯(lián)，有利于細(xì)胞壁物質(zhì)中多糖的降解和木質(zhì)素的釋放，因此在食品、飼料和造紙工業(yè)具有廣闊的應(yīng)用前景。本試驗(yàn)通過(guò)阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈，與未處理的對(duì)照組進(jìn)行發(fā)酵對(duì)比，測(cè)定蕎麥秸稈的纖維結(jié)構(gòu)、營(yíng)養(yǎng)成分和發(fā)酵指標(biāo)等參數(shù)，篩選最優(yōu)比，以期為秸稈飼料資源的開(kāi)發(fā)利用以及在灘羊生產(chǎn)實(shí)踐中的科學(xué)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1蕎麥秸稈日糧處理

準(zhǔn)備適量葬麥秸稈，先用粉碎機(jī)粉碎至3—5cm，然后分別按照配制比例準(zhǔn)確稱取阿魏酸脂酶（酶活≥lOOOOU/g;秸稈量的0.1%），對(duì)照組無(wú)處理，加一定水與飼料充分混合均勻，封于40*60的發(fā)酵袋中，抽真空25℃避光發(fā)酵30天后，取樣進(jìn)行電鏡檢測(cè)和發(fā)酵指標(biāo)檢測(cè)，剩余樣分別置于65℃烘箱中烘干48h，之后粉碎，過(guò)40目篩后封存于自封袋用于常規(guī)養(yǎng)分檢測(cè)，每組三個(gè)重復(fù)。

1.2樣品收集與測(cè)定

1.2.1養(yǎng)麥秸稈的營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

飼料當(dāng)中的干物質(zhì)檢測(cè)方法參照GB6435-1986《飼料水分的測(cè)定方法》測(cè)定;飼料當(dāng)中粗蛋白的測(cè)定方法參照GB/T6432-1994《飼料中粗蛋白測(cè)定方法》測(cè)定;飼料中中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維參照Van Soest等方法進(jìn)行測(cè)定;飼料中粗灰分測(cè)定方法參照CB/T6438-1992《飼料中粗灰分的測(cè)定方法》測(cè)定。

1.2.2養(yǎng)麥秸稈的發(fā)酵品質(zhì)測(cè)定

30天后開(kāi)封，處理組飼料經(jīng)過(guò)發(fā)酵之后觀察其色澤、氣味及有無(wú)霉變情況，觸感有無(wú)粘手，質(zhì)地是否發(fā)生變化。送樣至寧夏吳標(biāo)檢測(cè)服務(wù)研究院（有限公司）測(cè)定其菌落總數(shù)及黃曲霉毒素Bl的含量，用以分析不同發(fā)酵處理對(duì)飼料原樣產(chǎn)生的影響。

1.2.3養(yǎng)麥秸稈的纖維結(jié)構(gòu)觀察

發(fā)酵結(jié)束后取樣，盡量挑選外觀相對(duì)完整、平整的樣品，苜蓿葉片和桿分開(kāi)取樣。運(yùn)用掃描電鏡觀察。具體方法參照梁建勇。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel記錄并作簡(jiǎn)單處理后，采用SAS 8.2軟件進(jìn)行方差分析，利用LSD法進(jìn)行多重比較，以P<0.05作為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2結(jié)果與分析

2.1 阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈對(duì)其營(yíng)養(yǎng)成分的影響

由表1、圖1可知，各試驗(yàn)組養(yǎng)麥秸稈的干物質(zhì)、粗灰分、中性洗滌纖維含量顯著低于對(duì)照組（P<0.01），試驗(yàn)組粗蛋白、粗脂肪含量與對(duì)照組無(wú)顯著差異（P>0.05）。

注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相同字母或無(wú)字母表示差異不顯著（P>0.05），不同小寫(xiě)字母表示差異顯著（P<0.05），不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著（P<0.01），下同。

2.2阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈對(duì)其發(fā)酵品質(zhì)的影響

由表2可知，試驗(yàn)組色澤、氣味無(wú)明顯變化，不粘手，質(zhì)地較好，且與對(duì)照組相比霉變情況較少，因此阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈其發(fā)酵品質(zhì)的感官特性均較為理想。

由表3可知，試驗(yàn)組蕎麥秸稈的酵母菌、乳酸菌、霉菌及菌落總數(shù)與對(duì)照組相比差異不大。經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理后，降低了原飼料中的酵母菌數(shù)量和霉菌數(shù)量，且菌落總數(shù)有所降低，但提高了蕎麥秸稈中乳酸菌含量，抑制了黃曲霉毒素Bl的產(chǎn)生。

2.3阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈對(duì)其纖維結(jié)構(gòu)的影響

由圖1可知，未處理的蕎麥秸稈表面纖維結(jié)構(gòu)完整，表皮細(xì)胞排列整齊，輪廓清晰，細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整;由圖2可知，試驗(yàn)組蕎麥秸稈表面纖維結(jié)構(gòu)、表皮細(xì)胞出現(xiàn)破損，有部分規(guī)則或不規(guī)則的大小不等的孔狀結(jié)構(gòu)，細(xì)胞結(jié)構(gòu)有破壞和溶解情況。

3討論

3.1 阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈對(duì)其營(yíng)養(yǎng)成分的影響

飼料的營(yíng)養(yǎng)成分可以直觀體現(xiàn)不同處理方式對(duì)飼料各營(yíng)養(yǎng)成分的影響，對(duì)飼喂動(dòng)物后期消化吸收具有十分重要的參考價(jià)值。目前，關(guān)于纖維降解酶處理飼糧對(duì)奶牛飼喂效果的研究報(bào)道較多，大多從采食量、消化率和產(chǎn)奶量等方面評(píng)價(jià)酶制劑對(duì)奶牛的影響，能夠產(chǎn)生積極有效的作用。阿魏酸脂酶處理飼料目前研究的較少，由本文研究可知，阿魏酸脂酶發(fā)酵蕎麥秸稈能夠降低中性洗滌纖維含量，降解粗飼料當(dāng)中的粗纖維物質(zhì)，便于動(dòng)物的消化吸收。

3.2阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈對(duì)其發(fā)酵品質(zhì)的影響

飼料發(fā)酵感官評(píng)定是評(píng)價(jià)飼料發(fā)酵的重要指標(biāo)之一，本試驗(yàn)通過(guò)阿魏酸脂酶處理養(yǎng)麥秸稈，經(jīng)過(guò)相同時(shí)間、相同溫度的厭氧發(fā)酵之后，其發(fā)酵品質(zhì)較為理想，黃曲霉毒素（ AFT）是黃曲霉和寄生曲霉等某些菌株產(chǎn)生的雙呋喃環(huán)類毒素。其衍生物有約20種，其中以Bl的毒性最大，致癌性最強(qiáng)。黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織（ WHO）癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為一類天然存在的致癌物，是毒性極強(qiáng)的劇毒物質(zhì)。阿魏酸脂酶發(fā)酵蕎麥秸稈降低了黃曲霉毒素。

3.3阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈對(duì)其纖維結(jié)構(gòu)的影響

許多學(xué)者之前的研究側(cè)重于添加阿魏酸脂酶對(duì)飼料的養(yǎng)分利用效率或免疫等方面的影響開(kāi)展，而本研究首次對(duì)添加阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈并對(duì)其纖維結(jié)構(gòu)運(yùn)用掃描電鏡構(gòu)進(jìn)行觀察，為更好的闡述阿魏酸脂酶降解木質(zhì)素的作用效果做了直觀的輔助說(shuō)明，這方面的參考文獻(xiàn)幾乎空白。在阿魏酸脂酶的發(fā)酵作用下，打破了粗飼料當(dāng)中粗纖維的纖維結(jié)構(gòu)，使內(nèi)層細(xì)胞更好的暴露與釋放，為瘤胃對(duì)粗飼料的進(jìn)一步消化奠定了良好的基礎(chǔ)。本次試驗(yàn)中，通過(guò)電鏡觀察其纖維結(jié)構(gòu)、細(xì)胞結(jié)構(gòu)和海綿組織的破損情況，直觀的反應(yīng)出了阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈的優(yōu)勢(shì)。

4結(jié)論

阿魏酸脂酶處理蕎麥秸稈可顯著降低其粗灰分、中性洗滌纖維含量，改善發(fā)酵品質(zhì)并破壞其纖維結(jié)構(gòu)。

【參考文獻(xiàn)】

[1]楊永明.外源纖維復(fù)合酶在綿羊飼養(yǎng)中的作用效果及其作用機(jī)制的研究[D].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，2002.

[2]季之華，王隨元，農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局（全國(guó)飼料工作辦公室）飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)匯編[M].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2002.

[3]彭忠利，郭春華，柏雪，等.微生物發(fā)酵飼料對(duì)樂(lè)至黑山羊生產(chǎn)性能、養(yǎng)分消化率與血液生化指標(biāo)的影響[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2013（ 05）.

[3] Soest P J V，Robertson J B，B.A. Lewis. Methods for Dietary Fiber，Neutral Detergent Fiber， And Nonstarch Polysaccharides In Relation ToAnimal Nutrition[J]. Journal of Dairy ence， 1991（ 10）.

[4] Keles G，Demirci U.The effect of homofermentative andheterofermentative lactic acid bacteria on conservation characteristics ofhaled triticale - Hungarian vetch silage and lamb performance[J]. AnimalFeed ence&Technology， 2011（ 1-2）.

[5]梁建勇.不同添加劑對(duì)青貯飼料品質(zhì)、纖維結(jié)構(gòu)及綿羊瘤胃發(fā)酵的影響[D].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.

[6] K.A. Beauchemin， W.Z. Yang， L.M. Rode. Effects of grain source andenzyme additive on site and extent of nutrient digestion in dairy cows.[J].Journal of Dairy ence， 1999 （02）.

[7]L.Kung，R.J.Treacher. The effect of treating forages with fibrolyticenzymes on its nutritive value and Iactation performance of dairy cows.[J].Journal of Dairy ence， 2000 （01）.

[8] Bowman G R，Beauchemin K A，Shelford J A.The proportion of thediet to which fibrolytic enzymes are added affects nutrient digestion bylactating dairy cows.[J]. Journal of Dairy ence， 2002（ 12）.

[9] K.G. Arriola， S.C. Kim l， C.R. Staples， A.T. Adesogan. Effect of fibrolyticenzyme application to low-andhigh-concentrate diets on the performanceof lactating dairy cattle[J].Journal of Dairy Science，2011（ 02）.

[10] Hristov A N，Basel C E，Melgar A，et al. Effect of exogenouspolysaccharide-degrading enzyme preparations on ruminal fermentationand digestibility of nutrients in dairy cows[J]. Animal Feed ence&Technology， 2008（ 1-4）.

[11]勞文艷，林素珍.黃曲霉毒素對(duì)食品的污染及危害[J].北京聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2011（ 01）.