高瑜

云南中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 （云南昆明 650041 ）

艾滋病是一種由人類(lèi)免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染引起的慢性傳染病，具有病死率高、傳染性強(qiáng)的特點(diǎn)。病毒感染后可逐漸破壞患者的免疫系統(tǒng)，使其受損甚至喪失，增加機(jī)體感染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)重威脅患者的生命安全，因此，及早的診斷干預(yù)十分重要。隨著診斷技術(shù)的快速發(fā)展，HIV 檢測(cè)已經(jīng)發(fā)展為一種常規(guī)診斷檢測(cè)，且隨著第四代和第五代檢測(cè)技術(shù)的出現(xiàn)，解決了早期HIV 檢測(cè)的主要缺陷，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值顯著提升。目前，HIV 檢測(cè)已經(jīng)可以在暴露后2周檢測(cè)到感染，且假陽(yáng)性率較低[1-2]。本研究比較直接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme-linked immunosorbnent assay，ELISA） 法、金免疫層析試驗(yàn)、間接ELISA 法檢測(cè)HIV 的可靠性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2019年6月我院收治的疑似HIV 感染患者50例作為研究對(duì)象，其中男24例，女26例；年齡26～48歲，平均（36.37±3.5）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者均知情同意本研究，且已簽署知情同意書(shū)；（2）全程參與研究，未中途退出或死亡；（3）均需經(jīng)過(guò)臨床癥狀鑒定與病理學(xué)鑒定（免疫印跡法）；（4）無(wú)肢體障礙、嚴(yán)重內(nèi)科疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）存在精神障礙或心理疾病的患者；（2）存在認(rèn)知障礙、言語(yǔ)障礙、肢體功能障礙的患者；（3）伴有心臟、腎臟功能異常的患者；（4）艾滋病重癥晚期且預(yù)期生存期低于12個(gè)月的患者；（5）惡性腫瘤患者；（6）存在嚴(yán)重代謝異常的患者。

1.2 方法

患者均采取直接ELISA 法、金免疫層析試驗(yàn)、間接 ELISA 法進(jìn)行檢測(cè)。

直接ELISA 法應(yīng)用雙抗原夾心法進(jìn)行檢測(cè)，試劑采用科華生物有限公司出產(chǎn)的試劑盒；間接ELISA 法試劑采用上海優(yōu)選生物科技有限公司所生產(chǎn)的試劑。直接ELISA 法、間接 ELISA 法：將抽取的血清樣本置于離心機(jī)中作離心處理，離心速率為3 500 r/min，隨后將樣本置于3～8 ℃恒溫箱內(nèi)保存，均采用FAME24/20自動(dòng)化酶免分析儀（HAMILTON）在72 h 內(nèi)完成檢測(cè)工作，試驗(yàn)值≥Cut off 值為陽(yáng)性，

金免疫層析試驗(yàn)：采用滴管抽取采集的血清樣本，放于金免疫試紙中的sample 區(qū)（樣本區(qū)），靜置等候血清樣本完全浸透試紙，再等候10 s，隨后以肉眼觀測(cè)試紙的顏色變化，若試紙出現(xiàn)一條紅線則為陰性，兩條紅線則為陽(yáng)性，觀測(cè)時(shí)間需>30 min，以免誤診、漏診。

1.3 臨床評(píng)價(jià)

以免疫印跡法的檢測(cè)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，比較3種方法的診斷靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用F 檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果

免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果顯示，50例患者中，38例陽(yáng)性，12例陰性。

2.2 直接ELISA 法、金免疫層析試驗(yàn)、間接 ELISA 法的檢測(cè)結(jié)果

3種檢測(cè)方法中，直接ELISA 法的診斷靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度更高，與其他方法比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1～4。

表1 直接ELISA 法的診斷結(jié)果（例）

表2 金免疫層析試驗(yàn)的診斷結(jié)果（例）

表3 間接 ELISA 法的診斷結(jié)果（例）

表4 3種檢測(cè)方法的診斷結(jié)果比較（%）

3 討論

HIV 可誘發(fā)艾滋病，屬于極度危險(xiǎn)的傳染性疾病。該病病程較長(zhǎng)，致殘率、病死率較高，嚴(yán)重威脅患者的生命安全。HIV 可以攻擊人體的免疫系統(tǒng)，特異性攻擊淋巴細(xì)胞，使患者免疫功能喪失，誘發(fā)疾病。我國(guó)對(duì)艾滋病的普及力度逐年增強(qiáng)，但其知識(shí)普及度一般，大眾對(duì)艾滋病的了解尚淺[3]。

現(xiàn)階段，HIV 的常規(guī)檢驗(yàn)方法為ELISA 法和金免疫層析試驗(yàn)。其中，ELISA 法具有高效、快速、方便、準(zhǔn)確度高等特點(diǎn)[4-5]。ELISA 法分為直接ELISA 法、間接ELISA 法。間接ELISA 法的應(yīng)用范圍較窄，只能檢測(cè)IgG 水平，無(wú)法篩查微孔板上的抗體，因此靈敏度、特異度較低；此外，患者血清中HIV 抗體與細(xì)胞抗原、HIV 抗原與血清中逆轉(zhuǎn)錄病毒之間容易發(fā)生交叉反應(yīng)，干擾間接ELISA 法的檢測(cè)準(zhǔn)確度，導(dǎo)致假陽(yáng)性率較高。而直接ELISA 法通常應(yīng)用于HIV 的初篩階段，采用抗HIV 抗原（固相抗原）作為酶標(biāo)記物，可雙重識(shí)別患者血清中的HIV 抗體，靈敏度、特異度均優(yōu)于間接ELISA 法，且假陽(yáng)性率低[6]。

本研究結(jié)果顯示，直接ELISA 法的診斷靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度顯著高于金免疫層析試驗(yàn)、間接 ELISA 法。需要注意的是，在行直接ELISA 法檢測(cè)時(shí)，需嚴(yán)格管理血液樣本的采集程序，保障檢測(cè)的可靠性。

綜上所述，直接ELISA 法檢測(cè)HIV 的可靠性高于金免疫層析試驗(yàn)、間接 ELISA 法。