林金美，肖文海，葉祖興，毛建玉，廖麗娟

福建醫(yī)科大學(xué)附屬三明第一醫(yī)院 （福建三明 365000）

新生兒溶血?。╤emolytic disease of newborn，HDN）屬于臨床上較為常見的一種免疫性溶血性疾病，主要發(fā)生于胎兒及新生兒，母嬰血型不合是該病的重要病因，且多見于ABO 血型系統(tǒng)[1]。有研究結(jié)果顯示，當(dāng)母嬰血型存在差異時(shí)，母親體內(nèi)免疫系統(tǒng)的被動(dòng)激活可導(dǎo)致胎兒紅細(xì)胞抗原的特異性抗體的產(chǎn)生，而該特異性抗體主要由IgG 型抗體組成[2]。IgG 型抗體是目前已知唯一可通過胎盤的免疫球蛋白，繼而可能進(jìn)入胎兒的血液循環(huán)中，和紅細(xì)胞發(fā)生免疫性溶血反應(yīng)，引起胎兒早產(chǎn)、新生兒貧血、肝脾腫大等，甚至引發(fā)嬰兒死亡[3]。產(chǎn)前檢查是目前臨床上用以預(yù)防及早期診斷HDN 的有效途徑，有利于臨床制定針對性干預(yù)措施，繼而達(dá)到改善嬰兒預(yù)后的目的。臨床上往往通過微柱凝膠法檢測孕婦體內(nèi)的IgG 型抗體效價(jià)，從而預(yù)測ABO 系HDN[4]。該檢測方式具有操作簡便、快速、標(biāo)本用量較少、靈敏度較高及特異性較強(qiáng)等優(yōu)勢，且結(jié)果可進(jìn)行較長時(shí)間的保存，目前已被廣泛應(yīng)用于臨床孕婦早期抗體的檢測中[5]。本研究調(diào)查2016年2月至2018年12月我院收治的310例夫妻血型不合的O 型血孕婦的IgG 型抗體效價(jià)，分析其與HDN 的相關(guān)性，旨在為臨床HDN 的防治提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年2月至2018年12月我院收治的夫妻血型不合的O型血孕婦310例作為研究對象，年齡21～45歲，平均（28.45±5.23）歲；受教育程度，初中及以下112例，高中及以上198例；孕周26～40周，平均（35.62±4.22）周；家庭月收入，低于5 000元/月166例，5 000～10 000元/月93例，>10 000元/月51例。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，孕婦及其家屬均自愿簽署知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均為單胎妊娠；（2）年齡21～45歲；（3）既往無輸血史；（4）臨床病歷資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并肝、腎、肺等重要臟器及血液系統(tǒng)疾病的孕婦；（2）伴有嚴(yán)重感染性疾病、免疫系統(tǒng)疾病及惡性腫瘤的孕婦；（3）存在交流溝通障礙或伴有精神疾病的孕婦；（4）正參與其他研究的孕婦。

1.2 試劑與方法

1.2.1 試劑

微柱凝膠抗人球蛋白試劑卡購自吉林省長春博迅生物技術(shù)有限公司，產(chǎn)品批號為20161205、20171204等。ABO 標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞由我院自制獲取，主要由5人份以上正常人混合紅細(xì)胞制作而成，濃度為0.8%。2-Me 試劑購自長春博迅生物技術(shù)有限公司，產(chǎn)品批號為20170401、20170901等。

1.2.2 檢測方法

通過微柱凝膠法檢測孕婦的IgG 型抗體效價(jià)：將樣本血清采用2-Me 進(jìn)行處理，測定IgG 抗體的特異性，并將存在特異性的IgG 抗體標(biāo)本血清進(jìn)行倍比稀釋處理，分別取50 μl 上述標(biāo)本置入編碼的微柱凝膠抗人球蛋白試劑的柱管內(nèi)，同時(shí)加入相對應(yīng)的我院自制標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞50 μl，于37 ℃條件下孵育15 min、離心處理，最后判定結(jié)果。

采用HDN 血型血清學(xué)3項(xiàng)試驗(yàn)診斷HDN：母嬰血型存在差異，新生兒紅細(xì)胞直抗試驗(yàn)、紅細(xì)胞抗體釋放試驗(yàn)及血清抗體游離試驗(yàn)結(jié)果均顯示為陽性，即可診斷為HDN；紅細(xì)胞直抗試驗(yàn)及紅細(xì)胞抗體釋放試驗(yàn)中至少有1項(xiàng)結(jié)果顯示為陽性，并與臨床膽紅素水平結(jié)合，也可診斷HDN[6]。

1.3 臨床評價(jià)

分析夫妻血型與孕婦IgG 型抗體效價(jià)的關(guān)系，以及孕婦的IgG 型抗體效價(jià)與HDN 的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，等級資料采用秩和檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析， P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 夫妻血型與孕婦IgG 型抗體效價(jià)的關(guān)系

夫妻血型為A-O、B-O、AB-O 的孕婦的IgG 型抗體效價(jià)<64、64～127、128～255、256～511、≥512例數(shù)占比比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

表1 夫妻血型與孕婦IgG 型抗體效價(jià)的關(guān)系分析（例）

2.2 IgG 型抗體效價(jià)與HDN 的相關(guān)性

孕婦IgG 型抗體效價(jià)<64的新生兒均未發(fā)生HDN；A-O、B-O、AB-O 組HDN 發(fā)生率隨著孕婦IgG 型抗體效價(jià)水平的增高呈逐漸升高趨勢，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

表2 IgG 型抗體效價(jià)與HDN 的相關(guān)性（%）

3 討論

HDN 主要是指發(fā)生于胎兒和新生兒早期，因母嬰血型差異導(dǎo)致的同族免疫性溶血[7-8]，臨床上主要包括ABO 血型系統(tǒng)及Rh 血型系統(tǒng)的溶血，以ABO 血型系統(tǒng)的溶血最為常見[9-11]。近年來，隨著相關(guān)研究的不斷深入，越來越多的學(xué)者提出HDN的發(fā)病機(jī)制為胎兒遺傳獲取A、B血型抗原，妊娠或分娩過程中上述抗原進(jìn)入母親血液循環(huán)，從而刺激其產(chǎn)生對胎兒紅細(xì)胞抗原的特異性抗體，待抗體進(jìn)入胎兒的血液循環(huán)后，可通過和胎兒紅細(xì)胞表面的A 或B 抗原特異性結(jié)合，導(dǎo)致胎兒的免疫系統(tǒng)被激活，從而引起胎兒或新生兒紅細(xì)胞的破壞溶解，可能引起不同程度的黃疸、水腫及貧血，病情嚴(yán)重時(shí)甚至可導(dǎo)致胎兒或新生兒死亡[12-14]。

本研究結(jié)果顯示，夫妻血型為A-O、B-O、AB-O 的孕婦的IgG 型抗體效價(jià)<64、64～127、128～255、256～511、≥512例數(shù)占比比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。李錦榮等[15]通過研究孕婦IgG 型抗體效價(jià)與HDN 的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，318例ABO 血型不合夫婦中，A-O、B-O、AB-O 分別占比49.7%、42.7%、7.5%；孕婦IgG 型抗體效價(jià)≥128的占比為48.1%，其中A-O、B-O、AB-O 組分別占比48.7%、48.5%、41.6%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本研究結(jié)果與其相似，表明不同血型組合中均可能發(fā)生HDN。分析原因?yàn)?，血型不合的母嬰中，胎兒紅細(xì)胞通過胎盤進(jìn)入母體血液循環(huán)中，多種組織細(xì)胞和體液中均存在A、B 血型物質(zhì)，非特異性刺激與多次妊娠等均可能引起IgG 型抗體的形成。有研究結(jié)果顯示，孕婦IgG 型抗體效價(jià)的高低和胎兒受害程度密切相關(guān)，通過檢測孕婦血清中的IgG 型抗體水平，診斷及預(yù)防HDN，具有靈敏度、準(zhǔn)確度較高的優(yōu)勢[16-18]。本研究結(jié)果顯示，孕婦IgG 型抗體效價(jià)<64的新生兒均未發(fā)生HDN；A-O、B-O、AB-O 組HDN 發(fā)生率隨著孕婦IgG型抗體效價(jià)水平的增高呈逐漸升高趨勢，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這提示，孕婦IgG 型抗體效價(jià)與HDN 發(fā)生率成正相關(guān)，即隨著孕婦IgG 型抗體效價(jià)水平的不斷增高，HDN 發(fā)生率升高。其原因可能為，IgG 型抗體效價(jià)越高，通過胎盤的概率越大，繼而增加了HDN 的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。有研究證實(shí)，孕婦IgG 型抗體效價(jià)的高低和胎兒受害程度密切相關(guān)，特別是當(dāng)IgG 型抗體效價(jià)≥64時(shí)，胎兒紅細(xì)胞受到源自母體抗體破壞的風(fēng)險(xiǎn)更大，從而使得新生兒出現(xiàn)ABO-HDN 的概率更高[19-20]。另外，當(dāng)孕婦IgG 型抗體效價(jià)≥64時(shí)，有新生兒未發(fā)生HDN，其原因可能與胎兒A、B 抗原強(qiáng)弱、血型物質(zhì)的含量不同及胎盤屏障作用有關(guān)。因此，在臨床實(shí)際工作中，無法單獨(dú)依據(jù)孕婦IgG 型抗體效價(jià)≥64即確定胎兒必然會(huì)發(fā)生HDN，針對該類孕婦需定期監(jiān)測其體內(nèi)的IgG 型抗體效價(jià)，予以相應(yīng)的治療措施，進(jìn)一步降低HDN 的發(fā)生率。

綜上所述，孕婦IgG 型抗體效價(jià)與HDN 發(fā)生率成正相關(guān)，即隨著孕婦IgG 型抗體效價(jià)水平的逐漸增高，HDN 發(fā)生率升高。因此，夫妻ABO 血型不合的O 型血孕婦產(chǎn)前檢測IgG 型抗體效價(jià)，對預(yù)測HDN 的發(fā)生具有重要的意義。