文/魏 勇 宋 潔 金庭輝 李 巖 楊一鳴 楊光澤 齊亞銀

（1 新疆天潤(rùn)乳業(yè)股份有限公司；2 新疆兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)總站；3 石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院）

牛病毒性腹瀉（BVD）是由牛病毒性腹瀉-黏膜病病毒（BVDV）感染牛引起的一種復(fù)雜、多種臨床病型的疫病。該病以發(fā)熱、黏膜糜爛潰瘍、白細(xì)胞減少、腹瀉、免疫耐受與持續(xù)感染、免疫抑制、先天性缺陷、懷孕母牛流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或畸形胎為主要特征的一種接觸性傳染病[1，2]。同時(shí)，BVD是一種重要的免疫抑制性疾病和持續(xù)性感染疫病（PI），一旦飼養(yǎng)管理松懈或牛只發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，繼發(fā)其他病原感染，將嚴(yán)重危害牛群健康和牧場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益。

近年來，新疆奶牛養(yǎng)殖業(yè)已從散放小規(guī)模型逐步向集約化、規(guī)?；?、精細(xì)化模式發(fā)展，特別是單體牧場(chǎng)逐步歸集為集團(tuán)化統(tǒng)一生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)[3]。飼養(yǎng)管理、營(yíng)養(yǎng)調(diào)配、環(huán)境控制等方面均發(fā)生了較大的變化，但在疫病防控方面，相比于養(yǎng)豬業(yè)和養(yǎng)雞業(yè)，牧場(chǎng)的意識(shí)和觀念均較落后。2016—2019年期間，筆者對(duì)南、北疆部分牧場(chǎng)的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，近年來牧場(chǎng)受PI牛的影響，奶牛繁殖率下降、生產(chǎn)性能下降，產(chǎn)弱犢、犢牛腹瀉、犢牛肺炎等問題嚴(yán)重影響了牧場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益提升和犢牛的培育。

因此，為查明南、北疆部分區(qū)域集約化牧場(chǎng)BVDV在不同奶牛養(yǎng)殖飼養(yǎng)條件、養(yǎng)殖模式、不同月齡的奶牛群中的感染及流行狀況，對(duì)南疆阿克蘇市和北疆烏魯木齊市、五家渠市、奎屯市、沙灣縣等地區(qū)的牧場(chǎng)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查和采樣檢測(cè)。采集6 月齡以上牛群血清、6 月齡以內(nèi)犢牛耳組織，采用雙抗夾心ELISA、IDEXX BVDV抗原快速檢測(cè)卡等方法進(jìn)行檢測(cè)。掌握BVDV在不同牧場(chǎng)感染、流行情況，為牧場(chǎng)制定BVD綜合防控、實(shí)施阻斷傳播途徑、淘汰PI牛和凈化牛群提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

1.1.1 牧場(chǎng)情況

7 個(gè)規(guī)?；翀?chǎng)，均為荷斯坦牛，存欄規(guī)模1 376～3 297 頭，其中4 個(gè)為散欄養(yǎng)殖，無臥床，冬季、夏季均在室外；3 個(gè)為現(xiàn)代化圈舍養(yǎng)殖，配有臥欄、噴淋、風(fēng)扇、自動(dòng)刮糞系統(tǒng)等，全部采用全混合日糧（TMR）飼喂。

表1 樣品采集來源統(tǒng)計(jì)表

表2 南、北疆部分規(guī)?；翀?chǎng)BVDV 抗原檢測(cè)匯總表

1.1.2 樣品來源

采樣日期2019年5月—2020年4月，6 月齡以上采血，6 月齡以內(nèi)采集耳組織，共采集樣品11 592份，其中血清9 086 份，耳組織2 506份。詳見表1。

1.2 試劑

西班牙Ingenasa（英吉納）BVDV雙抗夾心ELISA抗原檢測(cè)試劑盒，IDEXX BVDV抗原快速檢測(cè)卡。

1.3 檢測(cè)方法

本試驗(yàn)嚴(yán)格按照西班牙Ingenasa（英吉納）BVDV雙抗夾心ELISA抗原檢測(cè)試劑盒、IDEXX BVDV抗原快速檢測(cè)卡說明操作。

1.3.1 判定標(biāo)準(zhǔn)

酶標(biāo)儀450 nm處讀取OD值，陽性對(duì)照OD值/陰性對(duì)照OD值＞10，則判定有效；若為2 孔檢測(cè)，OD值取其算術(shù)平均值。

1.3.2 適用于血清、血漿、全血樣品

cut off=陽性對(duì)照OD值×0.1；樣品OD值＞（1+15%）×cut off值，BVDV抗原陽性；樣品OD值＜（1+15%）×cut off值，BVDV抗原陰性；樣品OD值介于兩者之間，判定為可疑。

1.3.3 適用于耳組織、細(xì)胞培養(yǎng)物

樣品OD值≥cut off值，BVDV抗原陽性；樣品OD值＜cut off值，BVDV抗原陰性。

2 結(jié)果

試驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)BVDV抗原檢測(cè)結(jié)果見表2。可以看出，南、北疆部分規(guī)模化牧場(chǎng)，群體抗原陽性率平均0.79%，傳統(tǒng)型牧場(chǎng)抗原陽性率平均1.00%（0.28%～2.62%），現(xiàn)代化牧場(chǎng)陽性率平均0.3 6%（0.17%～0.54%）。由于傳統(tǒng)型牧場(chǎng)養(yǎng)殖基礎(chǔ)設(shè)施條件相對(duì)較差，奶牛夏天熱應(yīng)激、冬季冷應(yīng)激等環(huán)境性應(yīng)激反應(yīng)較大，環(huán)境惡劣，奶牛體軀的衛(wèi)生評(píng)價(jià)明顯低于現(xiàn)代化牧場(chǎng)，免疫力較低，BVDV抗原陽性率明顯高于現(xiàn)代化牧場(chǎng)的總體平均水平，因此，奶牛養(yǎng)殖的硬件條件及舒適度管理等環(huán)境控制方面對(duì)BVDV防控至關(guān)重要。

表3 南、北疆部分規(guī)?；翀?chǎng)成母牛BVDV 抗原陽性率對(duì)標(biāo)表

表4 南、北疆部分規(guī)?；翀?chǎng)犢牛BVDV 抗原陽性率分析表

表5 南、北疆部分規(guī)?；翀?chǎng)不同牛群階段BVDV 抗原檢測(cè)對(duì)比表

試驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)成母牛B V D V 抗原陽性率見表3?？梢钥闯?，傳統(tǒng)型牧場(chǎng)成母牛BVDV抗原平均陽性率1.49%（0.00%～3.05%），明顯高于現(xiàn)代化牧場(chǎng)陽性率平均值0.18%（0.00%～0.6%），因此，加快對(duì)BVDV的凈化清除，對(duì)全群開展抗原檢測(cè)，對(duì)提高傳統(tǒng)型牧場(chǎng)的牛群健康非常必要。

牧場(chǎng)6 月齡內(nèi)犢牛BVDV抗原陽性率見表4?？梢钥闯?，不同牧場(chǎng)的犢牛出生檢測(cè)耳組織，抗原陽性率平均為0.9 6%（0.31%～2.16%），南、北疆不同區(qū)域及不同奶牛養(yǎng)殖模式無明顯差異，因此，對(duì)牧場(chǎng)長(zhǎng)期持續(xù)性開展BVDV抗原檢測(cè)非常必要。

牧場(chǎng)不同牛群階段BVDV抗原檢測(cè)結(jié)果見表5。可以看出，不同階段牛群檢測(cè)抗原陽性率差異不顯著，后備牛為0.96%，成母牛略高，為1.12%。

表6 南、北疆不同區(qū)域部分規(guī)?；翀?chǎng)BVDV 抗原檢測(cè)對(duì)比表

不同區(qū)域試驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)BVDV抗原檢測(cè)見表6?？梢钥闯觯辖翀?chǎng)的陽性率略高于北疆。

3 討論

南、北疆不同區(qū)域部分規(guī)?；膛?chǎng)的總體BVDV抗原平均陽性率0.79%，傳統(tǒng)老舊圈舍及改造牧場(chǎng)抗原平均陽性率1.00%（0.28%～2.62%），與歐洲國(guó)家PI牛全群陽性率為1.00%～2.00%[4]和北京地區(qū)規(guī)?；?chǎng)BVDV-PI牛場(chǎng)內(nèi)陽性率0.04%～1.02%報(bào)道[5]基本吻合。但因傳統(tǒng)型牧場(chǎng)養(yǎng)殖基礎(chǔ)設(shè)施與現(xiàn)代化牧場(chǎng)相比，環(huán)境條件相對(duì)較差，面對(duì)夏天熱應(yīng)激、冬季冷應(yīng)激等環(huán)境性應(yīng)激反應(yīng)較大，奶牛體軀的衛(wèi)生評(píng)價(jià)明顯低于現(xiàn)代化牧場(chǎng)，免疫力較低，BVDV抗原陽性率明顯高于現(xiàn)代化牧場(chǎng)的總體平均水平；傳統(tǒng)型牧場(chǎng)成母牛BVDV抗原平均陽性率1.49%，明顯高于現(xiàn)代化牧場(chǎng)平均陽性率0.18%。通過數(shù)據(jù)分析BVDV的抗原陽性率可能因養(yǎng)殖環(huán)境條件不同所產(chǎn)生的奶牛免疫力、耐受力不同而受到影響，因此，穩(wěn)定、舒適、干燥的奶牛養(yǎng)殖環(huán)境對(duì)于BVDV防控至關(guān)重要。

近年來的生產(chǎn)實(shí)踐結(jié)果表明，大部分試驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)對(duì)于該病的防控采用疫苗免疫結(jié)合持續(xù)開展PI牛的檢測(cè)凈化方式，取得了較好的效果。在免疫程序方面，成母牛采用春、秋兩季普免結(jié)合干奶牛的免疫；犢牛根據(jù)抗體消漲規(guī)律，在剛出生到斷奶之間進(jìn)行兩次免疫。為了防止垂直傳播，加強(qiáng)初乳、常乳的巴氏消毒；為了防止?fàn)倥；祓B(yǎng)后的水平傳播，犢牛斷奶前一直采用犢牛島單欄飼喂的方式。通過上述工作的實(shí)施，試驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)犢牛的健康水平有了非常顯著的提升，犢牛成活率平均98.00%以上，犢牛日增重可達(dá)900 g以上，為優(yōu)質(zhì)的后備牛培育奠定健康基礎(chǔ)，降低了牧場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)損失。

4 小結(jié)

本次調(diào)查的各牧場(chǎng)均存在B V D V 的P I 陽性牛，場(chǎng)陽性率100.00%，群體陽性率為0.72%（91/11 592）。其中，南疆牧場(chǎng)的感染率高于北疆牧場(chǎng)，成母牛感染率高于犢牛，傳統(tǒng)型牧場(chǎng)場(chǎng)感染率高于現(xiàn)代化牧場(chǎng)。全面和持續(xù)開展牛群PI牛檢測(cè)和淘汰陽性牛是控制該病的關(guān)鍵措施。