亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        粳稻蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因OsSUTs在灌漿期的表達(dá)特點(diǎn)

        2020-12-14 04:18:03呂東李丹丹徐汝聰
        江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020年20期
        關(guān)鍵詞:基因表達(dá)粳稻

        呂東 李丹丹 徐汝聰

        摘要:蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白編碼基因(SUTs)的表達(dá)在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中的蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)與分配途徑中起著至關(guān)重要的作用。由粳米生產(chǎn)的稻米具有良好的適口性,其市場(chǎng)需求量也越來越大,在稻米生產(chǎn)過程中,灌漿期是決定水稻產(chǎn)量和品質(zhì)的重要時(shí)期。由此可見,研究粳稻灌漿期蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白編碼基因(OsSUTs)的表達(dá)可為高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)粳稻品種的選育和栽培提供有價(jià)值的參考。以云南農(nóng)業(yè)大學(xué)稻作研究所保育的粳稻品系為材料,研究粳稻灌漿期葉片、穗部中OsSUTs基因的表達(dá)特點(diǎn)。結(jié)果表明,在粳稻葉片中,OsSUT2基因的表達(dá)量最高,而其余4個(gè)基因的表達(dá)量由高到低排序依次為OsSUT4、OsSUT1、OsSUT5、OsSUT3。穗部不同基因表達(dá)量的排序基本與葉片中的相同,由高到低為OsSUT2、OsSUT4、OsSUT5、OsSUT1、OsSUT3,不同的是OsSUT5與OsSUT1表達(dá)量的排序位置發(fā)生了對(duì)調(diào)。對(duì)比葉片、穗部中OsSUTs基因的表達(dá)量發(fā)現(xiàn),除OsSUT1基因在穗部中的表達(dá)量低于在葉片中的表達(dá)量外,其他4個(gè)基因(OsSUT2、OsSUT3、OsSUT4、OsSUT5)的表達(dá)量均是穗中高于葉片中。在葉片中,OsSUT3、OsSUT4、OsSUT5這3個(gè)基因間的相關(guān)性較高,呈極顯著正相關(guān)關(guān)系;但在穗中,OsSUTs基因間的相關(guān)性都較高,而且都達(dá)到了極顯著正相關(guān)水平。研究結(jié)果可為人們深入認(rèn)識(shí)水稻OsSUTs基因的表達(dá)特點(diǎn)及指導(dǎo)水稻高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)育種生產(chǎn)提供理論參考。

        關(guān)鍵詞:蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白;基因表達(dá);灌漿期;葉;穗;粳稻

        中圖分類號(hào):S511.01?? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A? 文章編號(hào):1002-1302(2020)20-0056-06

        水稻(Oryza sativa)是全球重要的糧食作物,世界上有一半的人口以水稻為主食[1-2]。隨著國家稻米市場(chǎng)的開放及人民生活水平的提高,近年來人們對(duì)粳米的需求量與日俱增,國內(nèi)粳米供需矛盾突出[3]。2018年,全球粳米消費(fèi)量較2010年增長(zhǎng)了約6900萬t,增幅約為19%,全球粳米消費(fèi)量占大米總消費(fèi)量的比例由2010年的13%上升至2018年的14%。目前,我國仍為第一大粳米消費(fèi)國,2018年的粳米消費(fèi)量約為4200萬t,較2010年增加了約400萬t。因此,要保證粳米供給,必須擴(kuò)大粳稻生產(chǎn)能力,突破粳稻品種選育滯后的問題,培育高產(chǎn)、抗逆的粳稻新品種[4]。高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)粳稻品種的選育和生產(chǎn)離不開對(duì)粳稻遺傳和生理代謝等各方面的深入研究。

        蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(sucrose transporter,簡(jiǎn)稱SUT)是協(xié)調(diào)植物中碳素分配的重要分子,在植物各個(gè)生長(zhǎng)階段的能量分配中起著至關(guān)重要的作用[5]。多個(gè)研究發(fā)現(xiàn),SUTs基因之間通過相互協(xié)作或相互抑制來共同調(diào)節(jié)植物的生理代謝及生長(zhǎng)發(fā)育[6]。研究發(fā)現(xiàn),沉默馬鈴薯(Solanum tuberosum)StSUT4基因,StSUT1基因呈現(xiàn)出過表達(dá)現(xiàn)象,甚至導(dǎo)致馬鈴薯花期提前[7];對(duì)擬南芥(Arabidopsis thaliana)的AtSUT1基因進(jìn)行過表達(dá)發(fā)現(xiàn),AtSUT2、AtSUT4基因的表達(dá)量相對(duì)下降[8]。此外,SUTs基因與植物的抗逆性也緊密相關(guān)。在對(duì)擬南芥AtSUT9基因進(jìn)行沉默處理后,發(fā)現(xiàn)擬南芥植株對(duì)鹽脅迫、滲透脅迫和低溫脅迫的抵抗能力顯著提高[9];對(duì)蘋果(Malus domestica)的MaSUT2基因進(jìn)行過表達(dá)后,發(fā)現(xiàn)植株對(duì)鹽脅迫的抵抗力也明顯增強(qiáng)[10]。

        目前,研究者在水稻中共鑒定出5個(gè)蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白編碼基因(OsSUT1、OsSUT2、OsSUT3、OsSUT4、OsSUT5)[11],其中對(duì)OsSUT1基因功能的研究較多,發(fā)現(xiàn)其在花粉發(fā)育、籽粒淀粉積累、灌漿速率、千粒質(zhì)量等多個(gè)方面都起著非常重要的作用[12-13]。Miyazaki等研究發(fā)現(xiàn),水稻耐熱品種Genkitsukushi(暫無中文名稱)在水稻抽穗期的莖、成熟期的種子中的OsSUT1基因表達(dá)量要明顯高于其他熱敏品種,說明此基因表達(dá)量的上調(diào)可以提高水稻對(duì)高溫脅迫的抗性[14]。OsSUT2基因在水稻籽粒灌漿的過程中對(duì)有機(jī)物的轉(zhuǎn)運(yùn)起著重要作用,該基因突變會(huì)導(dǎo)致水稻農(nóng)藝性狀發(fā)生變化,如分蘗數(shù)減少,株高、千粒質(zhì)量及根部干質(zhì)量明顯下降等,而其過表達(dá)會(huì)抑制OsSUT4基因的表達(dá)。此外,OsSUT2基因表達(dá)量的上調(diào)還可明顯增強(qiáng)植株的抗旱和抗鹽能力[15]。OsSUT3、OsSUT4和OsSUT5基因?qū)Ψf果早期發(fā)育過程中的蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)起著一定的作用[11]。從表達(dá)模式上看,OsSUT3優(yōu)先在水稻花粉中表達(dá),因此推測(cè)其可能影響花粉發(fā)育過程中的淀粉積累[12]。OsSUT5基因在庫組織中的表達(dá)量較高,與作物產(chǎn)量增加有關(guān),抑制其表達(dá)會(huì)導(dǎo)致OsSUT1基因的表達(dá)量下調(diào)[16]。將OsSUT5基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯中發(fā)現(xiàn),馬鈴薯產(chǎn)量提高了1.9倍多,說明此基因還可以調(diào)節(jié)植物果實(shí)的生長(zhǎng)發(fā)育[17]。

        灌漿期是水稻生殖生長(zhǎng)的一個(gè)重要環(huán)節(jié),然而目前關(guān)于粳稻灌漿期OsSUTs基因表達(dá)特點(diǎn)的報(bào)道較少。本研究以云南農(nóng)業(yè)大學(xué)稻作所保育的部分粳稻品種(系)為材料,通過分析粳稻品種(系)灌漿期OsSUTs基因在葉片、穗中的表達(dá)模式,為選育高優(yōu)、穩(wěn)產(chǎn)的粳稻品種及水稻碳水化合物在源庫流分配中的分子調(diào)控提供重要的參考價(jià)值。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        粳稻材料共30份,均由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)稻作所保育。試驗(yàn)材料種植于云南省宜良市云南農(nóng)業(yè)大學(xué)稻作所試驗(yàn)田,采用大田常規(guī)管理,同時(shí)取樣灌漿期的穗和綠色葉片,用液氮速凍后于-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2 試驗(yàn)方法

        1.2.1 總RNA的提取 參照天根生化科技(北京)有限公司的RNA提取試劑盒說明書,用液氮預(yù)冷的鑷子取100 mg水稻材料放入1.5 mL離心管中,并在離心管中加入液氮,用滅菌的研磨棒將材料充分磨碎。研磨完畢后立即加入1 mL TRIzol,并振蕩混勻。將勻漿樣品在室溫下放置5 min,使核酸蛋白復(fù)合物完全分離,TRIzol、三氯甲烷的添加比例為1 mL ∶ 0.2 mL,蓋好管蓋后劇烈振蕩15 s,室溫放置3 min,然后于4 ℃、12 000 r/min離心 15 min;將上層無色液體轉(zhuǎn)移到新的離心管中,加入1 mL 75%乙醇洗滌沉淀,然后于4 ℃、5 000 r/min離心 3 min。倒出上部液體,將剩余的少量液體于 5 000 r/min 離心10 s,然后用槍頭吸出液體,將帶有沉淀的離心管室溫放置約2~3 min,再加入30~60 μL RNas-Free ddH2O,以充分溶解RNA。

        1.2.2 cDNA的合成 根據(jù)TaKaRa逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行cDNA的合成。第1步,在RNase-free的無菌PCR管中加入4 μL H2O(RNase free)、2 μL 5×gDNA Eraser Buffer、1 μL gRNA Eraser和提取的 3 μL 總RNA,4 ℃、5 000 r/min離心5 s,于42 ℃恒溫 2 min,然后立即轉(zhuǎn)移到冰上降溫處理1 min;第2步,在新的RNase-free的PCR管中加入4 μL H2O(RNase free)、4 μL Prime Script Buffer、1 μL RT Prime Mix、1 μL Prime Script RT Enzyme Mix和10 μL 第1步的RNA混合液,然后將其置于37 ℃恒溫處理15 min,隨后于85 ℃處理5 s,取出后保存在-80 ℃,備用。

        1.2.3 qRT-PCR 使用筆者所在課題組前期研究設(shè)計(jì)的5對(duì)OsSUTs基因的定量引物進(jìn)行qRT-PCR試驗(yàn),OsSUTs基因和內(nèi)參β-actin基因引物均由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。用SuperReal PreMix Plus[SYBR Green,天根生化科技(北京)有限公司]試劑盒及CFX96 Optical Reaction Module(美國伯樂公司)PCR儀進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR擴(kuò)增。反應(yīng)體系:12.5 μL 2×SuperReal PreMix Plus,1 μL cDNA,正、反向引物各1 μL,用RNase-free ddH2O補(bǔ)充總體積至25 μL。反應(yīng)程序:95 ℃ 10 min;95 ℃ 15 s,61 ℃ 1 min,40個(gè)循環(huán)。每個(gè)樣品獨(dú)立重復(fù)3次。

        1.3 數(shù)據(jù)處理

        數(shù)據(jù)在Excel軟件中采用2-△△CT法[18]進(jìn)行分析,表達(dá)量數(shù)據(jù)圖的繪制及相關(guān)性分析采用GraphPadPrism 8.0軟件進(jìn)行。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 葉片和穗中OsSUTs基因在灌漿期的相對(duì)表達(dá)量

        葉片的qRT-PCR結(jié)果表明,OsSUT2的相對(duì)表達(dá)量最高,達(dá)到28.464,其次為OsSUT4、OsSUT1、OsSUT5,OsSUT3的相對(duì)表達(dá)量最低,為0.002;與其他4個(gè)基因相比,OsSUT2的相對(duì)表達(dá)量是OsSUT1的28.464倍,OsSUT3的14 232倍,OsSUT4的3985倍,OsSUT5的9 488倍;OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量雖居第2,但卻明顯高于OsSUT1、OsSUT3、OsSUT5,分別是它們的7.142、3 571、2 381倍;OsSUT1的相對(duì)表達(dá)量位列第3,是OsSUT3的500.0倍,OsSUT5的333.3倍;在5個(gè)基因中OsSUT5與OsSUT3的相對(duì)表達(dá)量最接近,OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量?jī)H為OsSUT3的1.5倍(圖1-A)。

        穗部OsSUTs的相對(duì)表達(dá)量最高的也為OsSUT2,達(dá)49.068,其次為OsSUT4,最低的是OsSUT3,相對(duì)表達(dá)量為0.057;與其他4個(gè)基因相比,OsSUT2的相對(duì)表達(dá)量是OsSUT1的49.068倍,OsSUT3的860.842倍,OsSUT4的2.682倍,OsSUT5的9.640倍;穗部OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量也是排在第2位,為OsSUT1的18.297倍,OsSUT5的3595倍;OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量也較高,為OsSUT1的5090倍,OsSUT3的89.298倍,OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量?jī)H為OsSUT5的3595倍;與葉片中相似,OsSUT3的相對(duì)表達(dá)量最低,且與其他4個(gè)基因之間的差異極大(圖1-B)。

        綜上可見,OsSUT2的相對(duì)表達(dá)量在葉片、穗部均為最高,OsSUT1、OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量在葉片、穗部也都相對(duì)較高,并且排序也較一致,均為OsSUT2 > OsSUT4 > OsSUT1。在檢測(cè)的2個(gè)組織中,OsSUT3的相對(duì)表達(dá)量均為最低。有趣的是,OsSUT5在葉片中的相對(duì)表達(dá)量很低,但在穗部其相對(duì)表達(dá)量卻較葉片中有所提高,接近OsSUT2的10%,變化最明顯。

        將葉片與穗部OsSUTs的相對(duì)表達(dá)量進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn),由圖2可知,只有OsSUT1的相對(duì)表達(dá)量表現(xiàn)為葉片中高于穗部,前者約比后者高2.4倍,葉片中其余4個(gè)基因的相對(duì)表達(dá)量均低于穗部;OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量在葉片與穗部中的差異最大,穗部中的相對(duì)表達(dá)量是葉片中的1 176.44倍;OsSUT3和OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量在葉片中與穗中的差異也極明顯,穗部中OsSUT3的相對(duì)表達(dá)量是葉片中的108倍,穗部中OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量是葉片中的11.9倍;OsSUT2在葉片中和穗部中的相對(duì)表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定,穗部中OsSUT2的相對(duì)表達(dá)量較葉片中僅增加了1.15倍。

        以上結(jié)果表明,在5個(gè)OsSUTs中,OsSUT1~4的表達(dá)量在葉片中和穗中差異明顯,OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量在葉片和穗部中的差異很大。

        2.2 OsSUTs相對(duì)表達(dá)量的相關(guān)性分析

        由表1可以看出,在葉片中,OsSUT1的相對(duì)表達(dá)量與OsSUT2的相對(duì)表達(dá)量呈顯著正相關(guān)關(guān)系,與OsSUT3、OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,但與OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量無顯著相關(guān)性;

        OsSUT2 的相對(duì)表達(dá)量只與 OsSUT1 的相對(duì)表達(dá)量呈顯著正相關(guān)關(guān)系,與其他3個(gè)基因的相對(duì)表達(dá)量無顯著相關(guān)性;OsSUT3的相對(duì)表達(dá)量與OsSUT1、OsSUT4、OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量呈極顯著相關(guān)關(guān)系,且與OsSUT5相對(duì)表達(dá)量的相關(guān)性最高,與OsSUT2的相對(duì)表達(dá)量無顯著相關(guān)性;OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量與OsSUT3、OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,與OsSUT1、OsSUT2的相對(duì)表達(dá)量無顯著相關(guān)性;OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量與OsSUT1、OsSUT3、OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量呈極顯著相關(guān)關(guān)系,但與OsSUT2的相對(duì)表達(dá)量無顯著相關(guān)性。

        由表1還可以看出,穗部OsSUT1的相對(duì)表達(dá)量與OsSUT2、OsSUT3、OsSUT4、OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系;OsSUT2的相對(duì)表達(dá)量與OsSUT1、OsSUT3、OsSUT4、OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,且與OsSUT5相對(duì)表達(dá)量的相關(guān)性最高;OsSUT3的相對(duì)表達(dá)量與OsSUT1、OsSUT2、OsSUT4、OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系;OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量與OsSUT1、OsSUT2、OsSUT3、OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系;OsSUT5的相對(duì)表達(dá)量與OsSUT1、OsSUT2、OsSUT3、OsSUT4的相對(duì)表達(dá)量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系。

        綜上可見,這5個(gè)OsSUTs在穗中的表達(dá)量相互間具有極顯著的相關(guān)性,但是OsSUTs的相對(duì)表達(dá)量在葉片和穗部間的相關(guān)性不顯著(表2)。

        3 討論與結(jié)論

        3.1 灌漿期OsSUTs基因在葉片中的表達(dá)特點(diǎn)

        植物體中蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是具有蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)活性的跨膜結(jié)構(gòu)蛋白,在植物生長(zhǎng)發(fā)育、生理代謝、蔗糖的運(yùn)輸和分配過程中起著關(guān)鍵作用,還可以通過識(shí)別蔗糖信號(hào)影響其他代謝途徑[19]。目前,人們從水稻中共鑒定出5個(gè)OsSUT基因,其中OsSUT1主要在韌皮部裝載及同化物運(yùn)輸過程中起關(guān)鍵作用[20]。OsSUT1是負(fù)責(zé)運(yùn)輸蔗糖的關(guān)鍵基因,在籽粒灌漿期間,葉片產(chǎn)生的同化產(chǎn)物需要以蔗糖的形式通過韌皮部進(jìn)行長(zhǎng)距離運(yùn)輸才能到達(dá)穗部,并且長(zhǎng)距離運(yùn)輸途徑并不集中在葉部,而是在整個(gè)植株中,因此OsSUT1在葉片中的表達(dá)量不會(huì)太高。本研究中,OsSUT1在灌漿期葉片中的表達(dá)量在5個(gè)OsSUT基因中處于中間水平,也能說明OsSUT1在灌漿期的葉片中并沒有較高表達(dá)量這一特點(diǎn)。OsSUT2主要在液泡膜上表達(dá),并且在糖從源器官葉片輸出到庫器官的過程中扮演著重要角色,而在水稻灌漿期,葉片是光合作用的主要場(chǎng)所,其在灌漿期合成蔗糖的作用明顯增大,使得葉肉液泡中的蔗糖含量顯著增加[15]。本研究結(jié)果顯示,OsSUT2在灌漿期葉片中的表達(dá)量最高,說明OsSUT2在光合同化物的運(yùn)輸和分配過程中起著舉足輕重的作用。有研究發(fā)現(xiàn),OsSUT3在開花后20 d會(huì)降低到幾乎不能檢測(cè)的水平[11]。本研究發(fā)現(xiàn),OsSUT3在灌漿期葉片中的表達(dá)量極低,說明OsSUT3在水稻灌漿階段的作用不明顯。在水稻的庫—源轉(zhuǎn)化過程中,OsSUT4在葉鞘中有較高的表達(dá)量[21]。本研究中,OsSUT4在葉片中的表達(dá)量較高,也可能說明OsSUT4對(duì)于葉片中的蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)起著很重要的作用。有研究認(rèn)為,OsSUT5主要參與蔗糖在組織和穎果中的卸載過程[22],而本研究發(fā)現(xiàn),OsSUT5在葉片中相對(duì)表達(dá)量較低,說明OsSUT5發(fā)揮作用的主要場(chǎng)所不在葉片中。

        3.2 灌漿期OsSUTs基因在穗中的表達(dá)特點(diǎn)

        籽粒充實(shí)是水稻高產(chǎn)的重要保障。Aoki等研究OsSUT1發(fā)現(xiàn),在水稻庫組織中OsSUT1表達(dá)量很小[11],這與Hirose等研究發(fā)現(xiàn)的在開花后的穗中幾乎檢測(cè)不到OsSUT1的表達(dá)[21]相似,這與本研究發(fā)現(xiàn)的OsSUT1在穗中表達(dá)量相對(duì)較低的結(jié)果也一致。研究發(fā)現(xiàn),OsSUT2在水稻各組織中呈表達(dá)水平穩(wěn)定趨勢(shì)[11],并通過其在花后籽粒的表達(dá)模式,推斷出OsSUT2在籽粒的生長(zhǎng)發(fā)育中起著主導(dǎo)作用,此外通過抑制OsSUT2的表達(dá),從而造成源端光合作用合成的蔗糖不能及時(shí)有效地輸送到庫細(xì)胞中,從而造成源端大量積累蔗糖,籽粒蔗糖供應(yīng)不充足,最終造成其生長(zhǎng)遲緩,分蘗數(shù)、株高、千粒質(zhì)量和根干質(zhì)量顯著降低,結(jié)實(shí)率低,結(jié)實(shí)不飽滿及品質(zhì)差等問題[15]。反之將OsSUT2進(jìn)行過表達(dá),發(fā)現(xiàn)其在抽穗后的表達(dá)量顯著高于普通植株OsSUT2的表達(dá)量,并且在灌漿期中有效地提高了光合產(chǎn)物的轉(zhuǎn)運(yùn)和轉(zhuǎn)換,進(jìn)而顯著地提高了水稻的單株粒質(zhì)量及籽粒充實(shí)度[23]。這與本研究發(fā)現(xiàn)的葉與穗中OsSUT2的表達(dá)量都是穩(wěn)定最高的結(jié)果相符,同時(shí)也表明了它對(duì)水稻產(chǎn)量確實(shí)有著重要的影響。他人研究發(fā)現(xiàn),OsSUT3表達(dá)量有一定的波動(dòng)性,在開花后1~2 d時(shí)達(dá)到最大,但在3 d時(shí)明顯下降,5~7 d又恢復(fù),然后逐漸下降[24-25]。本研究中,灌漿期穗中的OsSUT3表達(dá)量極低,這可能說明OsSUT3在灌漿期行使的功能場(chǎng)所并不在穗中;OsSUT4在穎果等組織中有較強(qiáng)的表達(dá)[11],這與本研究發(fā)現(xiàn)的OsSUT4在穗部的表達(dá)量較高的結(jié)果吻合。OsSUT5在花序及發(fā)育早期的穎果中能特異表達(dá),其功能與籽粒的充實(shí)度和灌漿相關(guān)[26],本研究中OsSUT5的表達(dá)量顯著增加與前人研究結(jié)果相同,這說明OsSUT5對(duì)水稻灌漿起著一定的作用。

        3.3 葉穗間OsSUTs相對(duì)表達(dá)量的相關(guān)性

        水稻葉片是蔗糖合成的重要產(chǎn)所,蔗糖從源到庫的轉(zhuǎn)運(yùn)效率也尤為重要[27]。在水稻灌漿期間,葉片能為稻穗籽粒的充實(shí)提供合成有機(jī)物的源物質(zhì)。因此,研究灌漿期葉和穗器官中OsSUTs基因表達(dá)的相關(guān)性可為探討光合同化物運(yùn)輸、分配的代謝調(diào)控和水稻高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培提供理論參考。而在植物體的生長(zhǎng)發(fā)育過程中,蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因會(huì)在植物的不同組織、不同時(shí)期中協(xié)同調(diào)控植物體的生長(zhǎng)過程,因此蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因可能是單個(gè)特異的也可能是部分重疊的。本研究發(fā)現(xiàn),多數(shù)OsSUTs基因的表達(dá)量在葉中不相關(guān),這很可能跟OsSUTs特異性表達(dá)有關(guān)。比如OsSUT1與OsSUT5都是定位在質(zhì)膜上的蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,但OsSUT5的特異性又比OsSUT1差[28],與本研究相同的是OsSUT1與OsSUT5之間存在極顯著正相關(guān)關(guān)系,但相關(guān)性并不明顯。OsSUT2是定位在液泡中[15],而液泡作為貯存和積累能量的細(xì)胞器,其主要功能是調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓,因此OsSUT2與細(xì)胞膜上的OsSUT1、OsSUT5幾乎是無相關(guān)性。OsSUT3與OsSUT4功能尚不明確,但本研究發(fā)現(xiàn),OsSUT3、OsSUT4與OsSUT5都呈極顯著相關(guān)關(guān)系且相關(guān)性較大,因此猜測(cè)OsSUT3與OsSUT4在葉片當(dāng)中也起著一定作用,具體的機(jī)制有待下一步研究。

        穗是水稻利用或貯存同化物的庫,有研究認(rèn)為庫能刺激葉片中的光合活性,調(diào)節(jié)光合產(chǎn)物的分配[29]?;贠sSUTs基因在花后籽粒中的表達(dá)模式,可將籽粒發(fā)育分為2個(gè)階段,第1個(gè)階段為花后的1~4 d,為籽粒的生長(zhǎng)及細(xì)胞分化階段;第2階段為花后5~15 d,為籽粒達(dá)到最長(zhǎng)并開始增重階段[30]。由此可推測(cè)出OsSUT2、OsSUT4和OsSUT5在第1階段起主要作用,OsSUT1則在第2階段起作用,而OsSUT3則起著銜接這2個(gè)階段的作用[24]。與本研究的結(jié)果類似,在穗中,OsSUTs之間都呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,證明這5個(gè)基因共同協(xié)調(diào)灌漿期的籽粒發(fā)育過程。此外,也有人認(rèn)為,在開花期0~14 d,在水稻中過表達(dá)OsSUT2基因,OsSUT4的表達(dá)量明顯降低,為正常植株表達(dá)量的一半,表明OsSUT2基因的過表達(dá)可能會(huì)抑制OsSUT4的表達(dá)量[26]。而在本研究中,發(fā)現(xiàn)水稻灌漿期中的OsSUT2與OsSUT4基因呈正相關(guān)關(guān)系,這與上述結(jié)果相悖,猜測(cè)可能是植株本身會(huì)有一定的臨界值,在過表達(dá)植株上,OsSUT2大量表達(dá)可能會(huì)適得其反,造成其他基因表達(dá)量降低以及影響植株生長(zhǎng)發(fā)育。OsSUT3、OsSUT4與OsSUT5在穗中呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,且OsSUT5抑制表達(dá)會(huì)導(dǎo)致千粒質(zhì)量降低,結(jié)實(shí)率降低[23]。由此猜測(cè)這幾個(gè)基因都與水稻的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量有著緊密的關(guān)系。這也為OsSUT3與OsSUT4這2個(gè)基因功能的進(jìn)一步研究提供了一定的參考價(jià)值。

        葉片與穗部是水稻最主要的源與庫器官。而流則是源和庫之間的橋梁,流運(yùn)行通暢會(huì)間接或者直接影響到源和庫的生理活性。前人研究發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)OsSUT2與OsSUT5會(huì)加快光合轉(zhuǎn)運(yùn)速率,理論上其最終的堊白度應(yīng)該高于對(duì)照,但結(jié)果是堊白度低于對(duì)照[23]。從這里可以猜測(cè),從源中將光合產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)庫中不僅僅依靠蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白就能完成,在轉(zhuǎn)運(yùn)的過程中,還需要細(xì)胞壁轉(zhuǎn)化酶[31-33]、單糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白[34]等共同配合完成,并且在灌漿期中籽粒淀粉的生物合成過程中還有大量的酶與蛋白質(zhì)參與。而本研究只涉及蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因,這也就說明了葉穗間OsSUTs并無相關(guān)性的原因。

        綜上,在本研究中,OsSUT2無論在葉和穗中表達(dá)量都顯著高于其他4個(gè)基因,說明OsSUT2在灌漿期對(duì)蔗糖的轉(zhuǎn)運(yùn)分配起著重要的作用。由于5個(gè)OsSUTs基因在穗中的表達(dá)量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,表明在穎果成熟階段這5個(gè)基因是協(xié)同表達(dá)的。本研究可為蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)基因表達(dá)關(guān)系的進(jìn)一步研究提供參考。

        參考文獻(xiàn):

        [1]程式華,胡培松. 中國水稻科技發(fā)展戰(zhàn)略[J]. 中國水稻科學(xué),2008,22(3):223-226.

        [2]胡 鋒. 保障我國糧食安全的水稻品種創(chuàng)新與應(yīng)用研究[J]. 種子,2009,28(2):106-107,110.

        [3]陳溫福,潘文博,徐正進(jìn). 我國粳稻生產(chǎn)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)[J]. 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2006,37(6):801-805.

        [4]胡蘭香. 南方粳稻育種分析[J]. 南方農(nóng)業(yè),2018,12(18):180-181.

        [5]Wang L,Lu Q T,Wen X G,et al. Enhanced sucrose loading improves rice yield by increasing grain size[J]. Plant Physiology,2015,169(4):2848-2862.

        [6]Jung D L,Jung-Ⅱ C,Youn-Ⅱ P,et al. Sucrose transport from source to sink seeds in rice[J]. Physiologia Plantarum,2006,126(4):517-584.

        [7]Izabela A,Chincinska,Johannes L,et al. Sucrose transporter StSUT4 from potato affects flowering,tuberization,and shade avoidance response[J]. Plant Physiology,2008,146(2):515-528.

        [8]He H,Chincinska I,Hackel A et al. Phloem mobility and stability of sucrose transporter transcripts[J]. The Open Plant Science Journal,2008,2:1-14.

        [9]Jia W Q,Zhang L J,Wu D,et al. Sucrose transporter AtSUC9 mediated by a low sucrose level is involved in arabidopsis abiotic stress resistance by regulating sucrose distribution and ABA accumulation[J]. Plant Physiology,2015,56(8):1574-1587.

        [10]Ma Q J,Sun M H,Lu J,et al. Transcription factor AREB2 is involved in soluble sugar accumulation by activating sugar transporter and amylase genes[J]. Plant Physiology,2017,174(4):2348-2362.

        [11]Aoki N,Hirose T,Scofield G N,et al. The sucrose transporter gene family in rice[J]. Plant & Cell Physiology,2003,44(3):223-232.

        [12]Hirose T,Zhang Z J,Miyao A,et al. Disruption of a gene for rice sucrose transporter,OsSUT1,impairs pollen function but pollen maturation is unaffected[J]. J Exp Bot,2010,61(13):3639-3646.

        [13]孫學(xué)武. 生育后期過表達(dá)OsSUT1基因?qū)λ咎妓衔锱c粒重的影響[D]. 長(zhǎng)沙:中南大學(xué)隆平分院,2013:3-4.

        [14]Miyazaki M,Araki M,Okamura K,et al. Assimilate translocation and expression of sucrose transporter,OsSUT1,contribute to high-performance ripening under heat stress in the heat-tolerant rice cultivar Genkitsukushi[J]. Journal of Plant Physiology,2013,170(18):1579-1584.

        [15]Eom J S,Cho J I,Reinders A,et al. Impaired function of the tonoplast-localized sucrose transporter in rice,OsSUT2,limits the transport of vacuolar reserve sucrose and affects plant growth[J]. Plant Physiol,2011,157(1):109-119.

        [16]張武君,管其龍,付艷萍,等. 反義抑制水稻蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(OsSUT5)的表達(dá)降低其愈傷組織誘導(dǎo)和植株再生頻率[J]. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào),2014,22(7):825-831.

        [17]Sun A J,Dai Y,Zhang X S,et al. A transgenic study on affecting potato tuber yield by expressing the rice sucrose transporter genes OsSUT5Z and OsSUT2M.[J]. Journal of Integrative Plant Biology,2011,53(7):586-595.

        [18]Willems E,Leyns L,Vandesompele J. Standardization of real-time PCR gene expression data from independent biological replicates[J]. Analytical Biochemistry,2008,379(1):127-129.

        [19]Schulze W X,Reinders A,Ward J,et al. Interactions between co-expressed Arabidopsis sucrose transporters in the split-ubiquitin system.[J]. BMC Biochemistry,2003,4:3.

        [20]Barker L,Kühn C,Weise A et al. SUT2,a putative sucrose sensor in sieve elements[J]. Plant Cell,2000,12(7):1153-1164.

        [21]Hirose T,Imaizumi N,Scofield G N et al. cDNA cloning and tissue specific expression of a gene for sucrose transporter from rice (Oryza sativa L.) [J]. Plant & Cell Physiology,1997,38(12):1389-1396.

        [22]孫愛君. 水稻蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的鑒定、表達(dá)分析及遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 北京:中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所,2005:56-58.

        [23]洪海強(qiáng). 過表達(dá)OsSUT2和OsSUT5秈稻的灌漿生理[D]. 福州:福建農(nóng)林大學(xué),2008.

        [24]Bush D R. Inhibitors of the proton-sucrose symport[J]. Bush,1993,307(2):355-360.

        [25]Murata Y. Rice[C]//Evans L T. Crop physiolog. Cambridge:Cambridge University Press,1977.

        猜你喜歡
        基因表達(dá)粳稻
        我國雙季早粳稻實(shí)現(xiàn)“零的突破”
        解讀粳稻品種南方種植播期
        豫南粳稻機(jī)械化適應(yīng)品種篩選及利用研究
        一個(gè)粳稻早熟突變體的遺傳分析及育種應(yīng)用潛力的初步評(píng)價(jià)
        低溫處理對(duì)斑馬魚CNSS系統(tǒng)應(yīng)激相關(guān)基因的影響
        抗菌肽對(duì)細(xì)菌作用機(jī)制的研究
        基因芯片在胃癌及腫瘤球細(xì)胞差異表達(dá)基因篩選中的應(yīng)用
        美洲大蠊提取液對(duì)大鼠難愈合創(chuàng)面VEGF表達(dá)影響的研究
        二甲基砷酸毒理學(xué)的研究進(jìn)展
        非生物脅迫對(duì)擬南芥IQM4基因表達(dá)的影響
        科技視界(2016年16期)2016-06-29 11:55:38
        日本一区二区久久精品亚洲中文无| 国产97在线 | 免费| 牛牛本精品99久久精品88m| 国产福利97精品一区二区| 久久综合五月天啪网亚洲精品 | 特级毛片a级毛片免费播放| 国产一区二区三区免费在线视频| 国产福利一区二区三区在线观看 | 国产午夜精品一区二区| 巨大欧美黑人xxxxbbbb| 久久狠狠爱亚洲综合影院| 羞羞色院99精品全部免| 人妻中文字幕无码系列 | 午夜久久精品国产亚洲av| 射进去av一区二区三区| 人人妻人人澡人人爽国产一区| 亚洲精品无码mv在线观看| 亚洲无线码1区| 一区二区午夜视频在线观看| 日本一二三区视频在线| 免费人成再在线观看网站| 女人被躁到高潮嗷嗷叫免费软| 麻豆人妻性色av专区0000| 亚洲人成色7777在线观看不卡| 久久久久这里只有精品网| 丝袜美女美腿一区二区| 免费午夜爽爽爽www视频十八禁| 亚洲欧美在线观看| 91福利国产在线观看网站| 99久久精品国产91| 国产精品女人呻吟在线观看| 五月天激情综合网| 人妻av不卡一区二区三区| 久青草影院在线观看国产| 亚洲av无码日韩精品影片| 四虎成人精品国产永久免费| 日本av天堂一区二区三区| 曰韩无码二三区中文字幕| 久久亚洲国产成人亚| aa日韩免费精品视频一| 夫妇交换性三中文字幕|