鄭州市食品藥品檢驗所（450000）孫曉朋 閆文斌 曹瑩 王萌

藥品微生物檢驗實驗室質(zhì)量控制為藥品質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)，結(jié)合微生物檢驗結(jié)果進行風險評判。由于微生物檢驗易受到多種影響因素影響導致結(jié)果出現(xiàn)誤差，如檢驗環(huán)境、培養(yǎng)基質(zhì)量、菌種活力、操作人員技術(shù)標準等[1]。藥品衛(wèi)生安全問題備受重視，藥品若受到微生物污染，對藥品作用及人類健康造成極大危害。由于藥品微生物檢驗實驗室控制的重要性，需明確常見影響實驗室質(zhì)量控制因素，分析藥品微生物異常結(jié)果的來源，避免假陽性或假陰性結(jié)果[2]。我國建立完善的藥品監(jiān)管體系，重視藥品微生物檢查單過程控制及實驗室質(zhì)量控制的風險管理，保證優(yōu)化藥品微生物檢查實驗室質(zhì)量控制效果[3]。為此，本次研究針對藥品微生物檢查實驗室質(zhì)量控制影響因素，為制定改進措施提供依據(jù)，詳細報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本所2018年1月～2019年12月期間檢驗的藥品848批作為資料，包含丸劑375批，片劑221批，口服液140批，外用制劑90批，顆粒制劑22批。

1.2 方法 計數(shù)菌和控制菌，其中計數(shù)菌包括：需氧菌、霉菌和酵母菌；控制菌包括：耐膽鹽革蘭陰性菌、大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、梭菌、白色念珠菌，并記錄誤差發(fā)生情況，追究誤差根源，分析影響因素，設(shè)置一級指標：人員、物品、環(huán)境、標準，再細分二級指標，包含：①人員：操作人員檢驗操作技能水平，操作人員對質(zhì)量控制的重視程度；②物品：樣品受到地理環(huán)境影響導致污染，活體易變性，微生物檢驗難度，檢品中抑菌成分、原料藥滅菌、實驗室設(shè)備性能；③環(huán)境：菌液、菌懸液、培養(yǎng)基保存及質(zhì)量控制，菌懸液培養(yǎng)時間控制，稀釋精確性，驗證用菌傳代次數(shù)，實驗室空氣質(zhì)量，實驗室來源菌；④標準：實驗室環(huán)境質(zhì)控標準，藥典標準。

1.3 觀察指標 統(tǒng)計微生物檢驗誤差發(fā)生率，分析人員、物品、環(huán)境、標準等一級影響因素占比，并統(tǒng)計二級影響因素占比。

2 結(jié)果

分析附表可知，微生物檢驗誤差發(fā)生95批，發(fā)生率11.20%，影響因素主要為實驗室人員技能水平、實驗室設(shè)備性能、試驗品保存及質(zhì)量控制、環(huán)境質(zhì)控標準。人員、物品、環(huán)境、標準等為一級影響因素分別占比54.74%、22.11%、12.63%，10.53%。

3 討論

本次研究結(jié)果顯示微生物檢驗誤差發(fā)生率11.20%，影響因素主要為實驗室人員技能水平33.68%，實驗室設(shè)備性能7.37%，檢品保存及質(zhì)量控制2.11%，環(huán)境質(zhì)控標準2.11%。人員、物品、環(huán)境、標準等一級影響因素分別占比54.74%、22.11%、12.63%、10.53%，提示藥品微生物檢查中難以避免出現(xiàn)檢驗誤差，受到多種影響因素導致，如實驗室人員技能水平、設(shè)備性能、檢品保存及質(zhì)量控制及質(zhì)控標準等。尤其實驗室人員的能力、重視程度及操作標準影響較大，需強化上述管理條件。

為提高藥品微生物檢驗實驗室高質(zhì)量控制，需結(jié)合上述影響因素制定可靠的防范措施。檢驗過程由檢驗人員完成各項操作，若人員技能不足或重視程度不足，對檢驗質(zhì)量造成極大影響，因此需重視對檢驗人員的培訓及考核，確保其充分障礙藥品微生物檢驗的基礎(chǔ)知識、操作技能，明確各項操作的標準，同時強化定期考核，將考核結(jié)果與檢驗人員工資獎金、升職等掛鉤，并重視責任心教育，促使其認識到檢驗過程易受到操作時間、步驟及儀器規(guī)范使用等人為因素導致檢驗結(jié)果誤差，提高警惕心理[4]。如今微生物檢驗儀器設(shè)備越來越先進，需定期檢查和維護儀器設(shè)備，確保性能良好，且需規(guī)范儀器設(shè)備的操作方法及標準，減少操作失誤，如壓力滅菌器升溫緩慢會導致培養(yǎng)基過熱造成過度滅菌。加強培養(yǎng)基、菌種及生物安全管理，采購前應嚴格供應商資質(zhì)審核，檢驗前需重視各物品的檢驗，如培養(yǎng)基適用性檢查[5]。重視物品的環(huán)境管理，如標準菌株需在適宜的條件下保存。第一進行純度分析，嚴格控制工作菌株的傳代次數(shù)，不可超過5代，預防菌種變異。此外對環(huán)境中常見的污染菌株應采取適當措施處理后再按普通廢棄物處理，保障生物安全。藥典規(guī)范微生物檢驗環(huán)境需滿足無菌檢查/微生物限度檢查的要求，檢驗中心需將無菌檢驗環(huán)境控制在B級背景的A級層流環(huán)境下，避免環(huán)境對樣本的污染，預防菌種之間的交叉污染。注意藥品微生物檢查區(qū)域的定期清潔及消毒，定期進行表面微生物監(jiān)測，且需分析生物因子變化的趨勢性，結(jié)合警戒限度和糾偏限度強化控制。由于人流活動及相關(guān)因素，無法完全控制潔凈環(huán)境，仍可能出現(xiàn)微生物污染，因此必要時需進行復試[6]。在藥品微生物檢驗實驗室質(zhì)量控制中需明確標準及方法，確保檢驗有據(jù)可依，如《藥品標準管理辦法》，且需關(guān)注藥品注冊標準、地方藥材標準。如今我國依然依據(jù)實驗室特點進行微生物鑒別，認為藥品的生產(chǎn)、檢驗及質(zhì)量控制需制定國家標準，確定通用技術(shù)要求。如今我國藥品微生物檢驗標準及方法不斷改進，關(guān)于微生物限度及無菌檢驗的文獻資料不斷充實，但藥檢所實際執(zhí)行中仍可能出現(xiàn)問題，如一些藥品的微生物限度檢查，生產(chǎn)企業(yè)無法提供用品、檢驗檢測方法及標準。部分中藥制劑中不包含“制法”，無法依據(jù)工藝處方明確是否進行耐膽鹽革蘭陰性菌和沙門菌檢查[7]。此時需依據(jù)藥典提供的藥品微生物檢驗替代方法驗證指導原則完成。藥品中微生物易出現(xiàn)損傷或抑制，活力較差，需采用培養(yǎng)基培養(yǎng)，如需氧菌總數(shù)需培養(yǎng)3～5d，霉菌和酵母菌培養(yǎng)5～7d，培養(yǎng)過程中需避免孢子分散后重新長出菌落。微生物限度檢查多采用不同稀釋級分別計數(shù)及分析，但可能因為高稀釋級的菌落計數(shù)過高造成結(jié)果誤差，因此可采取指數(shù)形式。若發(fā)現(xiàn)藥品微生物檢驗結(jié)果誤差或超標結(jié)果，需展開回顧性調(diào)查，若發(fā)現(xiàn)人員、試劑、環(huán)境、方法等不符合規(guī)定時，需重試。

附表 微生物檢驗誤差及影響因素（%）

綜上所述，藥品微生物檢查實驗室質(zhì)量控制影響因素較多，檢驗標準及方法、檢驗物品、實驗室環(huán)境及檢驗人員等均為主要因素，需結(jié)合國家及地方相關(guān)標準，強化各影響因素的管理標準，提高藥品微生物檢查實驗室質(zhì)量。