曾麗金 莆田市城廂區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心 福建莆田 351100

該次莆田市獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對，要求在規(guī)定時間內(nèi)領(lǐng)取比對試驗盲樣、主要試劑，完成實驗室檢測過程，出具檢測報告和上報結(jié)果，現(xiàn)將城廂區(qū)獸醫(yī)實驗室參加比對測試的情況介紹如下。

1 H5 亞型禽流感病毒抗體比對檢測

1.1 試劑 禽流感病毒 H5 亞型（RE-11）血凝抑制試驗抗原 （哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)）；事先準(zhǔn)確配制的1%雞紅細(xì)胞懸液。

1.2 方法 采用血凝（HA）/血凝抑制（HI）方法（SN/T1182.2-2004）， 按照 《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T 18936-2003）進行。 結(jié)果判定：被檢血清 HI效價≤3 log2 判為陰性；=4 log2 判為可疑 （可疑樣品應(yīng)重檢，重檢效價≥4 log2，判為陽性，≤3 log2 判為陰性）；≥5 log2 判為陽性。

1.3 結(jié)果與分析 有2 份樣品（編號5～6）禽流感病毒抗體檢測結(jié)果為陰性，4 份樣品（編號1～4）為陽性。 見表 1。

表1 H5 亞型（Re-11）禽流感病毒抗體檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計

2 小反芻獸疫抗體比對檢測

2.1 試劑 小反芻獸疫競爭ELISA 抗體檢測試劑盒 （中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)），2～8 ℃下保存、備用。

2.2 方法 試劑盒使用前， 各試劑應(yīng)平衡至室溫，將試劑盒配備的25 倍PBST 濃縮液用無離子水或蒸鎦水作 1:25 稀釋，配制成洗滌液（1×PBST）。 然后按照小反芻獸疫競爭ELISA 抗體檢測試劑盒使用說明書進行檢測。

2.3 結(jié)果與分析 測得相關(guān)樣品OD450nm平均值為：陰性血清 1.292、 陽性血清 0.1375、 空白對照孔0.082、單抗對照孔 1.376；陰性對照血清 PI＜40%，陽性對照血清PI＞60%。 只有試驗編號為20 號樣品的小反芻獸疫抗體檢測結(jié)果為陰性， 其余3 份都是陽性（見表 2）。

表2 小反芻獸疫抗體檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計

3 比對結(jié)果出現(xiàn)差異的原因及分析

通過本次獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對， 發(fā)現(xiàn)實驗室質(zhì)量管理方面存在問題與不足。

一是儀器設(shè)備陳舊。 縣級獸醫(yī)實驗室只做血清學(xué)檢測，檢測時間集中在春秋兩季，其他時間很少開展檢測工作， 儀器設(shè)備閑置率較高， 不經(jīng)常維護保養(yǎng)，多道移液器出現(xiàn)明顯的量差，儀器設(shè)備或多或少對檢測結(jié)果產(chǎn)生一定的偏差。

二是培訓(xùn)不足。 縣級獸醫(yī)實驗室專業(yè)技術(shù)人員參加專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)的機會很少， 幾乎都是邊看檢測說明書邊操作，出現(xiàn)問題再回頭查找原因，可以說是“摸著石頭過河”成長起來的，這樣的專業(yè)技術(shù)人員更專注檢測前的準(zhǔn)備工作。