何叢叢，蔣蓓蕾

（江蘇省淮安生物工程高等職業(yè)學校，江蘇 淮安 223200）

1 病原

研究表明，水霉菌具有一定的真菌特征，但卻是非真菌的類真菌生物[1-5]，屬于茸鞭生物界(Stramenopila)中的卵菌門(Oomveota)［6］。 其病原菌主要有 S.ferax，S.monoica，S.diclina，S.parasitica等。

水霉菌可在5～26℃的條件下生長，其中鮭水霉的適宜生長溫度為10～30℃，最適生長溫度為25℃［7］。

2 鑒定

水霉菌的鑒定技術(shù)主要包括傳統(tǒng)分類學和現(xiàn)代分子生物學技術(shù)。

2.1 傳統(tǒng)分類學

傳統(tǒng)分類學對水霉菌的鑒定是基于第一代游動孢子的釋放模式，對有性器官形態(tài)學上的描述是鑒定的主要依據(jù)，如無性生殖釋放自由的游動孢子，有性生殖世代產(chǎn)生藏卵器，卵孢子萌發(fā)生孢子囊等[8]。不同種的水霉菌在不同條件下發(fā)育不穩(wěn)定，故而很難進行鑒定。

2.2 現(xiàn)代分子生物學技術(shù)

現(xiàn)代分子生物學技術(shù)主要包括核糖體rDNA內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(Internal Transcribed Spacer,ITS)[9]和擴增多態(tài)性DNA(random amplification of polymorphic DNA,RAPD等)[10,11]。

2.3 核糖體rDNA 內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(Internal Transcribed Spacer,ITS)

核糖體DNA中的18S、5.8S和28S的基因組序列稱為ITS，而且18S、5.8S和28S的基因組序列存在著廣泛的異種同源性，種內(nèi)相對一致,種間差異比較明顯。ITS序列片段不僅具有保守性，還易于分析。利用ITS序列對屬間、種間以及菌株間的堿基對差異進行分析，這一方法已被廣泛應(yīng)用。如P.Y．Bastide等對收集到的400多個不同領(lǐng)域的菌株的ITS區(qū)域的核苷酸序列進行了研究，結(jié)果表明，它們之間表現(xiàn)出一致的特定變化，并且支持基于序列數(shù)據(jù)的物種身份標識［12］。 X.L．Ke等通過形態(tài)觀察與 ITS rDNA 序列分析相結(jié)合的方法成功地將分離自銀鯽和斑馬魚的兩株致病菌株JY和BMY鑒定為多子水霉菌［13］。張楠等利用PCR技術(shù)對從上海、江蘇、江西、四川、河北、浙江、湖北等省市的7個主要淡水養(yǎng)殖區(qū)采集到的60株致病性水霉株ITS區(qū)域進行擴增、測序及序列比對分析，其對基因型的鑒定分類以及藥物研究具有重要意義［14］。

2.4 擴增多態(tài)性DNA(random amplification of polymorphic DNA,RAPD)

樣品中的DNA經(jīng)聚合酶鏈反應(yīng)擴增后，形成PCR產(chǎn)物，PCR產(chǎn)物經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化后再經(jīng)電泳分離可得出DNA片段圖譜，由此根據(jù)此圖譜的種屬或個體的特異性能夠檢查不同來源的DNA。

3 病變及癥狀

3.1 表皮

水霉菌病之所以被稱為白毛病或水棉病，主要是病原具有纖細發(fā)達的內(nèi)菌絲，在魚類表皮受損后，內(nèi)菌絲附著其上，外菌絲向外長出絲狀、棉絮狀的菌絲，因此可造成魚鱗脫落，表皮形成潰瘍。水霉菌在魚體內(nèi)分泌蛋白質(zhì)分解酶，使蛋白質(zhì)分解，同時體表的傷口附著游動的孢子，導致受損組織出現(xiàn)炎癥，逐漸壞死。孢子從中吸取營養(yǎng)，致使魚類呈現(xiàn)出躁動不安、衰弱無力的狀態(tài)[15]。

水霉菌早期感染魚類時，在損傷部位出現(xiàn)巨噬細胞和淋巴細胞，而長期感染的結(jié)果是出現(xiàn)了多核巨細胞。嚴重的混合感染會導致?lián)p傷部位上皮細胞水腫、變性、壞死，甚至脫落。

3.2 臟器

咽部、鰓部的感染造成了魚類呼吸系統(tǒng)功能衰竭，食道、肝、脾、腎等實質(zhì)性器官也會遭到感染，引起多器官功能衰竭。在顯微鏡下可以觀察到肝細胞出現(xiàn)變性，甚至壞死。

3.3 魚卵

健康的魚體不易感染水霉菌，同樣健康的魚卵亦不易感染水霉菌，只有魚卵受損或者受外界其他因素影響才較為易感。E．Thoen等研究表明，鮭魚活魚卵不能被水霉孢子感染，感染來源于死卵或未受精的卵［16］。

魚卵之間的大小差異是影響易感性的重要因素。如鯉魚和鯰魚比較小的卵在幾天內(nèi)就可以感染，而鮭魚的比較大的卵出現(xiàn)感染需要更長的時間［17］。

4 防治

預防為主，防治結(jié)合，綜合治理。

4.1 傳染源

攜帶水霉菌的魚類和魚卵是主要傳染源，而魚體和魚卵受損是感染水霉菌的主要原因。因此治療魚體的損傷部位是首要之舉。孫琪等證實，殼聚糖對魚類體表傷口有愈合作用,在魚體感染水霉菌前用25 mg/L的殼聚糖浸泡受傷草魚3 d,結(jié)果草魚人工感染水霉菌的幾率降低[18]。其次是進行抑菌處理。歐仁建等發(fā)現(xiàn)，異噻唑啉酮對菌株YC的抑菌效果最好,其次是硫酸銅和亞甲基藍，磺基水楊酸、戊二醛、苯扎溴銨、硫酸亞鐵、次氯酸鈉對菌株YC也具有一定的抑菌效果[19]。將受損的魚卵挑出，也可以有效避免水霉病的傳播。

4.2 傳播途徑

水環(huán)境的污染是造成水霉病傳播的主要原因之一，因此對水質(zhì)的治理刻不容緩。氯化鈉能有效抑制水霉菌的生長。張書俊等研究發(fā)現(xiàn)，當PDA培養(yǎng)基中NaCl質(zhì)量分數(shù)大于3%時，病菌生長被完全抑制[20]。芽孢桿菌已得到大規(guī)模推廣，其中在飼料中添加益生菌最為常見。賀鳳等從海洋放線菌中篩選出的水霉拮抗菌株對水霉菌生長有很好的抑制效果[21]。

4.3 中藥治療

蔡焰值等借鑒漁民使用中草藥防治魚病的經(jīng)驗，利用花椒、苦參、蛇床子、蘆薈、山柰、地膚子和土伏苓等治療該病[22]。歐仁建等研究發(fā)現(xiàn)，黃連對菌株YC的抑菌效果最好,其次是大蒜素和土槿皮[19]。李紹戊等用復方藥（丁香、黃連、土槿皮等）有效抑制了水霉菌的生長[23]。