魏曉云，霍子?xùn)|，李 彬

（甘肅省畜牧技術(shù)推廣總站，甘肅 蘭州 730030）

1 目的意義

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一種急性、熱性、高傳染性疾病。其發(fā)病迅速，傳播速度快，傳播距離遠，且控制難度大，易復(fù)發(fā)，易感動物達70余種；也屬于人畜共患病，一旦出現(xiàn)大面積傳播和流行，不僅會影響動物的健康發(fā)育和食品安全，也會對養(yǎng)殖戶帶來慘重的經(jīng)濟損失，危及人類健康。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將口蹄疫列為烈性動物傳染病，我國規(guī)定為一類動物疫病。為了有效預(yù)防口蹄疫的發(fā)生和傳播，確保甘肅高山美利奴細毛羊的安全生產(chǎn)，必須進行全覆蓋強制免疫。為使甘肅高山美利奴細毛羊免疫抗體水平能始終保持在有效保護的狀態(tài)，而且又不影響其安全生產(chǎn)，選擇最佳的疫苗和免疫時間顯得尤為重要。選用口蹄疫O型、亞洲I型二價滅活疫苗進行免疫注射，檢測甘肅高山美利奴細毛羊體內(nèi)免疫抗體水平消長情況，為養(yǎng)殖場（戶）制定最佳免疫方案提供科學(xué)依據(jù)。

2 試驗地點

肅南縣皇城鎮(zhèn)，位于甘青兩省交界的祁連山東段冷龍嶺北麓，肅南裕固族自治縣境內(nèi)，海拔高、寒冷、枯草期長是本地區(qū)的主要氣候特點。東靠肅南縣東灘鄉(xiāng)，北連北灘鄉(xiāng)，西接山丹軍馬場，南鄰青海省門源回族自治縣。海拔范圍2 600～4 000 m，屬高原大陸性氣候，平均溫度0.6～3.8℃，年降水量360 mm，氣候寒冷多變，平均枯草期7個月以上，絕對無霜期僅有45～60 d。當?shù)匾燥曫B(yǎng)甘肅高山細毛羊和高山美利奴羊為主，也是甘肅省綿羊繁育技術(shù)推廣站所在地。

表1 口蹄疫O型、亞I二價苗免疫抗體水平跟蹤監(jiān)測

3 材料與方法

3.1 材料

試驗羊只：從甘肅省綿羊繁育技術(shù)推廣站選擇15只6～7月齡的甘肅高山美利奴細毛羊。

試驗疫苗：中牧集團生產(chǎn)的牛羊O型、亞洲1型雙價滅活疫苗。2～8℃保存，有效期內(nèi)使用。

抗體檢測儀器：全自動酶標洗板機，酶標分析儀，智能型電熱恒溫器，臺式高速離心機，U型96孔抗原抗體反應(yīng)板、96孔ELISA板等。

檢測用試劑：O型、亞洲I型口蹄疫抗體檢測液相阻斷（LB-ELISA）試劑盒購自蘭州獸醫(yī)研究所。

3.2 方法

檢測方法：LB-ELISA。正向間接血凝抗體檢測試劑盒、口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測試劑盒均購自蘭州獸醫(yī)研究所。

免疫注射：2017年10月11日對15只甘肅高山美利奴細毛羊注射口蹄疫O型、亞洲I型二價滅活疫苗。

采樣時間：分別在免疫注射后21 d、60 d、120 d、180 d對15只甘肅高山美利奴細毛羊采血、分離血清，檢測免疫抗體。

4 試驗結(jié)果

據(jù)表1監(jiān)測結(jié)果，發(fā)現(xiàn)免疫21 d后抗體水平逐漸升高，60 d達到峰值，抗體水平持續(xù)60～120 d，到180 d后開始下降，抗體可維持半年。

5 討論

口蹄疫作為A類一號傳染病，做好強制免疫和有效免疫非常重要。有報道稱，我國規(guī)?；驁霭l(fā)生口蹄疫疫情的風(fēng)險仍然較高，感染抗體陽性率平均超過9%，這意味著防治口蹄疫疫情依然是當前及今后一段時間內(nèi)的重要工作。按照《中華人民共和國畜牧法》《國家口蹄疫防治技術(shù)規(guī)范》《重大動物疫情應(yīng)急條例》《國家口蹄疫防治計劃（2016—2020年）》等要求，一旦發(fā)現(xiàn)如口蹄疫之類烈性傳染病，要撲殺并銷毀染疫和疑似染疫動物及其同群動物。甘肅高山美利奴細毛羊是2015年底經(jīng)國家畜禽遺傳資源委員會審定通過的細毛羊新品種。主要適應(yīng)于海拔約2 400～4 000 m的生態(tài)區(qū)，具有良好的生態(tài)差異化優(yōu)勢和抗逆性，綜合品質(zhì)及性能指標超過了同類型澳洲美利奴羊，實現(xiàn)了澳洲美利奴羊在我國高海拔、高山寒旱生態(tài)區(qū)的國產(chǎn)化。甘肅高山美利奴細毛羊是甘肅有史以來育成的第一個具有自主知識產(chǎn)權(quán)的國家級畜禽新品種。高山美利奴羊現(xiàn)已被農(nóng)業(yè)農(nóng)村部列為國家主導(dǎo)品種。但由于是新品種，所以數(shù)量較少，而且產(chǎn)地相對集中，如果發(fā)生口蹄疫之類傳染病，將造成不可挽回的損失，也會造成極其不良的社會影響。所以政府部門及養(yǎng)殖場（戶）一定要高度重視口蹄疫防控工作。

根據(jù)試驗結(jié)果分析，甘肅高山美利奴細毛羊在1次注射口蹄疫O型、亞洲I型二價滅活疫苗后，在6個月之內(nèi)，免疫抗體效價保持在一個相對均衡且有效的水平上，起到了免疫保護的目的?？贵w效價≥1∶128時，保護率在99%以上；抗體效價在1∶22～90范圍，群體保護率一半以上；效價≤1∶16時無保護作用。為此，建議對甘肅高山美利奴細毛羊使用口蹄疫O型、亞洲I型二價滅活疫苗，春季防疫和秋季防疫相結(jié)合，每年3月和10月各1次，全群盡免，可有效抵御當?shù)卮嬗型{的口蹄疫病毒，保障甘肅高山美利奴細毛羊種群安全。