張淑雯

（浙江新安國(guó)際醫(yī)院腫瘤科，浙江 嘉興 314000）

非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）是臨床上常見(jiàn)的一種惡性腫瘤。此病患者的5 年生存率僅為11% 左右[1]。全面了解此病的發(fā)病機(jī)制并及時(shí)對(duì)患者進(jìn)行有針對(duì)性的治療對(duì)改善其預(yù)后具有重要的意義。有研究指出，miRNA 會(huì)參與調(diào)節(jié)NSCLC發(fā)生發(fā)展中的多個(gè)過(guò)程，包括腫瘤細(xì)胞的分裂、增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移等。在本文中，筆者主要是分析NSCLC 患者癌組織中miRNA-221、minRNA-155 表達(dá)情況與其預(yù)后的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

將浙江新安國(guó)際醫(yī)院2016 年1 月至2017 年1 月接診的NSCLC 患者50 例納入本研究。其納入標(biāo)準(zhǔn)是[2]：年齡≥18 歲；知情并同意參與本研究；被確診患有NSCLC ；具有進(jìn)行手術(shù)治療的指征。其排除標(biāo)準(zhǔn)是：合并有其他的腫瘤；有精神疾病史；存在手術(shù)禁忌證。這50 例患者的年齡為45 ～86 歲，平均年齡（65.17±6.23）歲。本研究經(jīng)浙江新安國(guó)際醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

對(duì)這些患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，包括其年齡、性別、病情的分型、腫瘤的TNM 臨床分期、腫瘤的直徑及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的情況。對(duì)其進(jìn)行癌組織miRNA-221、minRNA-155檢測(cè)，方法是：在完成癌組織標(biāo)本切除后30 min 內(nèi)用無(wú)核酸酶水對(duì)其進(jìn)行沖洗，將其放入凍存管后用液氮罐冷凍2 ～3 h，然后轉(zhuǎn)入-80℃的冰箱中保存。將100 mg 的凍存癌組織標(biāo)本剪碎并加1 ml 的Trizol 裂解液，提取總RNA 并以50 μl 的DEPC 稀釋。將稀釋后的標(biāo)本置于-80℃的冰箱中凍存。將標(biāo)本中的RNA 反轉(zhuǎn)錄為cDNA，將其分別置于95℃、94℃、60℃的環(huán)境下變性10 min、10 s、60 s。完成變性處理后，用美國(guó)ABI 公司生產(chǎn)的7900 型熒光定量PCR檢測(cè)儀和德國(guó)QIagen 公司生產(chǎn)的SYBR Green PCR Kit（200）qiagen 試劑盒檢測(cè)標(biāo)本中的miRNA-221 和miRNA-155。

1.3 觀察指標(biāo)

比較這些患者中不同病理參數(shù)患者癌組織中miRNA-221、minRNA-155 的表達(dá)情況及其生存期，并分析導(dǎo)致這些患者死亡的危險(xiǎn)因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 21.0 軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 這些患者中不同病理參數(shù)患者癌組織中miRNA-221、minRNA-155 的表達(dá)情況及其生存期

與年齡＜60 歲的患者相比，這些患者中年齡≥60 歲的患者其癌組織中miRNA-155、miRNA-221 的表達(dá)水平均更高，其生存期更短，P＜0.05。與腫瘤TNM 分期為Ⅰ期或Ⅱ期的患者相比，這些患者中腫瘤TNM 分期為Ⅲ期或Ⅵ期的患者其癌組織中miRNA-155、miRNA-221 的表達(dá)水平均更高，其生存期更短，P＜0.05。與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者相比，這些患者中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者其癌組織中miRNA-155、miRNA-221 的表達(dá)水平均更高，其生存期更短，P＜0.05。詳見(jiàn)表1。

表1 不同病理參數(shù)患者癌組織中miRNA-221、minRNA-155 的表達(dá)情況及其生存期的比較（± s ）

表1 不同病理參數(shù)患者癌組織中miRNA-221、minRNA-155 的表達(dá)情況及其生存期的比較（± s ）

病理參數(shù) 例數(shù) miRNA-155 t 值 P 值 minRNA-221 t 值 P 值 生存期（月） t 值 P 值年齡 ＜60 歲 19 5.182±0.723 4.98 0.0035 4.08±0.32 3.18 0.0221 34.98±3.20 3.98 0.0078≥60 歲 31 6.001±0.318 4.43±0.42 32.43±2.19病情的分型 肺腺癌 34 5.308±0.573 0.42 0.6792 4.30±0.61 0.04 0.9603 31.32±3.19 0.98 0.1287肺鱗癌 16 5.414±0.452 4.31±0.76 33.98±2.98 4.03±0.34 30 4.914±0.572 36.32±2.19腫瘤的TNM 分期Ⅰ期或Ⅱ期6.98 0.0000Ⅲ期或Ⅵ7.87 0.0000 3.63 0.0137 20 6.631±0.709 4.58±0.34 28.12±3.45淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 有 15 6.191±0.692 4.41 0.0094 4.61±0.51 3.71 0.0169 29.13±4.19 6.34 0.0000無(wú)35 5.281±0.571 4.02±0.39 36.01±3.19期

2.2 對(duì)這些患者的臨床資料進(jìn)行多因素logistic 回歸分析的結(jié)果

進(jìn)行多因素logistic 回歸分析的結(jié)果顯示，癌組織中miRNA-155、miRNA-221 的表達(dá)水平較高、腫瘤的TNM 分期為Ⅲ期或Ⅵ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致這些患者死亡的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，P＜0.05。詳見(jiàn)表2。

表2 對(duì)這些患者的臨床資料進(jìn)行多因素logistic 回歸分析的結(jié)果

3 討論

miRNA 是一類小型的非編碼RNA，具有調(diào)控細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和靶基因表達(dá)的作用，對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、浸潤(rùn)、凋亡等生物學(xué)行為均具有一定的影響[2]。miRNA-155、miRNA-221 是miRNA 家族的重要成員。本研究發(fā)現(xiàn)，年齡≥60 歲、腫瘤TNM 分期為Ⅲ期或Ⅵ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的NSCLC 患者其癌組織中miRNA-155、miRNA-221 的表達(dá)水平均較高。癌組織中miRNA-155、miRNA-221 的表達(dá)水平較高是導(dǎo)致NSCLC 患者死亡的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。這說(shuō)明，NSCLC 患者癌組織中miRNA-221、miRNA-155 的表達(dá)水平與其病情的嚴(yán)重程度及預(yù)后密切相關(guān)。有研究指出，miRNA-221、miRNA-155 具有類似致癌基因的作用，其過(guò)表達(dá)對(duì)一些腫瘤抑制基因（包括Ddit4、PTEN、FOX03、P57、P27 等）具有抑制作用，從而可加快腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲[3-5]。

綜 上 所 述，NSCLC 患 者 癌 組 織 中miRNA-221、miRNA-155 的表達(dá)水平與其病情的嚴(yán)重程度及預(yù)后密切相關(guān)。臨床醫(yī)生應(yīng)對(duì)上述情況予以關(guān)注。