陳圓，楊云樂，馮麗，李萌(南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院輸血科，南京210008)

正常情況下，ABO血型IgM抗體在出生前尚未產(chǎn)生，在出生后幾個月內(nèi)逐漸形成。因此，嬰幼兒血型鑒定中易出現(xiàn)反定型不凝集或凝集很弱等現(xiàn)象,給臨床血型鑒定及輸血工作帶來一定困擾[1-2]。了解ABO血型IgM抗體發(fā)育情況及趨勢，有利于幫助臨床正確鑒定血型，確保用血安全。

1 對象與方法

1.1研究對象 2019年9月至2020年3月共收集本院18月齡內(nèi)除早產(chǎn)兒及免疫病患兒1 250例，其中A型454例，B型410例，O型386例，AB型除外。按年齡分為5組，分別為≤30天組，2～3月組，4～6月組，7～12月組，13～18月組。

1.2試劑來源 微柱凝膠血型鑒定卡、抗人球蛋白檢測卡、低離子液(美國伯樂公司)；血型鑒定及不規(guī)則抗體篩查質(zhì)控品(北京金豪制藥公司)；單克隆抗A、抗B標準血清，標準 A 型、B 型和 O 型紅細胞懸液(上海血液生物技術(shù)公司)。

1.3實驗方法

1.3.1ABO血型鑒定及不規(guī)則抗體篩查 嚴格按照質(zhì)控品說明書進行室內(nèi)質(zhì)控，采用微柱凝膠法鑒定ABO血型并記錄反應(yīng)格局，所有采集標本不規(guī)則抗體篩查結(jié)果均要求為陰性。

1.3.2效價測定 采用鹽水試管法測定每份標本血漿中IgM抗體效價，并記錄各稀釋管的凝集反應(yīng)強度；O型分別測定IgM 抗A、抗B。

1.3.3凝集度積分 對每份標本效價測定中的凝集強度進行評分并計算總和，定為該標本的凝集度積分。評分標準為：凝集強度4+記12分；3+記10分；2+記8分；+記5分；±記3分；-記0分。

2 結(jié)果

2.1ABO血型IgM抗體效價結(jié)果 見表1、2。30日齡內(nèi)嬰幼兒抗A、抗B抗體效價為0分別占33.88%、47.46%，提示該階段嬰幼兒抗體未發(fā)育或剛開始發(fā)育；2～6月齡嬰幼兒抗A、抗B抗體效價為0的占比逐漸降低，提示該階段嬰幼兒IgM抗體迅速發(fā)育。7～12月齡組，抗A抗體效價均≥2，提示IgM抗A基本發(fā)育完成，抗B發(fā)育稍慢，但接近95%的嬰幼兒已達到≥2。13月齡后，嬰幼兒的抗A、抗B效價均≥2，95%以上抗A、70%以上抗B效價可達到≥16，提示IgM抗體發(fā)育已基本完成。

表1 ≤18月齡嬰幼兒檢出不同效價IgM抗A的百分比[n(%)]

表2 ≤18月齡嬰幼兒檢出不同效價IgM抗B的百分比[n(%)]

2.2ABO血型IgM抗體凝集度積分 見圖1、2。隨嬰幼兒月齡增長，高凝集度積分標本占比逐漸增高，同月齡段抗B的凝集度積分略低于抗A，凝集度積分更適合同效價抗體凝集能力的比較。

圖1 IgM抗A不同凝集強度積分段的百分比

圖2 IgM抗B不同凝集強度積分段的百分比

3 討論

血型抗體發(fā)育受自身因素和外界因素等多方面影響，臨床工作中發(fā)現(xiàn)周歲嬰幼兒IgM抗體仍存在較弱的情況，故本研究選擇18個月內(nèi)嬰幼兒作為研究對象，旨在了解南京地區(qū)嬰幼兒血型IgM抗體發(fā)育情況，了解抗體發(fā)育趨勢。研究表明，腸道菌群[3]及營養(yǎng)給予方式[4]均能影響IgM 抗體發(fā)育水平，且對抗B發(fā)育影響更為明顯。本研究中30日齡內(nèi)的抗 A、抗 B效價≥1的標本占比分別為66.12%和52.54%，與徐秀云等[5]報道的抗體檢出率數(shù)據(jù)接近。本研究結(jié)果與北京地區(qū)[6]較為相似，表明經(jīng)濟、飲食和環(huán)境等因素可能在ABO血型抗體發(fā)育中存在重要影響，或可促進抗體發(fā)育。

以往的研究一般只做抗體檢出率分析，本研究測定了每份標本的效價，并采用凝集度積分的方法進行分析。實驗過程中發(fā)現(xiàn)在相同效價下，各倍比稀釋管的凝集強度也不盡相同，特別是微柱凝膠法反定型呈雙群的標本，更容易出現(xiàn)同效價下凝集度積分較低的情況，表明抗體的凝集能力存在差異，因此采用凝集度積分的方法能更加全面體現(xiàn)ABO血型系統(tǒng)抗體發(fā)育情況。

嬰幼兒血型IgG抗體可能存在母體影響，無法真實反映嬰幼兒自身抗體發(fā)育，所以本研究觀察的是血型IgM抗體。本研究還關(guān)注到新生兒ABO血型抗原存在弱表達現(xiàn)象，糖基轉(zhuǎn)移酶的活性減弱或基因缺失可導(dǎo)致抗原表達異常，新生兒血型抗原與抗體發(fā)育過程是否也與糖基轉(zhuǎn)移酶的活性有關(guān)，我們將做進一步研究。