姜連生，吳萍，張森森，樊笑霞，李暢，周琳(海軍軍醫(yī)大學附屬長征醫(yī)院實驗診斷科,上海 200003)

外周血中漿細胞極少見，當患有某些漿細胞病，如華氏巨球蛋白血癥、多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)、漿細胞白血病(plasma cell leukemia，PCL)等，外周血中漿細胞可見增多，某些感染性疾病偶見增多。在患者初診時，及時發(fā)現(xiàn)外周血中存在漿細胞對患者確診及后續(xù)治療具有重要意義。

某些血細胞分析儀除能提供常規(guī)的白細胞分類結果外，針對淋巴細胞還能提供側向散射光強度(LY-X)、側向熒光強度(LY-Y)、前向散射光強度(LY-Z)、側向散射光分布寬度(LY-WX)、側向熒光分布寬度(LY-WY)、前向散射光分布寬度(LY-WZ)等參數(shù)[1]。本研究試圖通過分析上述參數(shù)，總結含漿細胞的外周血淋巴細胞參數(shù)特征，為日常工作中及時發(fā)現(xiàn)血液中的漿細胞提供幫助。

1 對象和方法

1.1研究對象 2019年5月至2020年4月上海長征醫(yī)院外周血標本鏡檢發(fā)現(xiàn)漿細胞的患者作為漿細胞組，共28例，其中男11例，女17例。選擇同期外周血標本鏡檢發(fā)現(xiàn)異常淋巴細胞(淋巴瘤15例，白血病11例，失訪2例)的患者作為異常淋巴細胞組，共27例，其中男14例，女13例；鏡檢發(fā)現(xiàn)異型淋巴細胞的患者作為異型淋巴細胞組，共87例，其中男43例，女44例；體檢結果正常者作為健康人對照組，共140例，其中男62例，女78例。

1.2主要儀器與試劑 XN-9000全自動血液分析儀及其配套試劑、定標品、質(zhì)控品，SP-10推片儀(日本Sysmex公司)。所有儀器定期校準，室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)均在控。

1.3標本采集與檢測 采集研究對象靜脈血2 mL，EDTA-K2抗凝，4 h內(nèi)完成檢測。根據(jù)《ICSH 外周血細胞形態(tài)特征的命名和分級標準化建議》[2]對異常標本鏡檢，鏡檢過程由2位有2年以上鏡檢經(jīng)驗的檢驗醫(yī)生共同完成。

1.4統(tǒng)計學分析 用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，用GraphPad Prism8繪圖。用K-S檢驗分析正態(tài)性。6個淋巴細胞參數(shù)經(jīng) K-S檢驗均為偏態(tài)分布，以M(P25,P75)表示，多樣本間差異比較用Kruskal WallisH檢驗，各組間兩兩比較采用Nemenyi檢驗。對組間比較差異有統(tǒng)計學意義的淋巴細胞參數(shù)，用ROC曲線評價其在識別漿細胞中的效能，并計算曲線下面積(area under curve，AUCROC)、可疑值范圍、敏感性及特異性。淋巴細胞參數(shù)與鏡檢漿細胞比例的相關性用Pearson相關分析。以P<0.05表示有統(tǒng)計學意義。

2 結果

表1 淋巴細胞參數(shù)精密度分析結果

2.2淋巴細胞參數(shù)結果 漿細胞組與其他各組淋巴細胞參數(shù)結果見表2。漿細胞組6項淋巴細胞參數(shù)均大于健康人對照組；漿細胞組與異型淋巴細胞組、異常淋巴細胞組比較，僅LY-WZ差異有統(tǒng)計學意義。

表2 淋巴細胞參數(shù)在4組樣本中的表達情況

2.3淋巴細胞參數(shù)識別漿細胞的效能 見表3。ROC 曲線顯示，以健康人對照組為對照，LY-X、LY-WY和LY-WZ在識別漿細胞中具有重要價值。以異型淋巴細胞、異常淋巴細胞為對照，LY-WZ識別漿細胞的效能中等。

表3 淋巴細胞參數(shù)在識別漿細胞中的效能

2.4淋巴細胞參數(shù)與漿細胞百分比的相關性分析 通過Pearson相關分析，淋巴細胞參數(shù)LY-Z與外周血漿細胞百分比具有相關性，Person相關系數(shù)為0.591(n=28，P<0.01)，見圖1。其他淋巴細胞參數(shù)與漿細胞百分比無相關性。

圖1 LY-Z與漿細胞百分比的相關性分析結果

3 討論

隨著檢測方法的更新，越來越多的新技術開始應用于血細胞的分析，可提供更多的參數(shù)來敏感、準確地反映血細胞形態(tài)、大小及核酸含量[3]。Sysmex-9000血細胞分析儀淋巴細胞參數(shù)LY-X、LY-Y、LY-Z分別反映淋巴細胞內(nèi)容物復雜程度、核酸含量和細胞體積大小[4]。LY-WX、LY-WY和LY-WZ反映上述3個指標的不均一性[5]。各種因素引起淋巴細胞大小、核酸含量和內(nèi)部結構改變，這些參數(shù)也會發(fā)生相應變化[6]。

本研究發(fā)現(xiàn)，漿細胞組LY-X、LY-Y和LY-Z高于健康人對照組，而徐衛(wèi)益等[7]研究發(fā)現(xiàn)MM患者LY-X高于健康人對照組。本研究還發(fā)現(xiàn)，漿細胞組LY-WX、LY-WY和LY-WZ增高，說明漿細胞內(nèi)部結構復雜程度、核酸含量、細胞體積差異程度均高于正常淋巴細胞。LY-X和LY-WZ對從健康者標本中篩查出漿細胞價值最高，其特異性分別可達78.6%、92.9%，而敏感性分別為92.9%、91.4%。與病例對照組相比，僅LY-WZ可用于漿細胞與異型淋巴細胞、異常淋巴細胞的區(qū)分，LY-WZ用于漿細胞與異型淋巴細胞的AUCROC為0.712，當cut-off值取580時，敏感性可達92.9%，但特異性較低，僅有44.8%。LY-WZ區(qū)分漿細胞與異常淋巴細胞AUCROC為0.785，當cut-off值取582.5時，其敏感性為89.3%，特異性為66.7%，這提示存在漿細胞的血液淋巴細胞大小差異較其他淋巴系統(tǒng)良性或惡性疾病更大。本研究發(fā)現(xiàn)淋巴細胞參數(shù)LY-Z與患者外周血漿細胞百分比呈正相關，相關系數(shù)0.591。淋巴細胞參數(shù)與外周血漿細胞百分比的相關性尚未見相關文獻報道。

本研究雖發(fā)現(xiàn)淋巴細胞參數(shù)在識別外周血漿細胞中有一定價值，但由于存在研究樣本量較小等缺點，尚不能直接應用于臨床。另外，淋巴細胞參數(shù)產(chǎn)生明顯差異時，尚需鏡檢排除其他異常細胞的存在，并明確外周血中漿細胞的確切比例。