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重慶市人口和計劃生育科學(xué)技術(shù)研究院附屬醫(yī)院，重慶市出生缺陷與生殖健康重點實驗室（重慶 400020）

近年來，男性不育癥發(fā)病率迅速增長,約15%的育齡夫婦存在生育困難，由男方因素引起的生育問題占不育夫婦的近50%[1]。環(huán)境污染、輻射、重金屬、生活方式、工作壓力及泌尿生殖道疾病等都是造成男性不育的重要因素[2]。沙眼衣原體(chlamydia trachomtis,CT)、解脲脲原體 （ureaplasma urealyticum,UU）、淋病奈瑟菌（neisseria gonorrhoe-as,NG）和生殖支原體（mycoplasma genitaium,MG）是導(dǎo)致泌尿生殖道感染性疾病最常見的4種病原體，傳播方式主要通過性接觸被感染。男性感染可致男性尿道炎、睪丸炎、附睪炎、前列腺炎，引起精子質(zhì)量下降，導(dǎo)致男性不育；女性感染后導(dǎo)致盆腔炎、子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎等，造成妊娠困難、早期流產(chǎn)、異位妊娠等不孕結(jié)局[3]。有研究報道男性不育患者的精液標(biāo)本中解脲脲原體UU是主要病原體之一，感染率高達(dá)20%～50%[4]。為了解重慶市男性泌尿生殖道病原體的感染情況及其和男性不育的關(guān)系，特對重慶市人口計生研究院附屬醫(yī)院生殖中心2019年1月-12月年門診不育男性和健康體檢男性進(jìn)行CT、UU、MG、NG檢測和分析，旨在為臨床不育男性診斷和治療提供數(shù)據(jù)參考。

材料與方法

一、研究對象

選取2019年1月～12月來本院生殖中心就診不育男性患者和健康體檢男性共672例為研究對象。按照就診類別分為不育組和健康組。不育組396例，年齡20～49 歲（32.77±2.74）；健康組 276 例，年齡 20～49 歲（30.62±3.68）,年齡差異不顯著（P>0.05）。 本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過且經(jīng)受檢者知情同意。

二、標(biāo)本采集

采用精液標(biāo)本進(jìn)行四種病原體檢測。受檢男性禁欲2～7天后，通過手淫法采集全部精液標(biāo)本于一次性無菌專用杯中，精液液化后，取50ul精液標(biāo)本加入標(biāo)本保存液中，冰箱內(nèi)存儲，于3天內(nèi)檢測病原體。

三、試劑和儀器

CT、UU、NG、MG四種檢測試劑盒購買于上海仁度生物科技有限公司，采用美國ABI-7500型PCR儀檢測。檢測方法：采用病原體RNA檢測技術(shù)SAT法進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增條件為42℃1min，40個循環(huán)；熒光通道為FAM；每批檢測設(shè)立陰、陽性對照及質(zhì)控；根據(jù)擴(kuò)增曲線和循環(huán)數(shù)判讀結(jié)果，dt≤35為陽性。

四、統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS17.0和Excel 2007軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、重慶市男性泌尿生殖道四種病原體CT、UU、NG和MG感染情況分析

CT、UU、NG和MG病原體在研究組內(nèi)均有陽性檢出率，UU陽性檢出率最高，總占比為29.3%；CT、NG、MG陽性檢出率較低，分別是2.5%、1.5%、1.6%,UU陽性檢出率與其他三種病原體陽性檢出率差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。按照就診類型將參與研究的男性分為不育組和健康體檢組，分析兩組男性CT、UU、NG和MG病原體感染情況。不育組中CT、UU、NG和MG陽性檢出率分別是：2.5%、37.1%、1.8%和2.0%；健康組中 CT、UU、NG和 MG陽性檢出率分別是：2.4%、16.9%、1.0%和2.1%；不育組和健康組中均是UU感染率高于其他三種病原體，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。不育組男性UU陽性檢出率為37.1%，高于健康男性UU陽性檢出率16.9%，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。不育組和健康體檢組CT、NG、MG陽性檢出率都較低，差異不顯著（P>0.05）。詳情見表1。

二、重慶市男性泌尿生殖道四種病原體CT、UU、NG和MG感染類型分布

CT、UU、NG和MG4種病原體在不育男性和健康體檢男性中總檢出率分別為42.17%、21.7%。167例不育男性陽性病例中共檢出7種不同感染類型，以單獨UU感染率最高，陽性率為35.9%，構(gòu)成比占85%，與其他感染類型感染率差異極顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；單獨 CT、NG、MG 感染率相近，還有少量的混合感染，表現(xiàn)為CT+UU、UU+NG、CT+UU+NG類型。健康體檢組男性四種病原體感染類型有6種，單獨UU感染率最高，陽性率為17%，與不育組相比差異顯著（P<0.05）；構(gòu)成比占78.3%，與不育組差異不顯著（P>0.05）。 單 獨 CT、NG、MG 感 染 率 和 兩 種 混 合 感 染CT+UU和UU+NG類型感染率相近，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），健康組未見三種及以上病原體混合感染，兩組男性中未見四種以上的病原體混合感染類型。詳情見表2。

表2 重慶市男性泌尿生殖道病原體感染類型陽性率及構(gòu)成比

三、重慶市男性泌尿生殖道四種病原體CT、UU、NG和MG感染年齡分布。

按照年齡將健康體檢男性和不育男性分成20～29歲、30～39歲和40～49歲等三組。三個年齡階段分組中，健康體檢組和不育組男性UU感染率都高于CT、NG和MG感染率，差異顯著具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。健康組UU感染率最高在20～29歲年齡組，感染率為18.3%，同年齡階段的不育組感染率為36.1%；兩組差異顯著（P<0.05）。不育組UU感染率最高是30～39歲年齡組，為38.5%，同年齡階段的健康體檢組UU感染率為15.2%，兩組差異顯著（P<0.05）。 40～49歲年齡組中，不育組UU感染率31.0%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于健康和體檢組感染率。三個年齡階段的不育男性UU感染率都高，各組差異不顯著（P>0.05）。

表3 重慶市男性不同年齡階段泌尿生殖道病原體感染情況表[n(%)]

討 論

泌尿生殖道感染是通過性接觸而感染一種重要的性傳播疾病，沙眼衣原體（chlamy diatra-chomtis,CT）、解脲脲原體 （ureaplasma urealyticum,UU）、淋病奈瑟菌（neisseria gonorrhoe-as,NG）和生殖支原體（mycoplasma genitaium,MG）是導(dǎo)致泌尿生殖道感染的最常見的4種病原體。男性感染可導(dǎo)致男性尿道炎、睪丸炎、附睪炎、前列腺炎，引起精子質(zhì)量下降甚至導(dǎo)致男性不育；女性感染后導(dǎo)致宮頸炎、盆腔炎、子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎等，造成妊娠困難、早期流產(chǎn)、異位妊娠等不孕結(jié)局[3]。本研究針對來本院就診的不育男性和健康體檢男性泌尿生殖道病原體檢測，發(fā)現(xiàn)重慶市各個年齡階段的男性泌尿生殖道4種病原體CT、UU、NG和MG均有陽性檢出率，UU陽性檢出率高于CT、NG和MG陽性檢出率，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義P<0.05。檢出四種病原體感染類型共有7種，但以單獨UU感染率最高。結(jié)果證明重慶市男性存在CT、UU、NG和MG四種病原體感染，則以UU感染為主。

據(jù)報道解脲脲原體（UU）是一種介于細(xì)菌與病毒之間的體積微小能夠獨立生活的最小原核微生物，主要寄生在人體泌尿生殖系統(tǒng)黏膜表面或上皮細(xì)胞內(nèi)[5]。UU感染可引起前列腺炎，使患者前列腺分泌液化因子的功能減退，從而導(dǎo)致精液黏稠度增加，使精液液化不良[6]；UU寄生在男性睪丸曲細(xì)精管等部位，會引起曲細(xì)精管發(fā)生病變，使睪丸生精功能的下降；另一方面，UU吸附在精子表面，可與精子細(xì)胞發(fā)生質(zhì)膜融合，從而將胞漿內(nèi)有毒性的蛋白質(zhì)及類脂直接融入精子細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致部分精子死亡，數(shù)量減少，使男性精子質(zhì)量下降，生育力降低，從而導(dǎo)致男性不育[7]。我們研究中發(fā)現(xiàn)，不育男性UU陽性檢出率37.1%，高于健康男性UU陽性檢出率16.9%，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；不育男性單獨UU感染陽性率為35.9%，構(gòu)成比占85%；不同年齡階段的不育男性UU感染率高于同等年齡階段的健康體檢男性感染率，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。這和張振成和Qing L等發(fā)現(xiàn)不育男性群體中UU的感染率明顯高于生育男性[6，8]研究結(jié)論一致：UU感染可能是導(dǎo)致男性不育的因數(shù)之一。

雖然本研究還未對男性UU感染對精子質(zhì)量的影響進(jìn)行探究，但從不育男性UU感染率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于健康男性可推斷出UU感染對男性生育產(chǎn)生重要影響。在臨床不育門診里，對不育人群生殖道泌尿病原菌篩查，特別是對解脲脲原體UU的篩查尤顯重要。目前，國家二胎政策及免費孕優(yōu)篩查項目等優(yōu)生優(yōu)育政策，使較多育齡夫婦有再生育要求。在孕前及不孕癥的篩查項目中納入CT、UU、NG和MG篩查，將對優(yōu)生優(yōu)育具有重要意義。本研究下一步將探究UU感染對男性精子質(zhì)量的影響，進(jìn)一步闡明UU篩查在不育不孕治療中的重要意義。