金亞玲　王祥珍

【摘要】 目的 探討自然早產(chǎn)與足月分娩中胎盤Survivin表達量與妊娠時間的相關(guān)性。方法 60例分娩產(chǎn)婦， 按照是否足月分娩分為早產(chǎn)組與足月產(chǎn)組， 每組30例。在產(chǎn)婦分娩后提取胎盤組織， 使用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(yīng)（RT-PCR）定量檢測胎盤Survivin mRNA相對表達量， 比較兩組胎盤組織中Survivin mRNA相對表達量， 分析Survivin mRNA相對表達量與妊娠時間的相關(guān)性。結(jié)果 早產(chǎn)組產(chǎn)婦胎盤組織中Survivin mRNA相對表達量（0.78±0.27）明顯低于足月產(chǎn)組的（1.41±0.23）， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。經(jīng)過相關(guān)性分析結(jié)果提示， 早產(chǎn)組產(chǎn)婦平均 Survivin mRNA相對表達量與妊娠時間呈線性正相關(guān)（r2=0.680， F=6.025， P<0.05）， 足月產(chǎn)組平均Survivin mRNA相對表達量與妊娠時間無線性相關(guān)性（r2=0.337， F=0.385， P>0.05）。結(jié)論 胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡與早產(chǎn)有關(guān)， 而Survivin因子表達不足會使胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡， Survivin表達量降低與早產(chǎn)的時間密切相關(guān)， 足月后Survivin表達量與妊娠時間無相關(guān)性。

【關(guān)鍵詞】 早產(chǎn);足月分娩;Survivin表達;相關(guān)性;胎盤組織

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.28.016

Study on the correlation between placental Survivin expression and gestational time between Spontaneous preterm delivery and full-term delivery? ?JIN Ya-ling， WANG Xiang-zhen. Obstetrics and Gynecology Department， Shenzhen Nanshan District Maternity and Child Health Hospital， Shenzhen 518067， China

【Abstract】 Objective? ?To discuss the correlation between placental Survivin expression and gestational time between spontaneous preterm delivery and full-term delivery. Methods? A total of 60 cases of delivery women were divided into preterm delivery group and full-term delivery group according to whether they delivered at full term， with 30 cases in each group. The placental tissue was extracted after the parturients gave birth， and the relative expression of Survivin mRNA in the placenta was quantitatively detected by reverse transcription-polymerase chain reaction （RT-PCR）， and the relative expression of Survivin mRNA in the placental tissues of the two groups was compared. The correlation between Survivin mRNA relative expression and gestational time was analyzed. Results? ?The expression of Survivin mRNA in the placenta （0.78±0.27） of preterm delivery group was obviously lower than （1.41±0.23） of full-term delivery group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The results of correlation analysis showed that the mean relative expression of Survivin mRNA

was positively correlated with gestational time in preterm delivery group （r2=0.680， F=6.025， P<0.05）， but there was no linear correlation between gestational time and mean survivin mRNA expression in term delivery group （r2=0.337， F=0.385， P>0.05）. Conclusion? The apoptosis of placental trophoblast is related to premature delivery， and insufficient expression of Survivin factor can cause placental trophoblast cell apoptosis. The decrease of Survivin expression is closely related to the time of preterm delivery， and there is no correlation between Survivin expression after full-term and pregnancy time.

【Key words】 Preterm labor; Full-term labor; Survivin expression; Correlation; Placental tissue

早產(chǎn)是產(chǎn)科面臨的棘手問題， 且全球發(fā)病率逐年增加， 給提高孕產(chǎn)婦安全帶來了極大的挑戰(zhàn)。導致早產(chǎn)的因素眾多， 主要包括胎盤因素和胎盤外因素。胎盤因素包括胎膜早破、雙胎及多胎、前置胎盤、胎盤早剝等， 胎盤外因素包括妊娠期高血壓綜合征、妊娠合并癥、妊娠期糖尿病或糖耐量異常[1]， 甚至孕婦微生態(tài)菌落均可影響分娩結(jié)局。目前， 主要研究更多關(guān)注在胎盤病變， 其中胎盤滋養(yǎng)細胞的異常發(fā)育是導致早產(chǎn)的重要原因。研究表明， 胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡與早產(chǎn)有關(guān)， 其中胎盤滋養(yǎng)細胞Survivin因子表達不足所致的細胞過度凋亡可能是其引起胎盤功能低下的原因， 最終導致早產(chǎn)發(fā)生的重要機制[2]。盡管抗凋亡因子Survivin與早產(chǎn)關(guān)系密切， 但是否與早產(chǎn)分娩的時間有相關(guān)性尚未見相關(guān)報道。為此， 本研究選擇本院的孕產(chǎn)婦為研究對象， 進一步分析Survivin表達量與妊娠時間的相關(guān)性， 現(xiàn)在報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2018年5月～2019年5月收治的60例分娩產(chǎn)婦， 年齡22～35歲， 妊娠時間28～42周， 本研究經(jīng)本院醫(yī)學倫理委員會審批。按照是否足月分娩分為早產(chǎn)組與足月產(chǎn)組， 每組30例。早產(chǎn)組產(chǎn)婦平均年齡（28.4±3.8）歲， 平均妊娠時間（32.7±3.2）周;足月產(chǎn)組產(chǎn)婦平均年齡（29.2±4.5）歲， 平均妊娠時間（39.2±2.2）周。兩組年齡比較， 差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

納入標準：①產(chǎn)婦均經(jīng)過嚴格產(chǎn)檢， 不具有妊娠高血壓綜合征;②無糖尿病、肝炎、甲狀腺功能亢進（甲亢）、心臟病、肺結(jié)核、陰道炎等合并癥;③無子宮占位性病變及子宮肌層、宮頸等異常發(fā)育;④精神無異常;⑤全部患者均自愿參與研究并簽署知情同意書。

排除標準：①產(chǎn)婦產(chǎn)檢過程有異常指標， 如胎兒窘迫、凝血異常等高風險并發(fā)癥;②拒絕捐獻胎盤進行醫(yī)學研究;③有遺傳學異常或家族性疾病史。

1. 2 方法 收集產(chǎn)婦妊娠時間。在產(chǎn)婦自然分娩出（或剖宮產(chǎn)娩出）胎盤后， 迅速在無菌條件下轉(zhuǎn)移胎盤至冰塊上， 提取胎盤母體面中央垂直位置至胎兒面， 約1 cm3 大小的組織， 放入-80℃液氮罐中速凍。取出標本冰上超聲勻漿機研磨， 參照TRizol法提取總RNA， 用ddH2O稀釋1 μl樣品200倍后測定RNA濃度與純度。引物由Primer軟件設(shè)計、Takara公司合成， 參照反轉(zhuǎn)錄試劑盒自帶實驗流程建議說明， 選擇42℃反轉(zhuǎn)錄50 min， 95℃ 5 min滅活反轉(zhuǎn)錄酶。使用ABI 7300 Real-Time PCR System進行Syber Green 熒光定量RT-PCR檢測， 其反應(yīng)體系為 SYBR Premix Ex Taq II（2X）12.5 μl、上下游引物各1 μl、cDNA 2 μl和dH2O 8.5 μl， 擴增條件為95℃預(yù)變性30 s;95℃變性5 s， 60℃退火30 s， 共40個循環(huán)。分析Survivin mRNA/ GADPH mRNA， 采用2-ΔΔCt法進行計算。本研究中的Survivin mRNA引物序列F-5′-GCAGGGGACAGGTGGGAAGT3′， R-5′GACTCCTGCCACTGGTTCATAC3′。GADPH mRNA引物序列F-5′CGGAGTCAACGGATTTGGTCGTAT 3′， R-5′AGCCTTCTCCATGGTGGTGAAGAC 3′。

1. 3 觀察指標 比較兩組胎盤組織中Survivin mRNA 相對表達量[Survivin mRNA（/GADPH）]， 分析Survivin mRNA相對表達量與妊娠時間的相關(guān)性。

1. 4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS23.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗;相關(guān)性檢驗采用應(yīng)用Spearman等級相關(guān)分析法。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組胎盤組織中Survivin mRNA相對表達量比較

早產(chǎn)組產(chǎn)婦胎盤組織中Survivin mRNA相對表達量（0.78±0.27）明顯低于足月產(chǎn)組的（1.41±0.23）， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 Survivin mRNA相對表達量與妊娠時間的相關(guān)性分析 經(jīng)過相關(guān)性分析結(jié)果提示， 早產(chǎn)組產(chǎn)婦平均 Survivin mRNA相對表達量與妊娠時間呈線性正相關(guān)（r2=0.680， F=6.025， P<0.05）， 足月產(chǎn)組平均Survivin mRNA相對表達量與妊娠時間無線性相關(guān)性（r2=0.337， F=0.385， P>0.05）。見表2。

3 討論

早產(chǎn)主要是指母體妊娠時間8～37周就分娩， 是常見的妊娠并發(fā)癥。主要臨床表現(xiàn)為子宮收縮、陰道少量出血、羊水流出、持續(xù)性腰痛等癥狀， 給產(chǎn)婦的生命安全造成威脅。此外， 早產(chǎn)對新生兒的影響也較大， 容易使新生兒出現(xiàn)低體溫、呼吸窘迫綜合征、動脈導管閉合、腦出血、慢性腎病、肺功能障礙等并發(fā)癥， 對新生兒的生命健康和發(fā)育影響較大， 導致新生兒的生存率下降， 致殘率升高。有研究顯示， 約15%早產(chǎn)的新生兒最終死亡[3]。目前， 早產(chǎn)的病因仍不是十分清楚， 但是可以由多因素導致。隨著科技不斷進步， 人們的生活條件有所改善， 許多不合理的飲食習慣和不良的生活習慣都會增加早產(chǎn)的風險， 如吸煙、飲酒等。在人們研究胎盤病變過程中， 發(fā)現(xiàn)胎盤滋養(yǎng)細胞的異常發(fā)育是導致早產(chǎn)的重要原因， 其中胎盤滋養(yǎng)細胞Survivin因子表達不足能夠使細胞過度凋亡， 進而可以引起胎盤功能低下， 最終導致早產(chǎn)。Survivin是胚胎組織及腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制新基因?？芍苯幼饔糜贑aspase-3和Caspase-7活性減輕細胞凋亡[4]， 也可參與調(diào)控周期蛋白激酶CDK4和CDK2相互作用阻斷凋亡信號通路[5]。Survivin的表達對于妊娠的結(jié)局有著極為重要的調(diào)控效果。研究發(fā)現(xiàn)， 胎盤Survivin表達降低是導致妊娠期高血壓尤其是重度子癇的關(guān)鍵原因， 也與反復(fù)性、復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)密切相關(guān)[6]。同時， 胎盤Survivin表達量與胎盤重量、新生兒體重也呈正相關(guān)[7]。然而， 胎盤的重量和成熟度關(guān)系密切。在自然早產(chǎn)患者中凋亡抑制因子Survivin的表達水平下降會促使細胞過度凋亡現(xiàn)象的發(fā)生， 致使胎盤功能下降， 不利于胎盤成熟[8]。王莉等[9]觀察早產(chǎn)患者的胎盤滋養(yǎng)細胞發(fā)現(xiàn)， 其中Survivin表達量顯著性下降， 從而導致滋養(yǎng)細胞侵襲不足、胎盤著床過淺， 進而發(fā)生早產(chǎn)[9， 10]。

本研究觀察了不同孕周期（28～42周）產(chǎn)婦胎盤中Survivin mRNA相對表達量， 結(jié)果顯示早產(chǎn)組產(chǎn)婦胎盤組織中Survivin mRNA相對表達量（0.78±0.27）明顯低于足月產(chǎn)組的（1.41±0.23）， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。這與徐小華等[8]研究結(jié)果一致。同時， 本研究還發(fā)現(xiàn)， 在早產(chǎn)組產(chǎn)婦胎盤滋養(yǎng)細胞中Survivin mRNA相對表達量與妊娠時間成線性正相關(guān)， 這也進一步證實了Survivin在促進胎盤成熟中的作用。

綜上所述， 早產(chǎn)是一項威脅產(chǎn)婦和新生兒生命健康的重要問題， 雖然病因尚未明確， 但可以發(fā)現(xiàn)許多誘發(fā)因素可以導致早產(chǎn)。通過不斷研究發(fā)現(xiàn)， 胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡與早產(chǎn)有關(guān)， 而Survivin因子表達不足會使胎盤滋養(yǎng)細胞凋亡， 進而使胎盤功能低下， 最終導致早產(chǎn)的發(fā)生。通過本次研究， 為以后臨床研究相關(guān)內(nèi)容提供依據(jù)。

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[收稿日期：2020-06-08]