楊子明，張 利，劉金磊，李典鵬，黃仕訓(xùn)

(廣西壯族自治區(qū)中國(guó)科學(xué)院廣西植物研究所，廣西植物功能物質(zhì)研究與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西桂林 541006)

0 引言

石筆木(Tutcheriachampioni)屬于杜鵑花目山茶科石筆木屬[1]，廣西是其主產(chǎn)地之一。研究表明，石筆木葉含有多糖、黃酮、多肽、氨基酸、蛋白質(zhì)、還原糖、內(nèi)脂、有機(jī)酸、蒽醌類、甾體類、三萜類、生物堿類和揮發(fā)油類等多種成分，具有較好的生理活性[2-5]。在民間，石筆木的幼嫩莖葉通常被加工成茶飲，不僅能提神，還具有治療傷風(fēng)感冒、腸胃不適、腸胃炎或痢疾等功效。石筆木花色淡黃，外觀和“茶族皇后”金花茶非常相似[6]，具備較好的園林觀賞價(jià)值，已經(jīng)被大面積推廣種植。雖然民間認(rèn)為石筆木茶飲有許多治病和保健功能，但未見相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道。為深度開發(fā)和利用石筆木的植物資源，本研究首次在小鼠身上實(shí)驗(yàn)探討石筆木茶水對(duì)小鼠機(jī)體的影響，以期為石筆木在醫(yī)藥、保健品或健康產(chǎn)品方面的開發(fā)和利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

本實(shí)驗(yàn)所用的新鮮石筆木葉購(gòu)自廣西壯族自治區(qū)靖西市集市(采摘時(shí)間為2017年5月15日)，烘干后存放，經(jīng)廣西植物研究所園林園藝研究中心鑒定為山茶科石筆木屬植物石筆木的葉。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)昆明小鼠，體重18—22 g，由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(湘)2017-0004。

1.3 儀器

半自動(dòng)生化分析儀(RT-9100型)購(gòu)自深圳雷社生命科學(xué)股份有限公司，臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(TGL-16R型)購(gòu)自珠海黑馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司，電子恒溫不銹鋼水浴鍋(H22-1型)購(gòu)自上海宜昌儀器紗篩廠，電子天平(METTLER AT200型)購(gòu)自上海菁海有限公司。

1.4 試劑

白蛋白(Alb)測(cè)試盒、總蛋白(TP)測(cè)試盒、葡萄糖(Glu)測(cè)試盒、肌酐(Cr)測(cè)試盒、血尿素氮(BUN)測(cè)試盒、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)測(cè)試盒、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)測(cè)試盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所，甘油三酯(TG)測(cè)試盒、總膽固醇(T-CHO)測(cè)試盒購(gòu)自長(zhǎng)春匯力生物技術(shù)有限公司。

1.5 分組及給藥

選取SPF級(jí)昆明小鼠72只，雌雄各半，隨機(jī)分成4組，雌雄分開飼養(yǎng)。將4組小鼠隨機(jī)分為石筆木茶水低、中、高劑量組以及空白對(duì)照組，待其適應(yīng)環(huán)境后開始實(shí)驗(yàn)。低、中、高劑量組投喂相應(yīng)濃度的石筆木茶水，空白組投喂等量的蒸餾水，小鼠自由飲用，連續(xù)90 d。石筆木茶水制作方法：分別稱取2.5，5.0，10.0 g烘干后的石筆木葉，加100℃純凈水1 000 g，室溫浸泡60 min，過(guò)濾取上清液即為低、中、高濃度的茶水。

1.6 記錄及血清檢測(cè)

每天觀察小鼠的外觀、行為、活動(dòng)、精神狀態(tài)等，記錄每組小鼠飲食量和飲水量，按時(shí)稱量小鼠體重，計(jì)算小鼠的食物利用率。最后一次給藥后，小鼠禁食不禁水一晚，進(jìn)行眼球取血，解剖后獲得心臟、肝臟、脾臟、腎臟并稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。計(jì)算公式：臟器指數(shù)=器官重量(mg)/體重(g)。樣品血液離心后獲得血清，利用試劑盒測(cè)量血清中Glu、TP、Alb、T-CHO、TG、Cr、BUN、ALT、AST的含量及活性。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果與分析

2.1 石筆木茶水對(duì)小鼠體重的影響

小鼠體重的變化在一定程度上可以反映小鼠生長(zhǎng)發(fā)育情況[7]，也在一定程度上間接反映了飲用石筆木茶水對(duì)小鼠機(jī)體的影響。由表1可知，實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，小鼠隨機(jī)分配到各組中，與空白對(duì)照組比較，各石筆木茶水組的體重沒(méi)有顯著性差異。經(jīng)過(guò)90 d投喂石筆木茶水，各組小鼠體重都顯著增加，但與空白對(duì)照組比較，各石筆木茶水組的體重沒(méi)有顯著性差異。

表1 石筆木茶水對(duì)小鼠體重的影響

2.2 石筆木茶水對(duì)小鼠飲食量、飲水量以及食物利用率的影響

小鼠飲食量、飲水量的變化在一定程度上可以反映小鼠生理狀況[8]，本研究中也在一定程度上間接地反映了飲用石筆木茶水對(duì)小鼠機(jī)體的影響。由表2可知，在90 d實(shí)驗(yàn)期間，各組小鼠都正常飲食飲水，沒(méi)有異常情況出現(xiàn)，體重增加也在合理范圍內(nèi)；與空白對(duì)照組比較，各石筆木飲茶組的飲食量、體重增加量以及食物利用率都沒(méi)有顯著性改變；石筆木飲茶低、中、高劑量組飲水量均低于空白組飲水量，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 石筆木茶水對(duì)小鼠飲食飲水量以及食物利用率的影響

2.3 石筆木茶水對(duì)小鼠主要臟器指數(shù)的影響

肝臟、腎臟、心臟、脾臟是動(dòng)物機(jī)體的重要器官，肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、心臟指數(shù)、脾臟指數(shù)可以在一定程度上反映小鼠機(jī)體的損害情況[9]。由表3可知，各組小鼠的肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、心臟指數(shù)、脾臟指數(shù)都在正常范圍內(nèi)；與空白對(duì)照組比較，各石筆木茶水組的肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、心臟指數(shù)、脾臟指數(shù)都沒(méi)有顯著性差異。

表3 石筆木茶水對(duì)小鼠主要臟器指數(shù)的影響

2.4 石筆木茶水對(duì)小鼠肝功能的影響

ALT、AST是反映肝臟損傷最常用的，也是較敏感的指標(biāo)，如果ALT、AST升高，說(shuō)明肝臟可能受到了損害[10]。TP、Alb在一定程度上也可以反映肝臟功能變化，TP、Alb降低表明肝功能可能受損[11]。由表4可知，各組小鼠的ALT、AST、TP、Alb都在正常范圍內(nèi)；與空白對(duì)照組比較，各石筆木茶水組的ALT、AST、TP、Alb都沒(méi)有顯著性差異。

表4 石筆木茶水對(duì)小鼠肝功能的影響

2.5 石筆木茶水對(duì)小鼠腎功能的影響

Cr、BUN是反應(yīng)腎臟損傷最常用指標(biāo)；Cr是肌酸的代謝產(chǎn)物，其生成、代謝與排出受腎外因素影響較少，能較客觀地反映腎臟功能，是較為理想的指標(biāo)[12]；BUN是蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生的氨在肝臟經(jīng)鳥氨酸循環(huán)生成的終產(chǎn)物，BUN增高見于急慢性腎炎、各種原因所致急慢性腎功能障礙、心衰、休克、燒傷等[13]。由表5可知，各組小鼠的Cr、BUN都在正常范圍內(nèi)；與空白對(duì)照組比較，各石筆木茶水組的Cr、BUN都沒(méi)有顯著性差異。

2.6 石筆木茶水對(duì)小鼠血糖、血脂的影響

血糖、血脂是反應(yīng)機(jī)體健康狀況的最常用指標(biāo)[14]，血糖、血脂的異常升高或降低都指示機(jī)體代謝出了問(wèn)題。由表6可知，各組小鼠的TG、T-CHO、Glu都在正常范圍內(nèi)；與空白對(duì)照組比較，各石筆木茶水組的TG、T-CHO、Glu都沒(méi)有顯著性差異。

表5 石筆木茶水對(duì)小鼠腎功能的影響

表6 石筆木葉茶水對(duì)小鼠血脂血糖的影響

3 結(jié)論

由本研究結(jié)果可知，各劑量組飲用石筆木茶水后對(duì)小鼠體重增加量、飲食量以及食物利用率都沒(méi)有影響，說(shuō)明石筆木茶水對(duì)小鼠機(jī)體沒(méi)有傷害。在平時(shí)的飼養(yǎng)觀察中也發(fā)現(xiàn)石筆木茶水各劑量組小鼠行為及毛色等各方面均表現(xiàn)正常，與空白對(duì)照組小鼠一致。石筆木茶水各劑量組飲茶水量顯著低于空白組飲水量，其原因可能是石筆木茶水口感不好，小鼠不喜歡飲用或者因?yàn)槭P木茶水具有生津解渴的作用。各劑量組小鼠飲用石筆木茶水后，肝臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、心臟指數(shù)、脾臟指數(shù)都沒(méi)有顯著性變化，說(shuō)明石筆木茶水對(duì)小鼠重要器官?zèng)]有顯著影響；ALT、AST、TP、Alb、Cr、BUN沒(méi)有發(fā)生顯著性變化，說(shuō)明飲用石筆木茶水不會(huì)損害小鼠肝臟、腎臟；TG、T-CHO、Glu沒(méi)有發(fā)生顯著性變化，說(shuō)明飲用石筆木茶水不影響小鼠機(jī)體正常代謝。本研究結(jié)果為石筆木茶飲產(chǎn)品開發(fā)提供了一定安全依據(jù)。