宋玉芹 馬 晨 周 博※ 文繼紅

輸血是臨床上一種高效的代償性治療措施和搶救手段，但反復(fù)多次輸血產(chǎn)生不規(guī)則抗體的風(fēng)險加大，不規(guī)則抗體是造成輸血前交叉配血困難和出現(xiàn)輸血不良反應(yīng)的重要因素。鑒于我國已逐漸步入人口老齡化社會，老年患者機(jī)體的修復(fù)能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)達(dá)不到青年人的水平，且多患有各種基礎(chǔ)疾病，老年患者的安全輸血問題應(yīng)當(dāng)引起臨床醫(yī)生的足夠重視。本站實驗室在工作中發(fā)現(xiàn)1老年病例抗-M、抗-C和抗-Fyb引起交叉配血不合，現(xiàn)報道如下。

1.資料與方法

1.1 患者資料 高某某，男性，72 歲，因“原發(fā)性肝癌并上消化道出血（腫瘤直徑約12cm，巨塊型，位于肝右后葉6 ～7 段間）”入院。在控制出血的基礎(chǔ)上，多次輸注去白懸浮紅細(xì)胞，輸注總劑量14個單位，無交叉配血困難及輸血反應(yīng)發(fā)生。最近一次住院，再次申請輸血時出現(xiàn)血型不規(guī)則抗體篩選試驗陽性，盲式交叉配血找不到相合血液，遂送我站血液檢測中心血型參比實驗室進(jìn)行相關(guān)檢測。

1.2 試劑與儀器 試劑：抗-A／B標(biāo)準(zhǔn)血清（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號：201900425）；抗-D（IgM ＋I(xiàn)gG）抗血清（MILLIPORE英國，批號：BMI1804B）；抗-C抗血清（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號20193001）；抗-c 抗血清（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號：20183102）；抗-%抗血清（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號20193201）；抗-e 抗血清（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號20183302）；ABO血型反定型紅細(xì)胞（北京金豪制藥股份有限公司，批號：20200301005）；抗體篩選細(xì)胞（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號20201003）；改良凝聚胺試劑（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號20197505）；血型檢測卡（BIO-DAD美國，批號：50093.65.12）；譜細(xì)胞（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，批號20200226）；抗人球蛋白試劑（荷蘭Sanquin 公司，批號：8000252635）；抗-M 抗血清（荷蘭Sanquin 公司，批號：8000260143）；抗-N 抗血清（荷蘭Sanquin 公司，批號：8000248625）；抗-Fya抗血清（荷蘭Sanquin 公司，批號：8000236190）；抗-Fyb抗血清（荷蘭Sanquin 公司，批號：8000255205）；KA-2200 血清學(xué)專用離心機(jī)（日本久保田公司）；37℃恒溫水浴箱；卡式恒溫孵育器（美國DiaMed公司）；微柱凝膠卡離心機(jī)（西班牙Grifols 公司）。所有儀器參照說明書使用，所有試劑均在有效期內(nèi)。

1.3 實驗方法 ABO正反定型實驗、抗人球蛋白實驗、抗體鑒定實驗及交叉配血及微柱法抗原分型鑒定都嚴(yán)格按照文獻(xiàn)［1］的方法和科室質(zhì)量管理手冊中SOP文件操作。

2.結(jié)果

2.1 ABO血型鑒定（試管法及微柱法）ABO正反定型結(jié)果一致，血型為O型。

2.2 Rh血型鑒定（試管法）ccDEE型。

2.3 MN血型鑒定（試管法）NN型。

2.4 Duffy血型鑒定（試管法）Fy（a ＋b－）型。

2.5 抗人球蛋白實驗（試管法） 醫(yī)院打電話述盲配同型8個單位懸浮紅細(xì)胞均不合，抗體篩選實驗陽性，猜測患者有不規(guī)則抗體存在。本實驗室對送檢血樣進(jìn)行抗人球蛋白實驗，發(fā)現(xiàn)直接抗人球蛋白實驗陰性，篩選細(xì)胞在鹽水介質(zhì)中Ⅰ、Ⅱ細(xì)胞凝集；Ⅱ、Ⅲ細(xì)胞在凝聚胺和抗人球蛋白介質(zhì)中有凝集，結(jié)果見表1（注：IS：鹽水介質(zhì)立即離心，Poly：凝聚胺試驗，IAT：間接抗球蛋白試驗）。

表1 患者血清與抗篩細(xì)胞反應(yīng)格局與結(jié)果（批號：20201003）

2.6 抗體特異性鑒定（試管法－經(jīng)典抗人球?qū)嶒灒?從篩選細(xì)胞格局中初步推斷血清中除了存在MN 血型系統(tǒng)的抗體外，可能還存在其他血型系統(tǒng)的抗體，抗體特異性用譜細(xì)胞進(jìn)行鑒定?；颊哐搴妥V細(xì)胞反應(yīng)格局見表2。譜細(xì)胞在鹽水介質(zhì)中出現(xiàn)2、6、9號陰性，其他細(xì)胞凝集。放置37℃10 分鐘后，所有細(xì)胞凝集消失，根據(jù)譜細(xì)胞陰性結(jié)果排除陽性的原則，符合抗-M格局，且為鹽水性質(zhì)抗體。在去除鹽水介質(zhì)干擾后，繼續(xù)37℃孵育60分鐘，3次洗滌后，加入抗人球蛋白試劑。2、5、6、7、9 號細(xì)胞號陰性，其他細(xì)胞凝集。根據(jù)譜細(xì)胞反應(yīng)格局表判定為Rh 血型系統(tǒng)抗-C 和Duffy 血型系統(tǒng)抗-Fyb，抗體性質(zhì)為IgG型。

表2 患者血清與譜細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果（批號：20200226）

2.7 交叉配血實驗 從本站血供科庫存血40 個單位里篩選出一袋O型，RhD陽性，其他血型為“ccEE，MN，F(xiàn)y（a ＋b－）”的血液做主次側(cè)交叉配血實驗，在鹽水、凝聚胺2 種介質(zhì)中呈弱凝集、無溶血，微柱法及經(jīng)典抗人球法無凝集、無溶血，輸注該袋懸浮紅細(xì)胞2U。追蹤患者，輸血效果良好，無輸血不良反應(yīng)。

3.討論

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步及輸血醫(yī)學(xué)的發(fā)展，老年患者選擇輸血治療的人數(shù)也日益增多［2］。由于老年患者基礎(chǔ)疾病復(fù)雜、心肺功能代償有限等特點，往往更需要輸血［3］。但輸血是一把雙刃劍，伴隨著輸血次數(shù)的增多，產(chǎn)生不規(guī)則抗體的風(fēng)險也加大，其中又以產(chǎn)生多重混合抗體最為棘手。有文獻(xiàn)［4］報道不規(guī)則抗體在不同年齡階段患者中的發(fā)生頻率以老年組最高（年齡＞66歲）。

在輸血前檢查中導(dǎo)致交叉配血不配合的成因很多，因輸血、妊娠等原因造成機(jī)體內(nèi)存在意外抗體，如抗體篩檢試驗陽性并且在抗體特異性鑒定時出現(xiàn)血清與譜細(xì)胞反應(yīng)強(qiáng)度有明顯差別應(yīng)高度懷疑是否為混合抗體［5］。這例患者共產(chǎn)生了3個血型系統(tǒng)的抗體，這在臨床輸血工作中還是比較少見的，為其選擇相應(yīng)抗原陰性的血液相當(dāng)困難，只找到了Rh 血型系統(tǒng)和Duffy血型系統(tǒng)相合的血液，MN 血型系統(tǒng)鹽水法、凝聚胺法交叉配血不合，微柱法及經(jīng)典抗人球法相合。本例抗M抗體為鹽水抗體，提示可能為天然產(chǎn)生，不是輸血免疫而來?？?M 抗體只有在37℃或抗人球法陽性時才具備臨床意義［6］。

較長時間反復(fù)輸血的患者產(chǎn)生不規(guī)則抗體的概率遠(yuǎn)大于單次輸血［7］。老年患者的機(jī)體功能衰退、免疫力降低，發(fā)生輸血不良反應(yīng)的概率相對較高。因此，針對長期嚴(yán)重貧血需要進(jìn)行頻繁輸血治療的老年患者，臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)其特殊的生理特點，盡早與所屬醫(yī)院輸血科充分溝通，制定單一病種、個體化精準(zhǔn)輸血治療策略，盡可能選擇多個血型系統(tǒng)抗原相同的血液制劑進(jìn)行同型輸注，以避免產(chǎn)生同種免疫，保障老年患者的輸血安全。