河南省駐馬店

市食品藥品檢驗(yàn)所（463000）葉英劍 李啟彬 劉園園

安神補(bǔ)心丸是對(duì)心血不足、虛火內(nèi)擾所引發(fā)的頭暈耳鳴、心悸失眠進(jìn)行治療的常用中成藥丸劑，其可發(fā)揮有效的養(yǎng)心安神作用。有不法分子為獲取高額利潤(rùn)，開(kāi)始應(yīng)用第一代H1受體拮抗劑非法加入到安神補(bǔ)心丸中，由于氯苯那敏的購(gòu)買成本低，因此成為主要的加入藥物[1]。馬來(lái)酸氯苯那敏也被稱之為撲爾敏，其不僅可拮抗H1受體從而達(dá)到抗過(guò)敏功效，同時(shí)還可對(duì)中樞神經(jīng)起到一定抑制作用，由此會(huì)導(dǎo)致困倦等不良反應(yīng)[2]。本次研究應(yīng)用快速液相-質(zhì)譜串聯(lián)儀開(kāi)展一級(jí)質(zhì)譜掃描，取高響應(yīng)色譜峰經(jīng)由氣相-質(zhì)譜庫(kù)開(kāi)展檢索，對(duì)其包含的成分進(jìn)行確認(rèn)，與對(duì)照品溶液與供試品溶液進(jìn)行比較，探討液相-質(zhì)譜串聯(lián)法檢測(cè)安神補(bǔ)心丸中H1抗組胺藥與鎮(zhèn)靜催眠藥的效果。

1 材料與方法

1.1 研究材料 研究所應(yīng)用的儀器設(shè)備包括Super Sminon5830 Tmpsen快速液相色譜-質(zhì)譜串聯(lián)儀，Super Sminon8255N氣相色譜-質(zhì)譜儀，上海諾威科設(shè)備有限公司生產(chǎn)的DHK單槽式超聲波清洗儀，廣州愛(ài)華精密儀器有限公司生產(chǎn)的分析天平。研究所應(yīng)用的試劑包括去離子水、乙腈（色譜純），其余試劑為分析純，生產(chǎn)廠家為江蘇諾美化學(xué)試劑廠。由中國(guó)藥品生物制品檢定所取得地西泮對(duì)照品（批號(hào)172157-2 0 1 8 6 4）、艾司唑侖對(duì)照品（批號(hào)186059-201820）、氯硝西泮對(duì)照品（批號(hào)172281-201836）以及馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品（批號(hào)193346-201844）。安神補(bǔ)心丸分別購(gòu)自六個(gè)廠家，分別為蘭州佛慈制藥股份有限公司（批號(hào)：H2006847）、上海和黃藥業(yè)（批號(hào)：H20036541）、廣州藍(lán)天制藥有限責(zé)任公司（批號(hào)：H20096651）、江蘇美林制藥集團(tuán)（批號(hào)：H20084785）、山西安繼堂制藥有限公司（批號(hào)：H20125645）、北京天倫制藥（批號(hào)：H20080032）。全部藥物均從藥店隨機(jī)購(gòu)買。

1.2 研究方法 快速液相色譜所應(yīng)用的色譜柱為ZORBAX MED-C18色譜柱，選用乙酸銨溶液與乙腈混合液作為流動(dòng)相，二者之間的比例為50∶50，體積流量控制為每分鐘0.3mL，進(jìn)樣量控制為10μL，柱溫為室溫。串聯(lián)質(zhì)譜所應(yīng)用的干燥氣流量控制為每分鐘10L，溫度控制為325℃；霧化氣壓力控制為20psi，鞘流氣流量控制為每分鐘10L，溫度控制為400℃，毛細(xì)管電壓為4000v。一級(jí)質(zhì)譜實(shí)施50～1000m/z范圍全掃描。具體掃描條件如附表。

在進(jìn)行混合對(duì)照品溶液配制時(shí)，分別選取地西泮、艾司唑侖、氯硝西泮對(duì)照品，加入流動(dòng)相，將其進(jìn)行溶解搖勻，然后使其濃度保持為5ng/mL。在對(duì)供試品溶液進(jìn)行配制時(shí)，采用不同廠家生產(chǎn)的安神補(bǔ)心丸各3丸，將藥物放入研磨中碾碎，然后放入到量瓶中，量瓶容積為100mL，加入60mL流動(dòng)相，放置在渦旋機(jī)上開(kāi)展5min渦旋，渦旋完成后放入到超聲機(jī)中進(jìn)行5min超聲處理，冷卻后采用流動(dòng)相加入至刻度，搖勻后過(guò)濾。

干擾試驗(yàn)的開(kāi)展方法，通過(guò)將對(duì)照品溶液、供試品溶液進(jìn)行混合后，各進(jìn)樣10μL，供試品色譜中全部未出現(xiàn)和混合對(duì)照品中所具備的對(duì)照品色譜保留時(shí)間一致的色譜峰。但有一批號(hào)的供試品溶液在接受一級(jí)質(zhì)譜掃描時(shí)，掃描圖像中有未知成分色譜峰出現(xiàn)，且其具備較高的響應(yīng)度，如附圖。通過(guò)在氣相色譜-質(zhì)譜庫(kù)中進(jìn)行檢索，同時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)開(kāi)展確證，結(jié)果顯示最高峰物質(zhì)為氯苯那敏。

附表 串聯(lián)質(zhì)譜工作條件

附圖 出現(xiàn)高響應(yīng)度未知成分色譜峰的供試品溶液的快速液相-質(zhì)譜總離子流圖

氣相色譜-質(zhì)譜檢查：所選用的毛細(xì)管柱型號(hào)為DHK-5kk型，長(zhǎng)度為28m，內(nèi)徑為0.25mm，固定液膜厚度確定為0.22μm，體積流量控制為每分鐘1.0mL。將進(jìn)樣口的溫度進(jìn)行調(diào)整，使其保持在280℃，接口的溫度保持在250℃。離子源、四級(jí)桿的溫度分別為245℃以及170℃，電子能量控制在80eV；在開(kāi)展檢查的過(guò)程中，初始溫度設(shè)置為45℃，然后每分鐘將溫度升高10℃，直至其達(dá)到225℃，維持時(shí)間總共為16min，進(jìn)樣量控制在1μL。

在對(duì)供試品溶液進(jìn)行配置時(shí)，配置方法為采集液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)出的未知成分峰樣品3丸，將藥物放入研磨中碾碎，然后放入到量瓶中，量瓶容積為100mL，加入60mL甲醇，放置在渦旋機(jī)上開(kāi)展5min渦旋，渦旋完成后放入到超聲機(jī)中進(jìn)行5min超聲處理，冷卻后采用流動(dòng)相加入至刻度，搖勻后過(guò)濾。在對(duì)對(duì)照品溶液進(jìn)行配置時(shí)，采用馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品，放入到量瓶中，然后向量瓶中加入甲醇使馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品被溶解，將其配置成濃度為60μg/mL的溶液。

2 結(jié)果和討論

有資料報(bào)道稱，中成藥成分和輔料的種類較多，因此為了將其他成分和輔料對(duì)待檢測(cè)物質(zhì)檢測(cè)結(jié)果造成的干擾降低，就需要應(yīng)用有機(jī)溶劑開(kāi)展多步萃取提取[3]。但對(duì)于部分制劑而言，其所具備的成分已經(jīng)十分復(fù)雜，同時(shí)質(zhì)譜串聯(lián)儀所具備的敏感性極高，因此若開(kāi)展多步萃取提取，則會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)數(shù)量眾多的有機(jī)溶劑峰，從而干擾檢測(cè)工作的順利開(kāi)展，使儀器的損耗程度加重，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的過(guò)程變得更為繁瑣，需耗費(fèi)更長(zhǎng)的試驗(yàn)時(shí)間[4]。而對(duì)儀器檢測(cè)是否能夠成功造成影響的主要因素為前處理工作是否有效，本研究通過(guò)將液質(zhì)串聯(lián)掃描和氣質(zhì)聯(lián)合應(yīng)用，從而有效確定目標(biāo)可測(cè)物，降低了供試品溶液的配置難度。

通過(guò)本次的研究可知，部分廠家生產(chǎn)的安神補(bǔ)心丸中出現(xiàn)了非法摻偽的情況，通過(guò)對(duì)NIST譜庫(kù)開(kāi)展檢索，結(jié)果顯示所摻雜的物質(zhì)為氯苯那敏。通過(guò)對(duì)對(duì)照品溶液中氯苯那敏峰和供試品溶液中相應(yīng)峰的碎片所具備的質(zhì)量數(shù)和豐度開(kāi)展比較，結(jié)果顯示供試品溶液中馬來(lái)酸氯苯那敏具備較高的含量，通過(guò)開(kāi)展計(jì)算可知，每丸藥物中的馬來(lái)酸氯苯那敏含量達(dá)到1.92mg。此外，通過(guò)本次研究結(jié)果可知，在部分中成藥物中，有H1抗組胺類藥物被摻雜其中，同時(shí)摻雜量較高，其屬于不法分子為獲取利益而為之。因此為保障用藥安全，就需要對(duì)中成藥物中化學(xué)藥品的添加情況開(kāi)展更大力度的檢測(cè)工作，從而使中成藥物中的違法添加化學(xué)藥品被有效檢出。建議《中國(guó)藥典》等相關(guān)規(guī)章制度中，需要對(duì)中成藥物中化學(xué)藥品的添加種類、添加量進(jìn)行明確規(guī)定和限制，由此保障中成藥物在發(fā)揮應(yīng)有藥用價(jià)值的同時(shí)，用藥安全性也可得到保證。

綜上所述，液相-質(zhì)譜串聯(lián)法可有效檢測(cè)安神補(bǔ)心丸中H1抗組胺藥與鎮(zhèn)靜催眠藥加入量。