中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第九八九醫(yī)院(471003)聶靜
1.1 一般資料 選取2018年1月~2019年1月我院收治的經(jīng)病理診斷確診的62例三陰性乳癌基因突變患者,年齡為42~69歲,平均年齡為(55.5±4.9)歲,其中23例為患者為Ⅰ期,29例患者為Ⅱ期,7例患者為III期,3例患者為Ⅳ期。納入標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)病理診斷均符合三陰性乳癌基因突變的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[1];未患有其他惡性腫瘤疾病。排除標(biāo)準(zhǔn):入院前接受過其他治療;未具有完整的臨床資料?;颊呒覍僭诹私庀鄳?yīng)的研究方式后簽署知情同意書;使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)患者進(jìn)行分析處理。
1.2 方法 患者入院后第二日,告知其晨起空腹,抽取其4ml靜脈血,檢測步驟為樣本前處理、血液上機(jī)分離腫瘤細(xì)胞、ctc測序。運(yùn)用美國Cyncenio公司研發(fā)的CTC捕獲分離技術(shù)對(duì)CTC突變情況進(jìn)行檢測。運(yùn)用德國Qiagen QiAamp ccfDNA kit技術(shù)對(duì)患者外周血液中的DNA進(jìn)行提取,使用紅細(xì)胞裂解液對(duì)樣本中紅細(xì)胞進(jìn)行裂解,以提取cfDNA。
1.3 觀察指標(biāo) 患者CTC突變與cfDNA突變檢出結(jié)果;cfDNA與ctc的敏感度與特異性。
附表 cfDNA與ctc的敏感度與特異性(例)
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0處理數(shù)據(jù),使用x2檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)方法,計(jì)量資料采用均數(shù)方差表示,兩組間比較,采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用百分率表示且用x2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 患者CTC突變與cfDNA突變檢出結(jié)果經(jīng)檢測可知,在62例患者中,共檢測出50例患者至少存在一種突變,其余12例患者未檢測出任何突變。其中32例突變患者在連續(xù)2次采集的血標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)突變;17例患者在連續(xù)2次采集的標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)相同的突變;3例患者在連續(xù)2次采集的標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)CTC與cfDNA均產(chǎn)生突變。
2.2 cfDNA與ctc的敏感度與特異性 經(jīng)McNemer檢驗(yàn)與Kappa值分析后可知,CTC與cfDNA的一致性較差,見附表。
三陰性乳癌是一種常見的臨床腫瘤疾病,依據(jù)本項(xiàng)研究結(jié)果顯示,80.65%的患者能夠檢測出基因突變現(xiàn)象,并且TP53、PIK3CA、EGFR等類型的檢出率最高。近年來EGFR為三陰性乳癌研究的熱點(diǎn),在該腫瘤疾病中,EGFR的陽性表達(dá)與腫瘤組織的分級(jí)具有密切關(guān)聯(lián),并且通過檢測EGFR的表達(dá)量,能夠在一定程度上輔助臨床醫(yī)生對(duì)患者的預(yù)后進(jìn)行判斷[2]。相比于未出現(xiàn)復(fù)發(fā)的患者而言,出現(xiàn)復(fù)發(fā)的患者可在較大程度上檢測出CTC或cfDNA突變情況[3]。依據(jù)相關(guān)的臨床研究可知,CTC與cfDNA檢測源攜帶不同的突變信息,若能夠?qū)ι鲜鰞煞N突變情況進(jìn)行共同檢測,則能夠更加完整與準(zhǔn)確的反映出患者的基因突變情況,以便能夠?qū)颊叩膹?fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行更加準(zhǔn)確的評(píng)估[4]。
依據(jù)相關(guān)學(xué)者的研究表明,其選取1419例接受新輔助化療前的三陰性乳癌患者,利用空心針對(duì)乳腺組織進(jìn)行穿刺后獲得組織樣本,對(duì)樣本進(jìn)行綜合分析后可知,患者的病理完全緩解率與增殖相關(guān)基因發(fā)生突變存在密切關(guān)聯(lián)。該學(xué)者在樣本組織中共篩選出60個(gè)具有預(yù)測價(jià)值的突變基因,其中38個(gè)基因與細(xì)胞增殖具有密切關(guān)聯(lián)。通過該研究的結(jié)果可知,對(duì)患者的基因突變情況進(jìn)行檢測能夠有效的明確患者的復(fù)發(fā)情況,并對(duì)患者的預(yù)后進(jìn)行良好的判斷。
綜上所述,本文認(rèn)為液態(tài)活檢對(duì)于三陰性乳癌基因突變檢測具有重要作用,能夠有效的明確患者的疾病復(fù)發(fā)與癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移情況;同時(shí)也能夠通過基因突變情況明確三陰性乳癌的生物學(xué)特點(diǎn),從而能夠?yàn)榕R床治療提供一定的借鑒。但臨床相關(guān)人員仍然需要加強(qiáng)研究,以便獲得更加準(zhǔn)確的研究,從而能夠?yàn)槿幮匀榘┑脑\療提供更加可靠保障。