陳莉杰

(湖州婦幼保健院乳腺科，浙江 湖州 313000)

乳腺癌是全球范圍內(nèi)嚴(yán)重威脅女性身心的一種惡性腫瘤，臨床調(diào)查顯示其發(fā)病率呈不斷上升趨勢[1]。隨著人們健康意識的不斷提高，乳腺鉬靶X線、MRI、乳腺超聲、乳房自檢等乳腺癌診斷策略使得越來越多女性接受，從而為早發(fā)現(xiàn)和早治療提供了更多可能。三陰性乳腺癌是一種特殊類型的乳腺癌，占乳腺癌總數(shù)的15%～20%，其表現(xiàn)為人類表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor，HER2)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)和雌激素受體(estrogen receptor，ER)均表達(dá)為陰性[2]。三陰性乳腺癌具有侵襲性強(qiáng)、惡性程度高、容易出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及預(yù)后不佳等特點(diǎn)，故而早發(fā)現(xiàn)、早治療尤為重要。Ki67是細(xì)胞周期活性相關(guān)蛋白，與細(xì)胞生長分?jǐn)?shù)具有良好相關(guān)性，并且在多種惡性腫瘤中均有表達(dá)[3]。本文探討Ki67在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及其與臨床預(yù)后相關(guān)性分析，旨在為臨床診斷和治療三陰性乳腺癌提供參考。

1資料與方法

1.1 一般資料

收集湖州婦幼保健院于2015年5月至2017年5月收治的三陰性乳腺癌患者113例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)穿刺活檢或乳腺癌根治術(shù)，且經(jīng)病理證實(shí)為三陰性乳腺癌；②術(shù)前均未行放化療和內(nèi)分泌治療；③均為女性。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他類型乳腺癌或惡性腫瘤者；②手術(shù)禁忌者；③精神疾病者。113例患者年齡32～78歲，平均年齡(58.93±7.25)歲；臨床分期：Ⅰ期18例，Ⅱ期54例，Ⅲ期41例；平均腫瘤大小(3.25±0.87)cm。

1.2方法

1.2.1 免疫組化法測定Ki67表達(dá)

取所有患者乳腺癌組織標(biāo)本，經(jīng)10%甲醛溶液固定24h、脫水、石蠟包埋，以免疫組化法測定Ki67表達(dá)。其中以PBS溶液代替一抗作為陰性對照，以已知陽性的乳腺癌組織標(biāo)本作為陽性對照組。

1.2.2 結(jié)果判定

Ki67表達(dá)于細(xì)胞核，染色后以細(xì)胞核內(nèi)棕色顆粒為陽性，取5個高倍視野，每個視野計數(shù)100個，根據(jù)Ki67陽性細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的比例判定其表達(dá)情況：①(-)：所占比例<15%；②(+)：所占比例≥15%且<30%；③(++)：所占比例≥30%且<45%；④(+++)：所占比例≥45%且<60%；⑤(++++)：所占比例≥60%。

1.3 隨訪

所有患者均隨訪至2020年5月31日，采用門診定期隨訪復(fù)查方式，以隨訪末或死亡為隨訪終點(diǎn)，觀察3年無病生存期(disease free survival，DFS)和總生存期(overall survival，OS)，其中以手術(shù)確診之日至出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、局部或區(qū)域復(fù)發(fā)的時間為DFS，以手術(shù)確診之日至由于任何原因造成患者死亡的時間為OS。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

運(yùn)用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 22.0軟件處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料采用例數(shù)和百分比表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 Ki67在三陰性乳腺癌中表達(dá)情況

113例三陰性乳腺癌組織中，其中Ki67陽性表達(dá)患者69例，陽性表達(dá)率為61.06%；Ki67陰性表達(dá)患者44例，陰性表達(dá)率為38.94%，見表1。

表1 Ki67在三陰性乳腺癌中表達(dá)情況

2.2 Ki67表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系

Ki67陽性表達(dá)與年齡、臨床分期和腫瘤大小無顯著相關(guān)性(均P>0.05)，腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者Ki67陽性表達(dá)率顯著高于無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 Ki67表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系[n(%)]

2.3 Ki67表達(dá)與患者3年DFS關(guān)系

三陰性乳腺癌113例患者至末次隨訪時，3年DFS患者87例，占76.99%；3年OS患者97例，占85.84%。Ki67陰性表達(dá)3年DFS患者39例，占88.64%，Ki67陽性表達(dá)3年DFS患者48例，占69.57%，Ki67陰性表達(dá)者3年DFS率顯著高于Ki67陽性表達(dá)者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.019)，見表3。

表3 Ki67表達(dá)與患者3年DFS關(guān)系[n(%)]

2.4 Ki67表達(dá)與患者3年OS關(guān)系

Ki67陰性表達(dá)3年OS患者42例，占95.45%，Ki67陽性表達(dá)3年DFS患者55例，占79.71%，Ki67陰性表達(dá)者3年OS率顯著高于Ki67陽性表達(dá)者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.019)，見表4。

表4 Ki67表達(dá)與患者3年OS關(guān)系

3 討論

3.1 三陰性乳腺癌治療的難點(diǎn)

乳腺癌是高度異質(zhì)性的一種惡性腫瘤，在生物學(xué)行為、免疫表型及組織學(xué)形態(tài)等發(fā)面存在較大差異。三陰性乳腺癌以浸潤性導(dǎo)管癌為主，呈高組織學(xué)分級，腫瘤侵襲性強(qiáng)，很容易出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)及浸潤轉(zhuǎn)移，且該類患者預(yù)后較差[4]。目前，對三陰性乳腺癌患者無法針對PR受體和ER受體陽性進(jìn)行內(nèi)分泌治療以及HER2陽性的靶向治療，臨床上三陰性乳腺癌治療方案較少[5]。因此，三陰性乳腺癌患者應(yīng)用內(nèi)分泌治療、放療和化療等方法效果并不十分理想，而其中化療是唯一的全身性治療，乳腺癌治療指南中尚無針對三陰性乳腺癌制定標(biāo)準(zhǔn)的治療方案[6]。

3.2 Ki67與三陰性乳腺癌的關(guān)系

臨床研究報道顯示，三陰性乳腺癌分子生物學(xué)特征對制定有效治療方案以及判斷腫瘤預(yù)后具有重要意義[7]。Ki67主要是細(xì)胞核內(nèi)分裂增殖相關(guān)蛋白，并且是具有增殖活性的細(xì)胞核中表達(dá)的一種核抗原，組成包含15個外顯子和14個內(nèi)含子，分子結(jié)構(gòu)具有特異性。Ki67抗原在有絲分裂經(jīng)磷酸化及去磷酸化，在細(xì)胞周期的G0期不表達(dá)，而在細(xì)胞周期的G1、S、G2和M期均有不同程度表達(dá)。Ki67在細(xì)胞核內(nèi)隨細(xì)胞周期改變，定位形式復(fù)雜，特異性明顯。Ki67在腫瘤細(xì)胞增殖活性判斷中具有較高的靈敏度，能夠準(zhǔn)確反映細(xì)胞增殖狀態(tài)，以及與腫瘤發(fā)生、發(fā)展及增殖轉(zhuǎn)移有關(guān)[8]。細(xì)胞增殖失控且向周圍侵襲轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最基本的生物學(xué)特性，Ki67表達(dá)越高，則細(xì)胞增殖活性也越高。本文研究結(jié)果顯示，113例三陰性乳腺癌組織中，其中Ki67陽性表達(dá)率為61.06%。Ki67陽性表達(dá)與患者年齡、臨床分期和腫瘤大小無顯著相關(guān)性(P>0.05)，而腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者Ki67陽性表達(dá)率顯著高于無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)。研究報道顯示Ki67表達(dá)在惡性腫瘤中遠(yuǎn)高于正常組織，且其與惡性腫瘤發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān)[9]。多數(shù)研究證實(shí)Ki67表達(dá)程度在乳腺良、惡性腫瘤鑒別中具有重要作用，且可作為判斷腫瘤侵襲能力的新型的一種分子蛋白標(biāo)志物[10]。此外，本研究結(jié)果結(jié)果還發(fā)現(xiàn)Ki67陰性表達(dá)者3年DFS率、3年OS率均顯著高于Ki67陽性表達(dá)者(P<0.019)，提示Ki67表達(dá)與患者預(yù)后密切相關(guān)，Ki67陽性表達(dá)越高生存越短。Pan等研究發(fā)現(xiàn)，三陰性乳腺癌患者Ki-67高表達(dá)與復(fù)發(fā)風(fēng)險和預(yù)后相關(guān)，是DFS或OS的獨(dú)立變量，這與本研究結(jié)果相似[11]。

綜上所述，Ki67在三陰性乳腺癌中高表達(dá)，且與預(yù)后密切相關(guān)，Ki67陽性表達(dá)率越高生存率越低。